Efeito da adição da cantaxantina na produção de embriões bovinos in vitro
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Data de Publicação: | 2018 |
Tipo de documento: | Dissertação |
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Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPE |
Texto Completo: | http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/8437 |
Resumo: | In this work three different concentrations of a natural nonenzymatic antioxidant (Canthaxanthin) were added to in vitro maturation medium, the work consisted of two experiments, in the first experiment groups of oocyte-cumulus complex were matured, without Canthaxanthin, (Control Group C, 155 oocytes), with 1 μM (T1 Group, 153 oocytes), with 0.5 μM (T2 Group, 153 oocytes), and with 0.25 μM (T1 Group, 153 oocytes), 24h after in vitro maturation, the oocytes of each group were denuded, fixed, then stained with Lacmoid 1% to visualize the oocytes´ nuclei, the oocytes that showed the metaphase II spindle and/or the first polar body were classified as maturated oocytes, the nuclear maturation rate did not show significant difference between the experimental groups (P>0.05), the percentage of the oocytes that reached the MII was C, T1, T2, and T3, 74.8%, 74.17%, 78%, and 77.9%, respectively, the concentration of 0.5 μM (T2) showed the highest nuclear maturation rate among the experimental groups, so it was utilized in the second experiment. In the second experiment two groups were utilized (C, and T2 118, and 113, respectively), to verify the effect of Canthaxanthin on the in vitro embryonic development, neither the cleavage rates (C:72.9%, and T2: 76%), nor the total blastocyst rates (C:44.9%, and T2: 39.8%) showed significant difference (P>0.05), after the classification of embryonic development stages (168 hpi), the early blastocyst rate (C:2.54 %, and T2: 8.84%), and the blastocyst rate (C:11 %, and T2: 3.53%) showed a significant differences (P<0.05), but the other stages did not show significant differences (P<0.05), (C, and T2, expanded blastocyst, and hatched blastocyst, 17.8%, 13.6%, and 19.5%, 8% respectively); the results of our work showed that the Canthaxanthin did not affect the nuclear maturation of the in vitro matured oocytes, or the in vitro embryo production. |
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BARTOLOMEU, Cláudio CoutinhoSANTOS FILHO, Antônio Santana dosBATISTA, André MarianoSANTOS FILHO, Antônio Santana doshttp://lattes.cnpq.br/4211277316422389SHEBLI, Wasim Al2019-12-20T12:24:28Z2018-02-02SHEBLI, Wasim Al. Efeito da adição da cantaxantina na produção de embriões bovinos in vitro. 2018. 39 f. Dissertação (Programa de Pós-Graduação em Sanidade e Reprodução de Ruminantes) - Universidade Federal Rural de Pernambuco, Garanhuns.http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/8437In this work three different concentrations of a natural nonenzymatic antioxidant (Canthaxanthin) were added to in vitro maturation medium, the work consisted of two experiments, in the first experiment groups of oocyte-cumulus complex were matured, without Canthaxanthin, (Control Group C, 155 oocytes), with 1 μM (T1 Group, 153 oocytes), with 0.5 μM (T2 Group, 153 oocytes), and with 0.25 μM (T1 Group, 153 oocytes), 24h after in vitro maturation, the oocytes of each group were denuded, fixed, then stained with Lacmoid 1% to visualize the oocytes´ nuclei, the oocytes that showed the metaphase II spindle and/or the first polar body were classified as maturated oocytes, the nuclear maturation rate did not show significant difference between the experimental groups (P>0.05), the percentage of the oocytes that reached the MII was C, T1, T2, and T3, 74.8%, 74.17%, 78%, and 77.9%, respectively, the concentration of 0.5 μM (T2) showed the highest nuclear maturation rate among the experimental groups, so it was utilized in the second experiment. In the second experiment two groups were utilized (C, and T2 118, and 113, respectively), to verify the effect of Canthaxanthin on the in vitro embryonic development, neither the cleavage rates (C:72.9%, and T2: 76%), nor the total blastocyst rates (C:44.9%, and T2: 39.8%) showed significant difference (P>0.05), after the classification of embryonic development stages (168 hpi), the early blastocyst rate (C:2.54 %, and T2: 8.84%), and the blastocyst rate (C:11 %, and T2: 3.53%) showed a significant differences (P<0.05), but the other stages did not show significant differences (P<0.05), (C, and T2, expanded blastocyst, and hatched blastocyst, 17.8%, 13.6%, and 19.5%, 8% respectively); the