Melatonina no meio de maturação não melhorou as taxas de maturação dos ovócitos, de desenvolvimento embrionário e a fragmentação do DNA dos embriões bovinos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Takada, Luciana
Data de Publicação: 2010
Outros Autores: Martins Junior, Alicio, Mingoti, Gisele Zoccal, Balieiro, Julio César Carvalho, Coelho, Lia Alencar
Tipo de documento: Artigo
Idioma: eng
Título da fonte: Scientia Agrícola (Online)
Texto Completo: https://www.revistas.usp.br/sa/article/view/22578
Resumo: Melatonin (MEL) acts as a powerful scavenger of free radicals and direct gonadal responses to melatonin have been reported in the literature. Few studies, however, have evaluated the effect of MEL during in vitro maturation (IVM) on bovine embryos. This study tested the addition of MEL to maturation medium (MM) with no gonadotropins on nuclear maturation and embryo development rates and the incidence of DNA damage in resulting embryos. Cumulus-oocyte complexes were aspirated from abattoir ovaries and cultured in MM (TCM-199 medium supplemented with 10% fetal calf serum - FCS) at 39ºC and 5% CO2 in air. After 24 hours of culture in MM with 0.5 µg mL-1 FSH and 5.0 µg mL-1 LH; 10-9 M MEL) or 10-9 M MEL, 0.5 µg mL-1 FSH and 5.0 µg mL-1 LH, the oocytes were stained with Hoechst 33342 to evaluate nuclear maturation rate. After in vitro fertilization and embryo culture, development rates were evaluated and the blastocysts were assessed for DNA damage by Comet assay. There was no effect of melatonin added to the MM, alone or in combination with gonadotropins, on nuclear maturation, cleavage and blastocyst rates. These rates ranged between 88% to 90%, 85% to 88% and 42% to 46%, respectively. The extent of DNA damage in embryos was also not affected by MEL supplementation during IVM. The addition of 10-9 M MEL to the MM failed to improve nuclear maturation and embryo development rates and the incidence of DNA damage in resulting embryos, but was able to properly substitute for gonadotropins during IVM.
id USP-18_c035987d21ffc0f86ab35ab61a0e0164
oai_identifier_str oai:revistas.usp.br:article/22578
network_acronym_str USP-18
network_name_str Scientia Agrícola (Online)
repository_id_str
spelling Melatonina no meio de maturação não melhorou as taxas de maturação dos ovócitos, de desenvolvimento embrionário e a fragmentação do DNA dos embriões bovinos Melatonin in maturation media fails to improve oocyte maturation, embryo development rates and DNA damage of bovine embryos comet assayembryosgonadotropinsin vitro fertilizationmelatoninensaio cometaembriõesgonadotrofinasfertilização in vitromelatonina Melatonin (MEL) acts as a powerful scavenger of free radicals and direct gonadal responses to melatonin have been reported in the literature. Few studies, however, have evaluated the effect of MEL during in vitro maturation (IVM) on bovine embryos. This study tested the addition of MEL to maturation medium (MM) with no gonadotropins on nuclear maturation and embryo development rates and the incidence of DNA damage in resulting embryos. Cumulus-oocyte complexes were aspirated from abattoir ovaries and cultured in MM (TCM-199 medium supplemented with 10% fetal calf serum - FCS) at 39ºC and 5% CO2 in air. After 24 hours of culture in MM with 0.5 µg mL-1 FSH and 5.0 µg mL-1 LH; 10-9 M MEL) or 10-9 M MEL, 0.5 µg mL-1 FSH and 5.0 µg mL-1 LH, the oocytes were stained with Hoechst 33342 to evaluate nuclear maturation rate. After in vitro fertilization and embryo culture, development rates were evaluated and the blastocysts were assessed for DNA damage by Comet assay. There was no effect of melatonin added to the MM, alone or in combination with gonadotropins, on nuclear maturation, cleavage and blastocyst rates. These rates ranged between 88% to 90%, 85% to 88% and 42% to 46%, respectively. The extent of DNA damage in embryos was also not affected by MEL supplementation during IVM. The addition of 10-9 M MEL to the MM failed to improve nuclear maturation and embryo development rates and the incidence of DNA damage