Avaliação da eficácia da proteína miriostelada-3 (smp-3) de leishmania amazonensis como candidata à vacina contra a leishmaniose visceral

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Marcelo Perdigão de Oliveira
Data de Publicação: 2018
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/47248
Resumo: Em uma recente abordagem proteômica realizada em Leishmania amazonensis, a diminuição da infectividade dos parasitos foi relacionada com proteínas que mostraram um aumento ou diminuição no seu conteúdo de expressão durante o cultivo in vitro por longos períodos de tempo, sendo as mesmas relacionadas à sobrevivência ou infectividade dos mesmos, respectivamente. No presente estudo, uma abordagem computacional por meio de bioinformática foi realizada com tais proteínas para identificação de possíveis fatores de virulência do parasito entre tais moléculas. Três proteínas foram selecionadas, uma das quais não apresentou homologia estrutural com a sequência de proteínas humanas. Este candidato, denominado de proteína miriostelada-3 (SMP-3), foi clonado e sua versão recombinante (rSMP-3) foi utilizada para estimular células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de indivíduos saudáveis que vivem em área endêmica de leishmaniose e de pacientes com leishmaniose visceral (LV). Os resultados mostraram elevada produção de interferon-γ (IFNγ) e baixos níveis de interleucina 10 (IL-10) nos sobrenadantes das culturas estimuladas. Ensaios in vivo foram conduzidos em camundongos BALB/c, que foram imunizados com rSMP-3/saponina e, posteriormente, desafiados com promastigotas de Leishmania infantum. Nos resultados, a combinação rSMP-3/saponina induziu uma produção elevada de IFN-γ, IL12 e GM-CSF pelas células do baço dos camundongos imunizados. O perfil de resposta imune foi associado à redução significativa da carga parasitária em diferentes órgãos dos animais imunizados. Em conclusão, os resultados mostram que a proteína SMP-3 pode ser considerada imunogênica em camundongos e humanos e eficaz na indução de proteção contra a LV murina.
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Este candidato, denominado de proteína miriostelada-3 (SMP-3), foi clonado e sua versão recombinante (rSMP-3) foi utilizada para estimular células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de indivíduos saudáveis que vivem em área endêmica de leishmaniose e de pacientes com leishmaniose visceral (LV). Os resultados mostraram elevada produção de interferon-γ (IFNγ) e baixos níveis de interleucina 10 (IL-10) nos sobrenadantes das culturas estimuladas. Ensaios in vivo foram conduzidos em camundongos BALB/c, que foram imunizados com rSMP-3/saponina e, posteriormente, desafiados com promastigotas de Leishmania infantum. Nos resultados, a combinação rSMP-3/saponina induziu uma produção elevada de IFN-γ, IL12 e GM-CSF pelas células do baço dos camundongos imunizados. O perfil de resposta imune foi associado à redução significativa da carga parasitária em diferentes órgãos dos animais imunizados. Em conclusão, os resultados mostram que a proteína SMP-3 pode ser considerada imunogênica em camundongos e humanos e eficaz na indução de proteção contra a LV murina.In a proteomics approach performed using Leishmania amazonensis, parasite proteins showed either an increase or a decrease in their expression content during extensive in vitro cultivation and were related to the survival and infectivity of the parasites, respectively. In the present study, a computational screening was performed to predict virulence factors among these molecules. Three proteins were selected, one of which presented no structural homology to human proteins. This candidate, namely small myristoylated protein-3 (SMP3), was cloned