Otimização da imunofluorescência direta para diagnóstico de raiva

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Roehe, Paulo Michel
Data de Publicação: 2002
Outros Autores: Schaefer, Rejane, Pereira, Alexandre da Silva
Tipo de documento: Artigo
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/19782
Resumo: O diagnóstico laboratorial da raiva utiliza uma metodologia padronizada, baseada essencialmente no método de imunofluorescência direta, ou “direct fluorescent antibody test” (DFAT). No presente estudo foram reavaliadas algumas variáveis do DFAT, incluindo a duração do tempo de fixação das lâminas com impressões de tecido nervoso, duração das incubações de pré-adsorção do conjugado com as suspensões de tecido nervoso de camundongos infectados (IMB) ou não infectados (NMB) e a duração do período de incubação destas misturas sobre as lâminas com as impressões fixadas. A combinação que proporcionou maior eficácia à DFAT foi obtida com a fixação das lâminas com impressões de tecido nervoso em acetona a -20 oC por 30 minutos, pré-adsorção do conjugado com suspensões de NMB e IMB por 60 minutos a 37oC e subseqüente incubação dessas misturas sobre as impressões por 2 horas a 37oC. Estas alterações permitiram a obtenção de uma fluorescência de intensidade sensivelmente maior que a obtida com a metodologia padrão recomendada, aliada a uma completa inibição da fluorescência sobre os controles.
id UFRGS-2_af2be51e79a67f0e6c250cc6d063eb1d
oai_identifier_str oai:www.lume.ufrgs.br:10183/19782
network_acronym_str UFRGS-2
network_name_str Repositório Institucional da UFRGS
repository_id_str
spelling Roehe, Paulo MichelSchaefer, RejanePereira, Alexandre da Silva2010-04-16T09:11:35Z20021678-0345http://hdl.handle.net/10183/19782000413578O diagnóstico laboratorial da raiva utiliza uma metodologia padronizada, baseada essencialmente no método de imunofluorescência direta, ou “direct fluorescent antibody test” (DFAT). No presente estudo foram reavaliadas algumas variáveis do DFAT, incluindo a duração do tempo de fixação das lâminas com impressões de tecido nervoso, duração das incubações de pré-adsorção do conjugado com as suspensões de tecido nervoso de camundongos infectados (IMB) ou não infectados (NMB) e a duração do período de incubação destas misturas sobre as lâminas com as impressões fixadas. A combinação que proporcionou maior eficácia à DFAT foi obtida com a fixação das lâminas com impressões de tecido nervoso em acetona a -20 oC por 30 minutos, pré-adsorção do conjugado com suspensões de NMB e IMB por 60 minutos a 37oC e subseqüente incubação dessas misturas sobre as impressões por 2 horas a 37oC. Estas alterações permitiram a obtenção de uma fluorescência de intensidade sensivelmente maior que a obtida com a metodologia padrão recomendada, aliada a uma completa inibição da fluorescência sobre os controles.Rabies diagnosis follows a standardized methodology, where the direct fluorescent antibody test (DFAT) plays an essential role. Optimization of DFAT procedures may improve sensitivity and specificity of the test. In the present study, some of the variables of DFAT were reassessed, such as the duration of acetone fixation of brain impressions on slides, incubation of the pre-adsorbing mixtures of conjugate and infected (IMB) and uninfected mouse brain suspensions (NMB), as well as the length of incubation of the pre-adsorbing mixtures on fixed brain impressions. The combination that provided the greatest efficacy at DFAT was attained when slides were fixed for 30 minutes in acetone at -20 oC, the pre-adsorbing conjugate and NMB/ IMB suspensions were incubated for 60 minutes at 37 oC and subsequently layered onto impressions for 2 hours at 37oC. These modifications provided a more intense fluorescent reaction, together with a complete inhibition of fluorescence on the control impressions, when compared to the standard recommended procedure.application/pdfporActa sientiae veterinariae. Porto Alegre, RS. Vol. 30, n. 1 (2002), pub. 527, p. 53-57.VirologiaImunofluorescênciaRaivaDiagnósticoRabiesDiagnosisImmunofluorescenceDFATOtimização da imunofluorescência direta para diagnóstico de raivaOptimization of the direct fluorescent antibody test for rabies diagnosis info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/otherinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFRGSinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)instacron:UFRGSORIGINAL000413578.pdf000413578.pdfTexto completoapplication/pdf513988http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/19782/1/000413578.pdf582a59242b88f43adb02469e14506c56MD51TEXT000413578.pdf.txt000413578.pdf.txtExtracted Texttext/plain16246http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/19782/2/000413578.pdf.txtdb95d4f80fa860fc4c6432174df34221MD52THUMBNAIL000413578.pdf.jpg000413578.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg2022http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/19782/3/000413578.pdf.jpg98f57f10f4953973c756c45301228dddMD5310183/197822022-02-22 04:45:58.403721oai:www.lume.ufrgs.br:10183/19782Repositório de PublicaçõesPUBhttps://lume.ufrgs.br/oai/requestopendoar:2022-02-22T07:45:58Repositório Institucional da UFRGS - Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Otimização da imunofluorescência direta para diagnóstico de raiva