in resulting embryos, but was able to properly substitute for gonadotropins during IVM. Melatonin (MEL) atua como um potente redutor de radicais livres. Efeito direto da MEL na função gonadal também foi observado. Existem poucos estudos relacionados ao efeito da MEL durante a maturação no desenvolvimento embrionário in vitro. Avaliou-se a adição de MEL no meio de maturação (sem gonadotrofinas) nas taxas de maturação nuclear e de desenvolvimento embrionário e na incidência de fragmentação do DNA nos embriões produzidos in vitro. Complexos cumulus-ovócitos foram aspirados de ovários provenientes de matadouros e cultivados em meio de maturação (Meio TCM-199 suplementado com 10% de soro fetal bovino) a 39ºC e 5% CO2 em ar. Após 24 horas de cultivo em meio de maturação com 0,5 µg mL-1 de FSH e 5,0 µg mL-1 de LH; 10-9 M de MEL ou 10-9 M de MEL, 0,5 µg mL-1 de FSH e 5,0 µg mL-1 de LH, os ovócitos foram corados com Hoechst 33342 para avaliação da taxa de maturação nuclear. A fragmentação do DNA dos blastocistos foi avaliada pela técnica do Cometa. Não houve efeito da MEL adicionada ao meio de maturação, com ou sem gonadotrofinas, nas taxas de maturação nuclear, clivagem e blastocistos. Os percentuais variaram entre 88% a 90%, 85% a 88% e 42% a 46%, respectivamente. O grau de fragmentação do DNA também não foi afetado pela adição de MEL ao meio de maturação. A adição de 10-9 M de MEL ao meio de maturação não exerce influência nas taxas de maturação nuclear e de desenvolvimento embrionário e nem da incidência de fragmentação do DNA dos embriões produzidos in vitro, mas pode substituir as gonadotropinas durante a maturação in vitro. Universidade de São Paulo. Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz2010-08-01info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionapplication/pdfhttps://www.revistas.usp.br/sa/article/view/2257810.1590/S0103-90162010000400003Scientia Agricola; v. 67 n. 4 (2010); 393-398Scientia Agricola; Vol. 67 No. 4 (2010); 393-398Scientia Agricola; Vol. 67 Núm. 4 (2010); 393-3981678-992X0103-9016reponame:Scientia Agrícola (Online)instname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPenghttps://www.revistas.usp.br/sa/article/view/22578/24602Copyright (c) 2015 Scientia Agricolainfo:eu-repo/semantics/openAccessTakada, LucianaMartins Junior, AlicioMingoti, Gisele ZoccalBalieiro, Julio César CarvalhoCoelho, Lia Alencar2015-07-07T18:52:47Zoai:revistas.usp.br:article/22578Revistahttp://revistas.usp.br/sa/indexPUBhttps://old.scielo.br/oai/scielo-oai.phpscientia@usp.br||alleoni@usp.br1678-992X0103-9016opendoar:2015-07-07T18:52:47Scientia Agrícola (Online) - Universidade de São Paulo (USP)false
dc.title.none.fl_str_mv Melatonina no meio de maturação não melhorou as taxas de maturação dos ovócitos, de desenvolvimento embrionário e a fragmentação do DNA dos embriões bovinos
Melatonin in maturation media fails to improve oocyte maturation, embryo development rates and DNA damage of bovine embryos
title Melatonina no meio de maturação não melhorou as taxas de maturação dos ovócitos, de desenvolvimento embrionário e a fragmentação do DNA dos embriões bovinos
spellingShingle Melatonina no meio de maturação não melhorou as taxas de maturação dos ovócitos, de desenvolvimento embrionário e a fragmentação do DNA dos embriões bovinos
Takada, Luciana
comet assay
embryos
gonadotropins
in vitro fertilization
melatonin
ensaio cometa
embriões
gonadotrofinas
fertilização in vitro
melatonina
title_short Melatonina no meio de maturação não melhorou as taxas de maturação dos ovócitos, de desenvolvimento embrionário e a fragmentação do DNA dos embriões bovinos
title_full Melatonina no meio de maturação não melhorou as taxas de maturação dos ovócitos, de desenvolvimento embrionário e a fragmentação do DNA dos embriões bovinos
title_fullStr Melatonina no meio de maturação não melhorou as taxas de maturação dos ovócitos, de desenvolvimento embrionário e a fragmentação do DNA dos embriões bovinos
title_full_unstemmed Melatonina no meio de maturação não melhorou as taxas de maturação dos ovócitos, de desenvolvimento embrionário e a fragmentação do DNA dos embriões bovinos
