Avaliação da resposta imune humoral e celular em animais imunizados com antígenos de yersinia pestis

• Autor(a) principal: Élida Aparecida Leal
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-ARMM9D
• topic: Citocinas IFN- e IL-10; Anticorpos; Vacinas; Yersinia pestis; Resposta imune; Anticorpos; Peste; Citocinas; Vacinas; Yersinia pestis

A peste representa ainda hoje uma ameaça real em diversos continentes, sendo recentemente definida pela Organização Mundial da Saúde como uma doença reemergente. A ocorrência de surtos de peste humana em vários países e a possibilidade de utilização ilegítima da Yersinia pestis como arma biológica reforça a necessidade de se estudar a imunidade induzida pelos potenciais candidatos à vacina, tendo em vista a utilização futura desses antígenos na imunoprofilaxia da peste. Com este intuito, investigou-se a imunogenicidade de preparações antigênicas baseadas na proteína F1 e no extrato total de Y. pestis a fim de verificar a participação destes antígenos na indução da produção de anticorpos, na determinação do fenótipo de linfócitos T esplênicos e no estímulo à produção das citocinas IFN- e IL-10 pelas subpopulações de células T CD4 e CD8. Para isso, utilizou-se camundongos fêmeas Swiss Webster que foram imunizadas, por via intramuscular, com 40 g ou 20 g da proteína F1 purificada e do extrato total de Y. pestis administrados em duas doses com intervalo de 21 dias e uma dose reforço de 4 g e 2 g que foi administrada, por via intravenosa, no 42º dia após a imunização primária. No 45º dia, realizou-se a eutanásia dos animais bem como a coleta do sangue e a retirada do baço. Os títulos de anticorpos anti-F1 induzidos pelos diferentes esquemas de imunização foram avaliados no soro através do teste de hemaglutinação indireta. A análise fenotípica das subpopulações de linfócitos T esplênicos e a detecção intracelular das citocinas IFN- e IL-10 foram feitas por citometria de fluxo utilizando anticorpos monoclonais. Os animais imunizados com o extrato total de Y. pestis nas doses de 40 g e 20 g não apresentaram anticorpos anti-F1, da mesma forma que os animais do grupo controle. Por outro lado, os animais imunizados com o antígeno F1 purificado, tanto na dose de 40 g quanto na dose de 20 g, apresentaram resultados positivos com títulos variando de 1/16 a 1/8132. Com relação à análise fenotípica, foi observado que a média de células T CD3+-CD4+ e TCD3+-CD8+ não difere significativamente entre os diferentes grupos estudados. Quanto à detecção de citocinas foi verificado que o extrato total e o antígeno F1 de Y. pestis não induzem a expressão significativa de IFN- e IL-10 em linfócitos T-CD4+. A proteína F1 também não induz a expressão de IFN- em linfócitos T CD8+, ao contrário do extrato total de Y. pestis. Os resultados apontaram que a proteína F1, embora seja um importante indutor de resposta imune humoral, não é um antígeno imunogênico para célula T e ainda que o extrato total de Y. pestis na dose de 40 g parece favorecer a imunidade celular mediada pelo linfócito T CD8.