Estudo comparativo de ensaios bacteriológicos para confirmação da presença de Mycobacterium bovis em amostras teciduais de bovino com lesões compatíveis com tuberculose

• Main Author: Marina de Azevedo Issa
• Publication Date: 2015
• Format: Master thesis
• Language: por
• Source: Repositório Institucional da UFMG
• Download full: http://hdl.handle.net/1843/SMOC-A6DPA6
• topic: isolamento; ácido; Mycobacterium bovis; Middlebrook 7H11; diagnóstico; sulfúrico; Ciência animal

O diagnóstico definitivo da tuberculose animal requer o isolamento do agente etiológico. Entretanto, não há um consenso em relação à melhor metodologia para isolamento primário de Mycobacterium bovis no Brasil. Este estudo avaliou os descontaminantes e meios de cultura mais utilizados no país, visando indentificar a melhor combinação para as amostras brasileiras. Três descontaminantes - hidróxido de sódio (NaOH) 2% (p/v), cloreto de hexadecilpiridinium (HPC) 0,75% (p/v) e ácido sulfúrico (H2SO4) 5% (v/v), e quatro meios de cultura - Middlebrook 7H11 com aditivos e suplemento OADC da marca A (7H11 A), o mesmo meio com suplemento da marca B (7H11 B), ágar sangue tuberculose (B83) e meio de Stonebrink (SB) foram comparados. Considerando o sucesso de isolamento, não houve diferença significativa entre as combinações de descontaminantes e meios, exceto 7H11A combinado a qualquer descontaminante. Entretanto, o escore médio de colônias foi significativamente maior quando as amostras foram descontaminadas com o ácido e inoculadas em 7H11 B ou SB, sem diferença significativa entre eles, embora as colônias tenham aparecido mais cedo no meio 7H11B. A marca comercial do suplemento OADC influenciou a taxa de isolamento e o número de colônias isoladas em Middlebrook 7H11. Foi necessário um período de incubação de até quatro semanas para se detectar todas as amostras positivas inoculadas em 7H11 B após descontaminação com H2SO4 5%, mas houve aumento do número de colônias até a sexta semana de incubação. A melhor estratégia para o isolamento primário de M. bovis das amostras brasileiras foi a descontaminação com H2SO4 a 5% (concentração final) e inoculação em meio Middlebrook 7H11 formulado com suplemento OADC da marca B.