Atividade antagonista de Shigella: pesquisa, extração, purificação e caracterização de uma nova bacteriocina

• Autor(a) principal: Mireille Ângela Bernardes Sousa
• Data de Publicação: 2010
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/36238
• topic: Bacteriocina; Shigella sonnei; Shigella flexneri; Substância antagonista; Diarreia infecciosa aguda; Microbiologia; Bacteriocinas; Shigella sonnei; Shigella flexneri; Disenteria

A produção de bacteriocinas por Shigella sonnei, importante agente etiológico de diarreia inflamatória, ativas contra o organismo, outras bactérias diarreiogênicas e membros da microbiota intestinal foi investigada. Mais da metade das amostras expressaram isoantagonismo e heteroantagonismo contra patotipos diarreiogênicos e Escherichia coli e Shigella flexneri, sugerindo que a habilidade pode contribuir para a virulência da bactéria. A fração intracelular precipitada com 75% de sulfato de amônio mostrou-se resistente a valores extremos de pH e permanece ativa após armazenamento a -80ºC por mais de 2 anos. A sensibilidade a proteases e a termolabilidade reforçam a hipótese de que a substância antagonista é uma bacteriocina. A substância antimicrobiana foi purificada, a massa molecular da proteína foi estimada por espectrometria de massas em 18,56kDa e sua sequência N-terminal não apresentou 100% de identidade com nenhuma proteína com atividade antimicrobiana descrita. É possível que a bacteriocina represente uma nova proteína ou uma proteína já descrita com uma nova atividade. Para avaliação fenotípica e genotípica de bacteriocinogenia, foram estudadas amostras de S. sonnei e S. flexneri, empregando-se, como reveladoras, amostras de E. coli K12 Row sem plasmídio e transformantes que albergavam plasmídios bacteriocinogênicos, especialmente os plasmídios ColE4 e ColE7, e mais de 90% delas, múltiplos determinantes. Os dados demonstram que bacteriocinogenia é uma habilidade comum entre S. sonnei e S. flexneri, reforçando a hipótese de que a característica represente vantagem seletiva para a bactéria.