Análise do perfil de metilação dos genes MMP2 e MMP14 em linhagens tumorais de mama e em tumores primários de mama utilizando a técnica de MSP
Autor(a) principal: | |
---|---|
Data de Publicação: | 2012 |
Tipo de documento: | Trabalho de conclusão de curso |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFPR |
Texto Completo: | https://hdl.handle.net/1884/31537 |
Resumo: | Orientadora: Giseli Klassen |
id |
UFPR_43fcf18e23d349f013d60ff31c703f36 |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:acervodigital.ufpr.br:1884/31537 |
network_acronym_str |
UFPR |
network_name_str |
Repositório Institucional da UFPR |
repository_id_str |
308 |
spelling |
Pereira, Isabela TiemyCavalieri, Edneia Amancio de Souza Ramos, 1981-Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências BiológicasKlassen, Giseli, 1966-2022-09-19T14:14:25Z2022-09-19T14:14:25Z2012https://hdl.handle.net/1884/31537Orientadora: Giseli KlassenCoorientadora: Edneia Amancio de Souza Ramos CavalieriMonografia (Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências BiológicasResumo : O câncer de mama é o segundo tipo de câncer mais frequente no mundo e a principal causa de morte entre as mulheres. Alterações na regulação da expressão gênica por eventos epigenéticos são mecanismos comuns neste tipo de câncer. MMP14 e MMP2 são enzimas pertencentes ao grupo das metaloproteases, capazes de degradar o colágeno, um dos principais constituintes da matriz extracelular. Sua função é amplamente descrita por atuar no mecanismo de metástases em diversos tipos de câncer. Dados recentes demonstraram que a linhagem tumoral de mama MCF7 possui o gene MMP2 regulado por metilação do DNA. O objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil de metilação do promotor dos genes MMP14 e MMP2 em um painel de linhagens tumorais para posterior aplicação dos resultados em tumores primários de mama utilizando a técnica de MSP (methylation specific PCR). Para isso, amostras de DNA foram isoladas das linhagens tumorais MDA-MB-231, MDAMB-435, MCF7 e HB4a (linhagem controle normal) e tratadas com bissulfito de sódio. A ilha de CpG contendo 383 pares de bases do promotor do gene MMP2 das linhagens foi amplificada por PCR, purificada em gel de agarose 1%, ligada ao vetor pGEMT®easy e eletroporado em estirpe de E. coli DH10B. Oito clones recombinantes para cada linhagem foram selecionados por a-complementação, confirmados por PCR, purificados e submetidos à técnica de sequenciamento utilizando Big Dye Terminator v3.1. Não foi possível a amplificação concomitante das ilhas de CpG do gene MMP14, e novos iniciadores devem ser planejados. Os resultados mostraram que a linhagem normal HB4a, que expressa o gene MMP2, apresentou 18,1% de metilação global enquanto as linhagens tumorais que não expressam MMP2, MCF7 e MDA-MB-231, mostraram 87,7% e 86,2% de metilação global, respectivamente. O perfil de metilação das linhagens tumorais permitiu planejar a localização dos iniciadores para a técnica de MSP capazes de distinguir as amostras metiladas das não metiladas. Entretanto, a reações de PCR utilizando esses iniciadores não ocorreram como esperado. Por isso, em continuidade ao estudo foi realizada a clonagem e o sequenciamento da ilha de CpG do gene MMP2 a partir de amostras de tumores primários de mama sendo que uma das amostras com expressão positiva da proteína MMP2 apresentou-se altamente metilado (92,8%). Portanto, podemos concluir que a metilação do DNA pode não ser o único mecanismo epigenético de regulação do gene MMP2. Os resultados obtidos demonstram que o gene MMP2 não pode ser avaliado por MSP em amostras de tumores devido a sua heterogeneidade no perfil de metilação, não correspondente à expressão do gene. Resultados como esse ainda não foram descritos na literatura e farão parte de novos estudos para compreensão do envolvimento de MMP2 no câncer de mama.1 recurso online : PDF.application/pdfExigências do sistema: Adobe Acrobat ReaderMamas - CâncerEpigenéticaMetilação de DNAAnálise do perfil de metilação dos genes MMP2 e MMP14 em linhagens tumorais de mama e em tumores primários de mama utilizando a técnica de MSPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALMonograrfia Isabela Tiemy Pereira.pdfapplication/pdf1159593https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/31537/1/Monograrfia%20Isabela%20Tiemy%20Pereira.pdf529bed2d3e340b2920d8860d1c6952f2MD51open accessTEXTMonograrfia Isabela Tiemy Pereira.pdf.txtExtracted Texttext/plain83158https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/31537/2/Monograrfia%20Isabela%20Tiemy%20Pereira.pdf.txtd0e012a86f02cfc4b8f0cbb64c82b108MD52open accessTHUMBNAILMonograrfia Isabela Tiemy Pereira.