Estudo morfológico e molecular de larvas de diplostomoidea (trematoda: digenea) transmitidas por moluscos dulciaquícolas em Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil

• Main Author: Danimar Danilia López Hernández
• Publication Date: 2018
• Format: Master thesis
• Language: por
• Source: Repositório Institucional da UFMG
• Download full: http://hdl.handle.net/1843/34641
• topic: Cercárias; Diplostomoidea; Moluscos; Sequências; Taxonomia; Moleculares; Parasitologia; Cercárias; Moluscos

Os trematódeos pertencentes à superfamília Diplostomoidea parasitam, na fase adulta, aves, mamíferos e répteis, possuindo ciclos biológicos complexos, envolvendo moluscos gastrópodes e diferentes grupos de invertebrados e vertebrados como hospedeiros intermediários. No Brasil, embora mais de 100 espécies tenham sido registradas em vertebrados, incluindo espécies de importância para a piscicultura ou potencialmente zoonóticas, a maioria não possui ciclo biológico e moluscos transmissores conhecidos. No presente estudo, estrigeocercárias obtidas de moluscos coletados em coleções aquáticas de Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil, foram submetidas a estudo morfológico, experimental e molecular. As amostras avaliadas correspondem a larvas previamente coletadas (7 amostras) e provenientes de coletas malacológicas realizadas entre maio de 2016 e maio de 2017 (4 amostras). A amplificação e sequenciamento de região parcial do gene 18S rRNA, da região espaçadora transcrita interna (ITS) e de um fragmento do gene citocromo c oxidase subunidade I (COI) foram realizadas. As sequências obtidas foram comparadas com outras disponíveis no GenBank . Além disso, visando a obtenção de outros estágios evolutivos para identificação taxonômica, as estrigeocercárias obtidas durante as novas coletas malacológicas foram utilizadas para a realização de infecções experimentais envolvendo peixes (Poecilia reticulata) e moluscos (Biomphalaria glabrata) como segundos hospedeiros intermediários, sendo metacercárias obtidas utilizadas para a infecção de aves (Gallus gallus domesticus) e mamíferos (Mus musculus). A utilização da taxonomia integrativa no estudo das estrigeocercárias avaliadas possibilitou a identificação de 6 espécies pertencentes a superfamília Diplostomoidea. Entre os membros da família Diplostomidae, duas espécies, Austrodiplostomum compactum e Hysteromorpha sp., foram encontradas em Biomphalaria straminea. As sequências nucleotídicas obtidas para a primeira espécie foram semelhantes as disponíveis para isolados do parasito oriundos dos EUA, Brasil, México e Peru. Em relação a Hysteromorpha sp., embora a morfologia das cercárias e das metacercárias obtidas experimentalmente em P. reticulata, associada as sequências obtidas pelos marcadores nuclerares, sugerissem coespecificidade com Hysteromorpha triloba, diferenças significativas foram encontradas entre sequências COI de amostras do Brasil e isolados de H. triloba do Canadá e Itália, sugerindo a ocorrência de espécies crípticas neste 8 gênero. Cercárias de Posthodiplostomum nanum foram encontradas em Gundlachia ticaga, sendo metacercárias e um parasito adulto obtidos, respectivamente, em P. reticulata e camundongo infectados experimentalmente. Os dados moleculares e filogenéticos revelaram que, embora P. nanum se agrupe com algumas espécies do gênero oriundos América do Norte e Europa, as diferenças moleculares são signigicativas em relação à maioria dos isolados cogenêricos. Três espécies pertencentes a família Strigeidae foram encontradas também em B. straminea. Entre estas, Cotylurus sp., apresentaram sequências idênticas as obtidas para metacercárias do tipo Tetracocyle encontradas em B. straminea naturalmente infectadas. Uma outra cercária, identificada como Apharyngostrigea sp., possui diferenças moleculares significativas em relação a espécies cogenêricas descritas da América do Norte. Por fim, uma larva identificada como Strigeidae gen. sp., para a qual ensaios experimentais não resultaram em sucesso, não apresentou similaridade com nenhuma das sequências disponíveis para comparação. Os resultados obtidos revelaram novas associações entre moluscos e trematódeos da superfamília Diplostomoidea no Brasil, resultando em um aporte significativo de sequências nucleotídicas para representantes deste grupo de trematódeos.