title_sort Melatonina no meio de maturação não melhorou as taxas de maturação dos ovócitos, de desenvolvimento embrionário e a fragmentação do DNA dos embriões bovinos
author Takada, Luciana
author_facet Takada, Luciana
Martins Junior, Alicio
Mingoti, Gisele Zoccal
Balieiro, Julio César Carvalho
Coelho, Lia Alencar
author_role author
author2 Martins Junior, Alicio
Mingoti, Gisele Zoccal
Balieiro, Julio César Carvalho
Coelho, Lia Alencar
author2_role author
author
author
author
dc.contributor.author.fl_str_mv Takada, Luciana
Martins Junior, Alicio
Mingoti, Gisele Zoccal
Balieiro, Julio César Carvalho
Coelho, Lia Alencar
dc.subject.por.fl_str_mv comet assay
embryos
gonadotropins
in vitro fertilization
melatonin
ensaio cometa
embriões
gonadotrofinas
fertilização in vitro
melatonina
topic comet assay
embryos
gonadotropins
in vitro fertilization
melatonin
ensaio cometa
embriões
gonadotrofinas
fertilização in vitro
melatonina
description Melatonin (MEL) acts as a powerful scavenger of free radicals and direct gonadal responses to melatonin have been reported in the literature. Few studies, however, have evaluated the effect of MEL during in vitro maturation (IVM) on bovine embryos. This study tested the addition of MEL to maturation medium (MM) with no gonadotropins on nuclear maturation and embryo development rates and the incidence of DNA damage in resulting embryos. Cumulus-oocyte complexes were aspirated from abattoir ovaries and cultured in MM (TCM-199 medium supplemented with 10% fetal calf serum - FCS) at 39ºC and 5% CO2 in air. After 24 hours of culture in MM with 0.5 µg mL-1 FSH and 5.0 µg mL-1 LH; 10-9 M MEL) or 10-9 M MEL, 0.5 µg mL-1 FSH and 5.0 µg mL-1 LH, the oocytes were stained with Hoechst 33342 to evaluate nuclear maturation rate. After in vitro fertilization and embryo culture, development rates were evaluated and the blastocysts were assessed for DNA damage by Comet assay. There was no effect of melatonin added to the MM, alone or in combination with gonadotropins, on nuclear maturation, cleavage and blastocyst rates. These rates ranged between 88% to 90%, 85% to 88% and 42% to 46%, respectively. The extent of DNA damage in embryos was also not affected by MEL supplementation during IVM. The addition of 10-9 M MEL to the MM failed to improve nuclear maturation and embryo development rates and the incidence of DNA damage in resulting embryos, but was able to properly substitute for gonadotropins during IVM.
publishDate 2010
dc.date.none.fl_str_mv 2010-08-01
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/article
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
format article
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://www.revistas.usp.br/sa/article/view/22578
10.1590/S0103-90162010000400003
url https://www.revistas.usp.br/sa/article/view/22578
identifier_str_mv 10.1590/S0103-90162010000400003
dc.language.iso.fl_str_mv eng
language eng
dc.relation.none.fl_str_mv https://www.revistas.usp.br/sa/article/view/22578/24602
dc.rights.driver.fl_str_mv Copyright (c) 2015 Scientia Agricola
info:eu-repo/semantics/openAccess
rights_invalid_str_mv Copyright (c) 2015 Scientia Agricola
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade de São Paulo. Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz
publisher.none.fl_str_mv Universidade de São Paulo. Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz
dc.source.none.fl_str_mv Scientia Agricola; v. 67 n. 4 (2010); 393-398
Scientia Agricola; Vol. 67 No. 4 (2010); 393-398
Scientia Agricola; Vol. 67 Núm. 4 (2010); 393-398
1678-992X
0103-9016
reponame:Scientia Agrícola (Online)
instname:Universidade de São Paulo (USP)
instacron:USP
instname_str Universidade de São Paulo (USP)
instacron_str USP
institution USP
reponame_str Scientia Agrícola (Online)
collection Scientia Agrícola (Online)
repository.name.fl_str_mv Scientia Agrícola (Online) - Universidade de São Paulo (USP)
repository.mail.fl_str_mv scientia@usp.br||alleoni@usp.br
_version_ 1787713258068639744