Avaliação imunológica na doença do enxerto contra o hospedeiro crônica

• Autor(a) principal: Renata Goncalves de Resende
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-9DUGE8
• topic: Polimorfismo genético; Transplante de células-tronco hematopoiéticas; Citocinas; Doença enxerto-hospedeiro; Genótipo; Polimorfismo genético/genética; Transplante; Fenótipo; Medicina; Transplante de células-tronco hematopoiéticas; Citocinas; Transplante homólogo; Doença enxerto-hospedeiro

A doença do enxerto contra o hospedeiro (DECH) é uma das maiores causas de morbidade e mortalidade após o transplante alogênico de células-tronco hematopoiéticas (alo-TCTH). O conhecimento sobre a etiopatogenia da DECH crônica (DECHc) ainda permanece fragmentado e poucos estudos mostram a contribuição de polimorfismos genéticos em citocinas inflamatórias nos níveis desses mediadores e seu impacto na DECHc. Este estudo teve como objetivo avaliar a expressão genotípica e fenotípica de genes envolvidos com a resposta imunoinflamatória na DECH crônica. O trabalho foi conduzido em duas partes: na primeira parte, foram obtidas amostras de saliva e sangue de pacientes e de seus doadores para análise dos polimorfismos dos genes de IL1B, IL6, IL10, IFNG, TNFA, IL17A e IL17F e para dosagem dessas citocinas por meio da PCR e por ensaio de ELISA, respectivamente. Para a segunda parte do estudo, também foram coletadas amostras de sangue de outros oito pacientes com DECHc bucal, de quatro pacientes submetidos ao alo-TCTH que não desenvolveram DECHc e de 3 indivíduos saudáveis, não transplantados. Estas amostras de sangue foram submetidas à análise imunofenotípica por meio de citometria de fluxo para determinação dos níveis das citocinas (IL-6, IL-10, IL-17A, IFN- e TNF-) e dos marcadores de repertório e de ativação celular (CD4, CD8, CTLA-4, Foxp3 e CD25). Nos resultados da primeira parte do estudo, 42 dos 58 pacientes puderam ser avaliados para a DECHc sistêmica e 27 para a DECHc bucal. Foi identificado que pacientes com a DECHc bucal histológica apresentavam níveis aumentados de IFN- na saliva e de IL-1 no sangue e na saliva. Para DECHc bucal clínica, observou-se níveis mais altos de IL-6 no sangue e níveis mais baixos de IFN- no sangue, além de mais baixos níveis de IL-1 na saliva. Foi também observada associação entre a ocorrência da DECHc sistêmica e o polimorfismos do gene IL17A, de pacientes. O polimorfismo de ILIB foi relacionado à DECHc bucal e o polimorfismo de IFNG esteve associado à ausência da doença bucal. O fenótipo alto produtor do gene TNFA dos doadores mostrou relação com a presença de DECHc bucal. Já os experimentos de imunofenotipagem mostraram um aumento da expressão de TNF- em células T CD4 em pacientes com DECHc bucal, comparado com pacientes transplantados sem a doença e com os indivíduos saudáveis. A expressão de CTLA-4, IL-10, IL-17A, TNF-, em células CD4, e IFN-, em células CD4 e CD8, em diferentes condições de estímulo, foi relacionada aos pacientes com DECHc bucal. Por fim, os pacientes TCTH apresentaram maior expressão de TNF-, em relação aos indivíduos não TCTH. Dessa forma, os achados genotípicos e fenotípicos mostram um perfil pró-inflamatório relacionado à DECHc, tanto bucal quanto sistêmica.