results of our work showed that the Canthaxanthin did not affect the nuclear maturation of the in vitro matured oocytes, or the in vitro embryo production.Neste trabalho três concentrações diferentes de um antioxidante natural não enzimático (Cantaxantina) foram adicionadas ao meio de maturação in vitro, dois experimentos foram realizados, no primeiro experimento grupos de complexo cumulus-oócitos foram maturados de acordo com os seguintes tratamentos: Controle(C) sem adição de Cantaxantina (155 oócitos), Tratamento (T1), com adição de 1 μM de Cantaxantina ( 153 oócitos), Tratamento 2 (T2) com 0.5 μM de Cantaxantina (153 oócitos) e Tratamento 3 (T3) com 0.25 μM de Cantaxantina (153 oócitos), 24h após a maturação , os oócitos foram desnudados, fixados em solução contendo 3 partes de Etanol absoluto e uma parte de Ácido Glacial Acético por 48 horas em temperatura ambiente. Após a fixação, os oócitos foram colocados em uma solução de Etanol absoluto por 10 minutos e logo após foram corados com Lacmoid a 1% para visualizar os estágios de desenvolvimento nuclear. Os oócitos que mostraram o fuso de metáfase II e/ou o primeiro corpúsculo foram classificados como oócitos maturados. A taxa de maturação nuclear não mostrou diferença significativa entre os tratamentos (P>0.05), a porcentagem dos oócitos que atingiram à MII foi C, T1, T2, e T3, 74.8%, 74.17%, 78%, e 77.9% respectivamente. Apesar de não ter sido observado diferença estatística entre os tratamentos, o Tratamento T2 apresentou maior taxa de oócitos com maturação nuclear, por esse motivo foi utilizada na segunda etapa do experimento para comparação com o grupo controle. No segundo experimento foram utilizados 118 e 113 oócitos nos grupos Controles e Tratamento, respectivamente, com o objetivo de avaliar o efeito da Cantaxantina no desenvolvimento embrionário in vitro. Os dados foram analisados utilizando o procedimento logistc e software (2002). Não houver diferença estatística (P>0.05), entre taxas de clivagem 48 horas após a fertilização in vitro (C:72.9%, e T2: 76%), da mesma forma a taxa de blastocistos (C:44.9%, e T2: 39.8%), não apresentou diferença significativa (P>0.05). No que concerne os estágio de desenvolvimento embrionário 168 horas após a fertilização in vitro, as taxas de blastocisto inicial (C:2.54 %, e T2: 8.84%), e blastocisto (C:11 %, e T2: 3.53%) mostraram diferença estatística (P<0.05), entretanto não foi observada diferença significativa (P>0.05), entre C, e T2, em relação a Blastocisto expandido(17,79% e 1355%) Blastocisto eclodido (19,46% e 7.97%); os resultados deste trabalho demonstraram que a utilização da Cantaxantina no meio de maturação não incrementar a produção de embriões produzidos in vitro.Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2019-12-20T12:24:28Z No. of bitstreams: 1 Wasim Al Shebli.pdf: 579167 bytes, checksum: 144b2a42373943b1b1638356868000ef (MD5)Made available in DSpace on 2019-12-20T12:24:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Wasim Al Shebli.pdf: 579167 bytes, checksum: 144b2a42373943b1b1638356868000ef (MD5) Previous issue date: 2018-02-02Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESapplication/pdfporUniversidade Federal Rural de PernambucoPrograma de Pós-Graduação em Sanidade e Reprodução de RuminantesUFRPEBrasilUnidade Acadêmica de GaranhunsReprodução animalFertilização in vitroCantaxantinaBovinoMEDICINA VETERINARIA::REPRODUCAO ANIMALEfeito da adição da cantaxantina na produção de embriões bovinos in vitroinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis4491839560916886239600600600600772051418241127941110983457506962624122075167498588264571info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPEinstname:Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE)instacron:UFRPEORIGINALWasim Al Shebli.pdfWasim Al Shebli.pdfapplication/pdf579167http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/bitstream/tede2/8437/2/Wasim+Al+Shebli.pdf144b2a42373943b1b1638356868000efMD52LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82165http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/bitstream/tede2/8437/1/license.txtbd3efa91386c1718a7f26a329fdcb468MD51tede2/84372019-12-26 10:47:38.868oai:tede2: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Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede/PUBhttp://www.tede2.ufrpe.br:8080/oai/requestbdtd@ufrpe.br ||bdtd@ufrpe.bropendoar:2019-12-26T13:47:38Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPE - Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE)false |
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