Caracterização protéica do estresse salino em feijão-caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.]

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: LEITE, Nathália Gabrielle de Araújo
Data de Publicação: 2017
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPE
Texto Completo: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/25333
Resumo: feijão-caupi é amplamente cultivado em regiões áridas e semiáridas, locais onde a salinização dos solos constitui-se em um dos principais estresses à cultura. Dentre os métodos que visam reduzir os danos causados pela salinidade, a utilização de genótipos menos sensíveis se constitui como o melhor método para a solução do problema. Diante do exposto, o presente trabalho objetivou identificar as proteínas diferencialmente abundantes em genótipos de feijão-caupi durante o estresse salino, como ponto de partida para a identificação dos genes associados aos mecanismos de tolerância ao estresse, visando à obtenção de genótipos que associem características desejáveis com a menor sensibilidade à salinidade. Nesse sentido, sementes de cinquenta genótipos de feijão-caupi foram submetidas a tratamentos com diferentes concentrações de NaCl (0, 25, 50, 100 e 200 mM). Foram observadas alterações na taxa de germinação em função do aumento das concentrações de NaCl (sal). Dentre os genótipos avaliados, Maravilha, Paulistinha, Sempre Verde Baiano, e Sempre Verde Salgueiro demonstraram menor sensibilidade ao sal, enquanto BRS Pajeú, Mosqueado 383, Mut 300 gy, Mut 50 gy, e Pele de Moça foram os genótipos mais sensíveis ao sal. Esses genótipos, juntamente com o genótipo Pitiúba, foram novamente submetidos ao estresse salino nas cinco concentrações supracitadas, para realização da contagem de folhas, medição do comprimento caulinar, determinação da matéria seca e conteúdo iônico, assim como mensuração da condutividade elétrica do substrato, capacidade de troca catiônica e saturação de sódio. Os resultados indicam que o incremento na concentração de sal reduziu a quantidade de matéria seca, comprimento do caule e número de folhas em todos os genótipos avaliados, causando aumento no teor de íons, justificado pelos valores de condutividade elétrica do substrato, capacidade de troca catiônica e saturação de sódio. Sempre Verde Salgueiro foi o genótipo que demonstrou menor sensibilidade frente aos demais, enquanto que Mosqueado 383 foi selecionado como o genótipo de maior sensibilidade ao sal. Posteriormente, esses dois genótipos foram estressados com 100 mM de NaCl, para coleta das folhas, extração de proteínas totais, quantificação e identificação das proteínas diferencialmente abundantes, por cromatografia líquida acoplada ao espectrômetro de massas, seguido por comparação com o banco de dados disponível no NCBI (National Center for Biotechnology Information). A partir dessa avaliação, foi possível identificar 251 proteínas diferencialmente abundantes entre os tratamentos (0 mM - controle, e 100 mM de NaCl) e entre os genótipos avaliados. Dessa forma, é possível inferir sobre a participação direta de algumas dessas proteínas em vias metabólicas que possam estar relacionadas com os mecanismos de tolerância ao estresse salino em feijão-caupi.