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1179https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/31537/3/Monograrfia%20Isabela%20Tiemy%20Pereira.pdf.jpg59107439e9d057ccd27eaf4b21ccb522MD53open access1884/315372022-09-19 11:14:25.787open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/31537Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082022-09-19T14:14:25Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false |
dc.title.pt_BR.fl_str_mv |
Análise do perfil de metilação dos genes MMP2 e MMP14 em linhagens tumorais de mama e em tumores primários de mama utilizando a técnica de MSP |
title |
Análise do perfil de metilação dos genes MMP2 e MMP14 em linhagens tumorais de mama e em tumores primários de mama utilizando a técnica de MSP |
spellingShingle |
Análise do perfil de metilação dos genes MMP2 e MMP14 em linhagens tumorais de mama e em tumores primários de mama utilizando a técnica de MSP Pereira, Isabela Tiemy Mamas - Câncer Epigenética Metilação de DNA |
title_short |
Análise do perfil de metilação dos genes MMP2 e MMP14 em linhagens tumorais de mama e em tumores primários de mama utilizando a técnica de MSP |
title_full |
Análise do perfil de metilação dos genes MMP2 e MMP14 em linhagens tumorais de mama e em tumores primários de mama utilizando a técnica de MSP |
title_fullStr |
Análise do perfil de metilação dos genes MMP2 e MMP14 em linhagens tumorais de mama e em tumores primários de mama utilizando a técnica de MSP |
title_full_unstemmed |
Análise do perfil de metilação dos genes MMP2 e MMP14 em linhagens tumorais de mama e em tumores primários de mama utilizando a técnica de MSP |
title_sort |
Análise do perfil de metilação dos genes MMP2 e MMP14 em linhagens tumorais de mama e em tumores primários de mama utilizando a técnica de MSP |
author |
Pereira, Isabela Tiemy |
author_facet |
Pereira, Isabela Tiemy |
author_role |
author |
dc.contributor.other.pt_BR.fl_str_mv |
Cavalieri, Edneia Amancio de Souza Ramos, 1981- Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências Biológicas |
dc.contributor.author.fl_str_mv |
Pereira, Isabela Tiemy |
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv |
Klassen, Giseli, 1966- |
contributor_str_mv |
Klassen, Giseli, 1966- |
dc.subject.por.fl_str_mv |
Mamas - Câncer Epigenética Metilação de DNA |
topic |
Mamas - Câncer Epigenética Metilação de DNA |
description |
Orientadora: Giseli Klassen |
publishDate |
2012 |
dc.date.issued.fl_str_mv |
2012 |
dc.date.accessioned.fl_str_mv |
2022-09-19T14:14:25Z |
dc.date.available.fl_str_mv |
2022-09-19T14:14:25Z |
dc.type.status.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/bachelorThesis |
format |
bachelorThesis |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.uri.fl_str_mv |
https://hdl.handle.net/1884/31537 |
url |
https://hdl.handle.net/1884/31537 |
dc.language.iso.fl_str_mv |
por |
language |
por |
dc.relation.requires.pt_BR.fl_str_mv |
Exigências do sistema: Adobe Acrobat Reader |
dc.rights.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.format.none.fl_str_mv |
1 recurso online : PDF. application/pdf |
dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Repositório Institucional da UFPR instname:Universidade Federal do Paraná (UFPR) instacron:UFPR |
instname_str |
Universidade Federal do Paraná (UFPR) |
instacron_str |
UFPR |
institution |
UFPR |
reponame_str |
Repositório Institucional da UFPR |
collection |
Repositório Institucional da UFPR |
bitstream.url.fl_str_mv |
https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/31537/1/Monograrfia%20Isabela%20Tiemy%20Pereira.pdf https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/31537/2/Monograrfia%20Isabela%20Tiemy%20Pereira.pdf.txt https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/31537/3/Monograrfia%20Isabela%20Tiemy%20Pereira.pdf.jpg |
bitstream.checksum.fl_str_mv |
529bed2d3e340b2920d8860d1c6952f2 d0e012a86f02cfc4b8f0cbb64c82b108 59107439e9d057ccd27eaf4b21ccb522 |
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 |
repository.name.fl_str_mv |
Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR) |
repository.mail.fl_str_mv |
|
_version_ |
1797699029950267392 |