dc.title.alternative.en.fl_str_mv Optimization of the direct fluorescent antibody test for rabies diagnosis
title Otimização da imunofluorescência direta para diagnóstico de raiva
spellingShingle Otimização da imunofluorescência direta para diagnóstico de raiva
Roehe, Paulo Michel
Virologia
Imunofluorescência
Raiva
Diagnóstico
Rabies
Diagnosis
Immunofluorescence
DFAT
title_short Otimização da imunofluorescência direta para diagnóstico de raiva
title_full Otimização da imunofluorescência direta para diagnóstico de raiva
title_fullStr Otimização da imunofluorescência direta para diagnóstico de raiva
title_full_unstemmed Otimização da imunofluorescência direta para diagnóstico de raiva
title_sort Otimização da imunofluorescência direta para diagnóstico de raiva
author Roehe, Paulo Michel
author_facet Roehe, Paulo Michel
Schaefer, Rejane
Pereira, Alexandre da Silva
author_role author
author2 Schaefer, Rejane
Pereira, Alexandre da Silva
author2_role author
author
dc.contributor.author.fl_str_mv Roehe, Paulo Michel
Schaefer, Rejane
Pereira, Alexandre da Silva
dc.subject.por.fl_str_mv Virologia
Imunofluorescência
Raiva
Diagnóstico
topic Virologia
Imunofluorescência
Raiva
Diagnóstico
Rabies
Diagnosis
Immunofluorescence
DFAT
dc.subject.eng.fl_str_mv Rabies
Diagnosis
Immunofluorescence
DFAT
description O diagnóstico laboratorial da raiva utiliza uma metodologia padronizada, baseada essencialmente no método de imunofluorescência direta, ou “direct fluorescent antibody test” (DFAT). No presente estudo foram reavaliadas algumas variáveis do DFAT, incluindo a duração do tempo de fixação das lâminas com impressões de tecido nervoso, duração das incubações de pré-adsorção do conjugado com as suspensões de tecido nervoso de camundongos infectados (IMB) ou não infectados (NMB) e a duração do período de incubação destas misturas sobre as lâminas com as impressões fixadas. A combinação que proporcionou maior eficácia à DFAT foi obtida com a fixação das lâminas com impressões de tecido nervoso em acetona a -20 oC por 30 minutos, pré-adsorção do conjugado com suspensões de NMB e IMB por 60 minutos a 37oC e subseqüente incubação dessas misturas sobre as impressões por 2 horas a 37oC. Estas alterações permitiram a obtenção de uma fluorescência de intensidade sensivelmente maior que a obtida com a metodologia padrão recomendada, aliada a uma completa inibição da fluorescência sobre os controles.
publishDate 2002
dc.date.issued.fl_str_mv 2002
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2010-04-16T09:11:35Z
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/article
info:eu-repo/semantics/other
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
format article
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/10183/19782
dc.identifier.issn.pt_BR.fl_str_mv 1678-0345
dc.identifier.nrb.pt_BR.fl_str_mv 000413578
identifier_str_mv 1678-0345
000413578
url http://hdl.handle.net/10183/19782
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.ispartof.pt_BR.fl_str_mv Acta sientiae veterinariae. Porto Alegre, RS. Vol. 30, n. 1 (2002), pub. 527, p. 53-57.
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFRGS
instname:Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)
instacron:UFRGS
instname_str Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)
instacron_str UFRGS
institution UFRGS
reponame_str Repositório Institucional da UFRGS
collection Repositório Institucional da UFRGS
bitstream.url.fl_str_mv http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/19782/1/000413578.pdf
http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/19782/2/000413578.pdf.txt
http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/19782/3/000413578.pdf.jpg
bitstream.checksum.fl_str_mv 582a59242b88f43adb02469e14506c56
db95d4f80fa860fc4c6432174df34221
98f57f10f4953973c756c45301228ddd
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFRGS - Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1792790146918121472

Registros relacionados