Validation and development of an immunonephelometric assay for the determination of alpha-1 antitrypsin levels in dried blood spots from patients with COPD

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Zillmer, Laura Russo
Data de Publicação: 2013
Outros Autores: Russo, Rodrigo, Manzano, Beatriz Martins, Ivanaga, Ivan, Nascimento, Oliver Augusto [UNIFESP], Souza, Altay Alves Lino de [UNIFESP], Santos Junior, Gildo, Rodriguez, Francisco, Miravitlles, Marc, Jardim, José Roberto [UNIFESP]
Tipo de documento: Artigo
Idioma: eng
Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
Texto Completo: http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/7972
http://dx.doi.org/10.1590/S1806-37132013000500004
Resumo: OBJETIVO: Validar e desenvolver um método de dosagem de alfa-1 antitripsina (AAT) por imunonefelometria em amostras de sangue em papel-filtro em pacientes com DPOC no Brasil.MÉTODOS:Amostras de soro e de sangue em papel-filtro de 192 pacientes com DPOC foram utilizadas para a dosagem de AAT. Para a preparação das amostras de sangue em papel-filtro, um disco do papel com diâmetro de 6 mm foi colocado em um tubo e eluído com 200 µL de PBS, permanecendo por toda a noite a 4ºC. Todas as amostras foram analisadas em duplicata por imunonefelometria. O método de reamostragem bootstrap foi utilizado para a determinação de um ponto de corte para o nível de AAT nas amostras de sangue em papel-filtro.RESULTADOS:O coeficiente de correlação entre os níveis de AAT em soro e em sangue em papel-filtro foi de r = 0,45. Para as amostras em papel-filtro, o ponto de corte foi de 2,02 mg/dL (IC97%: 1,45-2,64 mg/dL), com sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e valor preditivo negativo de 100%, 95,7%, 27,2% e 100%, respectivamente.CONCLUSÕES:Este método de determinação dos níveis de AAT em sangue em papel-filtro se mostrou uma ferramenta confiável para o rastreamento de pacientes com deficiência de AAT.
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Sociedade Brasileira de Pneumologia e Tisiologia, v. 39, n. 5, p. 547-554, 2013.1806-3713http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/7972http://dx.doi.org/10.1590/S1806-37132013000500004S1806-37132013000500547-en.pdfS1806-37132013000500547-pt.pdfS1806-3713201300050054710.1590/S1806-37132013000500004WOS:000328875600004OBJETIVO: Validar e desenvolver um método de dosagem de alfa-1 antitripsina (AAT) por imunonefelometria em amostras de sangue em papel-filtro em pacientes com DPOC no Brasil.MÉTODOS:Amostras de soro e de sangue em papel-filtro de 192 pacientes com DPOC foram utilizadas para a dosagem de AAT. Para a preparação das amostras de sangue em papel-filtro, um disco do papel com diâmetro de 6 mm foi colocado em um tubo e eluído com 200 µL de PBS, permanecendo por toda a noite a 4ºC. Todas as amostras foram analisadas em duplicata por imunonefelometria. O método de reamostragem bootstrap foi utilizado para a determinação de um ponto de corte para o nível de AAT nas amostras de sangue em papel-filtro.RESULTADOS:O coeficiente de correlação entre os níveis de AAT em soro e em sangue em papel-filtro foi de r = 0,45. Para as amostras em papel-filtro, o ponto de corte foi de 2,02 mg/dL (IC97%: 1,45-2,64 mg/dL), com sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e valor preditivo negativo de 100%, 95,7%, 27,2% e 100%, respectivamente.CONCLUSÕES:Este método de determinação dos níveis de AAT em sangue em papel-filtro se mostrou uma ferramenta confiável para o rastreamento de pacientes com deficiência de AAT.OBJECTIVE:To validate and develop an immunonephelometric assay for the determination of alpha-1 antitrypsin (AAT) levels in dried blood spots from COPD patients in Brazil.METHODS:We determined AAT levels in serum samples and dried blood spots from 192 COPD patients. For the preparation of dried blood spots, a disk (diameter, 6 mm) was placed into a tube, eluted with 200 µL of PBS, and stored overnight at 4ºC. All of the samples were analyzed by immunonephelometry in duplicate. We used the bootstrap resampling method in order to determine a cut-off point for AAT levels in dried blood spots.RESULTS:The correlation coefficient between the AAT levels in serum samples and those in dried blood spots was r = 0.45. For dried blood spots, the cut-off value was 2.02 mg/dL (97% CI: 1.45-2.64 mg/dL), with a sensitivity, specificity, positive predictive value, and negative predictive value of 100%, 95.7%, 27.2%, and 100%, respectively.CONCLUSIONS:This method for the determination of AAT levels in dried blood spots appears to be a reliable screening tool for patients with AAT deficiency.Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Department of Pulmonology Pulmonary Rehabilitation CenterUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Escola Paulista de Medicina Department of PulmonologyUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Escola Paulista de Medicina Department of PsychobiologyAfip Laboratory Department of Molecular BiologyVall d'Hebron University Hospital Departments of Biochemistry and PulmonologyUNIFESP, Department of Pulmonology Pulmonary Rehabilitation CenterUNIFESP, EPM, Department of PulmonologyUNIFESP, EPM, Department of PsychobiologySciELO547-554engSociedade Brasileira de Pneumologia e TisiologiaJornal Brasileiro de PneumologiaDeficiencia de alfa 1-antitripsinaNefelometria e turbidimetriaDoenca pulmonar obstrutiva cronicaalpha 1-antitrypsin deficiencyNephelometry and turbidimetryPulmonary disease, chronic obstructiveValidation and development of an immunonephelometric assay for the determination of alpha-1 antitrypsin levels in dried blood spots from patients with COPDDesenvolvimento e validação de um método de imunonefelometria em amostras de sangue em papel-filtro para a dosagem da alfa-1 antitripsina em pacientes com DPOCinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESPORIGINALS1806-37132013000500547-en.pdfapplication/pdf427528${dspace.ui.url}/bitstream/11600/7972/1/S1806-37132013000500547-en.pdf479dbbd025d127f16cf52a607b020ca7MD51open accessS1806-37132013000500547-pt.pdfS1806-37132013000500547-pt.pdfapplication/pdf427297${dspace.ui.url}/bitstream/11600/7972/3/S1806-37132013000500547-pt.pdf9d356dd2fc78d02acf8e56fa046275c0MD53open accessTEXTS1806-37132013000500547.pdf.txtS1806-37132013000500547.pdf.txtExtracted texttext/plain36844${dspace.ui.url}/bitstream/11600/7972/2/S1806-37132013000500547.pdf.txt6cffd530c7618cf37c5a3d04147d431bMD52open access11600/79722021-10-05 21:24:31.016open accessoai:repositorio.unifesp.br:11600/7972Repositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.unifesp.br/oai/requestopendoar:34652023-05-25T12:25:47.132873Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)false
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