Avaliação do mecanismo de ação citotóxico de análogos sintéticos de alcaloides da classe dos 3-alquilpiridínicos em linhagens celulares humanas de Leucemia Promielocítica Aguda.

• Autor(a) principal: Tâmara Dauare de Almeida
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/53377
• topic: Leucemia promielocítica aguda; Novos quimioterápicos; Análogos de alcaloides 3-alquilpiridina

A leucemia é uma desordem clonal de células hematológicas que se origina na medula óssea. A Leucemia Promielocítica Aguda (LPA) em especial, sem tratamento, tem sua evolução desfavorável por causar síndrome hemorrágica intensa. O tratamento quimioterápico, portanto, é uma das alternativas para melhorar a sobrevida dos pacientes. Nesse contexto, a busca por novos compostos com potencial ação quimioterápica é justificada e relevante. O presente trabalho avaliou a atividade citotóxica de 16 substâncias semissintéticas análogas de alcaloides 3-alquilpiridina (3-APA). Os perfis citotóxicos foram determinados pelo ensaio in vitro de 3-(4,5-dimetil-2-tiazolil)-2,5-difenil-tetrazólio (MTT) para linhagens de leucemia promielocítica aguda com PML-RARα (NB4), leucemia promielocítica aguda com PML-RARα e resistente ao Ácido transretinóico (NB4-R2), leucemia promielocítica aguda (HL-60) e PBMC (célula mononuclear do sangue periférico). A avaliação da apoptose, assim como análise de parada do ciclo celular, foi realizada por citometria de fluxo; investigação do mecanismo de ação, por análise do ciclo celular; as alterações da expressão gênica de genes da apoptose (TP53, p21, BAK, Bcl-2, AKT) e estresse oxidativo (NOX1, NOX2, NOX4, P47phox) foram realizados por RT-qPCR. A fim de aprimorar a investigação sobre interação das substâncias, uma análise trivial de similaridade química foi realizada pelo ChEMBL para predizer prováveis alvos das substâncias. As substâncias 6 e 7 foram as mais ativas e seletivas para NB4 (IC50 de 38,81μM e 37,40μM respectivamente), as substâncias 1 e 10 mostraram-se mais ativas para o NB4-R2 (IC50 de 42,40μM e 41,05μM) e as substâncias 1,2,3, e 4 foram mais citotóxicas para HL60 (IC50 de 18,02 μM; 9,90 μM; 25,40 μM; e 31,42 μM, respectivamente). Todas essas substâncias induziram a apoptose nas linhagens testadas. No que se refere à investigação do potencial mecanismo de ação dos compostos, observou-se que há um predomínio da diminuição de expressão de genes da antiapoptose (p21, Bcl-2 e AKT) na indução do processo de morte celular. Notou-se uma tentativa de sobrevivência celular por genes de estresse oxidativo por aumento da expressão de NOX2 e p47phox na linhagem NB4. Já o aumento de expressão de NOX1 e NOX4 na linhagem NB4-R2 pode estar relacionada ao dano celular. A busca por similaridades química no banco de dados ChEMBL retornou ROS1 e PARP1 como possíveis alvos para as substâncias estudadas neste trabalho. Os dados deste trabalho indicam os análogos do alcaloide 3-alquilpiridina como classe potencial de compostos com ação citotóxica (in vitro).