Diagnóstico molecular da leishmaniose tegumentar americana em pacientes atendidos no Centro de Referência em hanseníase e dermatologia sanitária da Universidade federal de Uberlândia, CREDESH-UFU.

• Autor(a) principal: Silva, Fernanda Cristina Assis
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFU
• Texto Completo: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/28559; https://dx.doi.org/10.14393/ufu.di.2019.1332
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS; Leishmaniose; Diagnóstico Molecular

A leishmaniose representa um complexo de doenças parasitárias com altas taxas de morbimortalidade que estão extremamente associadas à pobreza. O diagnóstico definitivo de LTA é baseado em dados clínicos e epidemiológicos associados ao diagnóstico laboratorial. O PCR provou ser uma ferramenta valiosa no diagnóstico da leishmaniose, porque é mais rápido e mais sensível do que os métodos convencionais e pode identificar as espécies em diferentes amostras clínicas. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da PCR para o diagnóstico da LTA, identificar as espécies Leishmania em amostras de pacientes atendidos pelo Centro de Referência Nacional em Hanseníase e Dermatologia Sanitária da Universidade Federal de Uberlândia. Um total de 37 amostras de pele coletadas de pacientes com lesões cutâneas sugestivas de LTA foram submetidas ao diagnóstico de IHC e PCR e posterior análise de PCR-RFLP de amostras positivas. Foram utilizadas dez amostras positivas para Hanseníase e negativas para Leishmania (teste de pele de Montenegro e resultados negativos de IHC) para testar a ausência de anelamento dos iniciadores com Mycobacterium leprae. Por consenso, um resultado foi considerado positivo quando pelo menos três das cinco técnicas de diagnóstico testadas foram positivas, resultando em 30 (73%) amostras consideradas positivas e 11 como negativas (27%). A IHC mostrou menor sensibilidade e NPV quando comparado com os outros três testes de PCR, mas apresentou alta especificidade e PPV. Os valores de sensibilidade, especificidade, PPV e VPL para os iniciadores 13A / 13B e L150 / 152 foram de 80% e 100% e 90% e 100%, 100 e 100%, 50% e 66,6%, respectivamente. Os primers HSP70 e LITS1 / L5.8S apresentam resultados semelhantes atingindo 100% de sensibilidade, especificidade, VPL e PPV. Os quatro ensaios de PCR apresentaram melhores resultados para o diagnóstico de ATL quando comparados ao IHC e outros métodos rotineiramente utilizados. A identificação de espécies através de PCR-RFLP foi capaz de identificar as quatro espécies propostas neste estudo L.braziliensis, L. amazonensis, L.guyanensis e L.infantum. Em conclusão, os ensaios PCR-RFLP de ITS1 e HSP70 foram capazes de diagnosticar e identificar o agente causador de LTA com alta sensibilidade e especificidade, no entanto, o HSP70 PCR-RFLP mostrou maior aplicabilidade na rotina diagnóstica de LTA no Brasil devido à sua alta sensibilidade, especificidade e características operacionais.