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Nesse sentido, sementes de cinquenta genótipos de feijão-caupi foram submetidas a tratamentos com diferentes concentrações de NaCl (0, 25, 50, 100 e 200 mM). Foram observadas alterações na taxa de germinação em função do aumento das concentrações de NaCl (sal). Dentre os genótipos avaliados, Maravilha, Paulistinha, Sempre Verde Baiano, e Sempre Verde Salgueiro demonstraram menor sensibilidade ao sal, enquanto BRS Pajeú, Mosqueado 383, Mut 300 gy, Mut 50 gy, e Pele de Moça foram os genótipos mais sensíveis ao sal. Esses genótipos, juntamente com o genótipo Pitiúba, foram novamente submetidos ao estresse salino nas cinco concentrações supracitadas, para realização da contagem de folhas, medição do comprimento caulinar, determinação da matéria seca e conteúdo iônico, assim como mensuração da condutividade elétrica do substrato, capacidade de troca catiônica e saturação de sódio. Os resultados indicam que o incremento na concentração de sal reduziu a quantidade de matéria seca, comprimento do caule e número de folhas em todos os genótipos avaliados, causando aumento no teor de íons, justificado pelos valores de condutividade elétrica do substrato, capacidade de troca catiônica e saturação de sódio. Sempre Verde Salgueiro foi o genótipo que demonstrou menor sensibilidade frente aos demais, enquanto que Mosqueado 383 foi selecionado como o genótipo de maior sensibilidade ao sal. Posteriormente, esses dois genótipos foram estressados com 100 mM de NaCl, para coleta das folhas, extração de proteínas totais, quantificação e identificação das proteínas diferencialmente abundantes, por cromatografia líquida acoplada ao espectrômetro de massas, seguido por comparação com o banco de dados disponível no NCBI (National Center for Biotechnology Information). A partir dessa avaliação, foi possível identificar 251 proteínas diferencialmente abundantes entre os tratamentos (0 mM - controle, e 100 mM de NaCl) e entre os genótipos avaliados. Dessa forma, é possível inferir sobre a participação direta de algumas dessas proteínas em vias metabólicas que possam estar relacionadas com os mecanismos de tolerância ao estresse salino em feijão-caupi.FACEPECowpea is widely cultivated in arid and semi-arid regions, places where salinization of soils is one of the major stresses for this culture. Among the methods utilized to reduce the damage caused by salinity, the use of less sensitive genotypes constitutes the best method to solve the problem. By the way, the present work aimed to identify differentially abundant proteins in cowpea genotypes during saline stress, as a starting point for the identification of genes associated with stress tolerance mechanisms, in order to obtain genotypes associating desirable traits with lowest sensitivity to salinity. In this sense, seeds of fifty cowpea genotypes were submitted to treatments with different concentrations of NaCl (0, 25, 50, 100 and 200 mM). Alterations in germination rates were observed due to the increasing of NaCl (salt) concentrations. Among the evaluated genotypes, Maravilha, Paulistinha, Sempre Verde Baiano, and Sempre Verde Salgueiro showed lower salt sensitivity, while BRS Pajeú, Mosqueado 383, Mut 300 gy, Mut 50 gy, and Pele de Moça were the most salt sensitive genotypes. Those genotypes, including Pitiúba genotype, were submitted again to saline stress using the five NaCl concentrations mentioned above, for leaf counting, measurement of stem length, determination of dry matter and ion content, as well as measurement of electrical conductivity of the substrate, cation exchange capacity and sodium saturation. The results indicate that the increase in salt concentration reduced the amount of dry matter, stem length and number of leaves in all evaluated genotypes, causing an increase in ion content, justified by the values of electrical conductivity of the substrate, cation exchange capacity and sodium saturation. Sempre Verde Salgueiro was the genotype that showed less sensitivity in relation to the others, while Mosqueado 383 was selected as the genotype of greater salt sensitivity. After, these two genotypes were stressed with 100 mM NaCl, to collect leaves, total protein extraction, quantification of proteins, and identification of differentially abundant proteins, by liquid chromatography coupled to the mass spectrometer, followed by comparison with the available database on NCBI (National Center for Biotechnology Information). Through this evaluation, it was possible to identify 251 differentially abundant proteins between the treatments (0 mM - control, and 100 mM NaCl) and among the evaluated genotypes. Thus, it is possible to infer about the direct participation of some of these proteins in metabolic pathways that may be related to the mechanisms of tolerance to saline stress in cowpea.porUniversidade Federal de PernambucoPrograma de Pos Graduacao em Ciencias BiologicasUFPEBrasilAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/info:eu-repo/semantics/openAccessFeijão-caupiProteínasSalCaracterização protéica do estresse salino em feijão-caupi [Vigna unguiculata (L.) 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