and its recombinant version (rSMP-3) was used to stimulate peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from healthy subjects living in an endemic area of leishmaniasis and from visceral leishmaniasis (VL) patients. Results showed high interferon-γ (IFN-γ) production and low levels of interleukin 10 (IL-10) in the cell supernatants. An in vivo experiment was performed on BALB/c mice, which were immunized with rSMP-3/saponin and later challenged with Leishmania infantum promastigotes. The rSMP-3/saponin combination induced high production of protein-specific IFN-γ, IL-12, and GM-CSF by the spleen cells of the immunized mice. This pattern was associated with protection, which was characterized by a significant reduction in the parasite load in distinct organs of the immunized animals. Altogether, these results revealed that this new virulence factor is immunogenic in both mice and humans and have proven its protective efficacy against murine VL.porUniversidade Federal de Minas GeraisPrograma de Pós-Graduação em Ciências da Saúde - Infectologia e Medicina TropicalUFMGBrasilMEDICINA - FACULDADE DE MEDICINALeishmania infantumLeishmanioseProteínas RecombinantesVacinasBiologia ComputacionalLeishmania infantumProteínas recombinantesVacinasBioinformáticaAvaliação da eficácia da proteína miriostelada-3 (smp-3) de leishmania amazonensis como candidata à vacina contra a leishmaniose visceralinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFMGinstname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)instacron:UFMGORIGINALDISSERTAÇÃO MARCELO (abnt) Final.pdfDISSERTAÇÃO MARCELO (abnt) Final.pdfapplication/pdf906071https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/47248/1/DISSERTA%c3%87%c3%83O%20MARCELO%20%28abnt%29%20Final.pdf010ee1caf05ca277ea2b9fbb7943fb19MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82118https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/47248/2/license.txtcda590c95a0b51b4d15f60c9642ca272MD521843/472482022-11-16 11:19:03.337oai:repositorio.ufmg.br:1843/47248TElDRU7Dh0EgREUgRElTVFJJQlVJw4fDg08gTsODTy1FWENMVVNJVkEgRE8gUkVQT1NJVMOTUklPIElOU1RJVFVDSU9OQUwgREEgVUZNRwoKQ29tIGEgYXByZXNlbnRhw6fDo28gZGVzdGEgbGljZW7Dp2EsIHZvY8OqIChvIGF1dG9yIChlcykgb3UgbyB0aXR1bGFyIGRvcyBkaXJlaXRvcyBkZSBhdXRvcikgY29uY2VkZSBhbyBSZXBvc2l0w7NyaW8gSW5zdGl0dWNpb25hbCBkYSBVRk1HIChSSS1VRk1HKSBvIGRpcmVpdG8gbsOjbyBleGNsdXNpdm8gZSBpcnJldm9nw6F2ZWwgZGUgcmVwcm9kdXppciBlL291IGRpc3RyaWJ1aXIgYSBzdWEgcHVibGljYcOnw6NvIChpbmNsdWluZG8gbyByZXN1bW8pIHBvciB0b2RvIG8gbXVuZG8gbm8gZm9ybWF0byBpbXByZXNzbyBlIGVsZXRyw7RuaWNvIGUgZW0gcXVhbHF1ZXIgbWVpbywgaW5jbHVpbmRvIG9zIGZvcm1hdG9zIMOhdWRpbyBvdSB2w61kZW8uCgpWb2PDqiBkZWNsYXJhIHF1ZSBjb25oZWNlIGEgcG9sw610aWNhIGRlIGNvcHlyaWdodCBkYSBlZGl0b3JhIGRvIHNldSBkb2N1bWVudG8gZSBxdWUgY29uaGVjZSBlIGFjZWl0YSBhcyBEaXJldHJpemVzIGRvIFJJLVVGTUcuCgpWb2PDqiBjb25jb3JkYSBxdWUgbyBSZXBvc2l0w7NyaW8gSW5zdGl0dWNpb25hbCBkYSBVRk1HIHBvZGUsIHNlbSBhbHRlcmFyIG8gY29udGXDumRvLCB0cmFuc3BvciBhIHN1YSBwdWJsaWNhw6fDo28gcGFyYSBxdWFscXVlciBtZWlvIG91IGZvcm1hdG8gcGFyYSBmaW5zIGRlIHByZXNlcnZhw6fDo28uCgpWb2PDqiB0YW1iw6ltIGNvbmNvcmRhIHF1ZSBvIFJlcG9zaXTDs3JpbyBJbnN0aXR1Y2lvbmFsIGRhIFVGTUcgcG9kZSBtYW50ZXIgbWFpcyBkZSB1bWEgY8OzcGlhIGRlIHN1YSBwdWJsaWNhw6fDo28gcGFyYSBmaW5zIGRlIHNlZ3VyYW7Dp2EsIGJhY2stdXAgZSBwcmVzZXJ2YcOnw6NvLgoKVm9jw6ogZGVjbGFyYSBxdWUgYSBzdWEgcHVibGljYcOnw6NvIMOpIG9yaWdpbmFsIGUgcXVlIHZvY8OqIHRlbSBvIHBvZGVyIGRlIGNvbmNlZGVyIG9zIGRpcmVpdG9zIGNvbnRpZG9zIG5lc3RhIGxpY2Vuw6dhLiBWb2PDqiB0YW1iw6ltIGRlY2xhcmEgcXVlIG8gZGVww7NzaXRvIGRlIHN1YSBwdWJsaWNhw6fDo28gbsOjbywgcXVlIHNlamEgZGUgc2V1IGNvbmhlY2ltZW50bywgaW5mcmluZ2UgZGlyZWl0b3MgYXV0b3JhaXMgZGUgbmluZ3XDqW0uCgpDYXNvIGEgc3VhIHB1YmxpY2HDp8OjbyBjb250ZW5oYSBtYXRlcmlhbCBxdWUgdm9jw6ogbsOjbyBwb3NzdWkgYSB0aXR1bGFyaWRhZGUgZG9zIGRpcmVpdG9zIGF1dG9yYWlzLCB2b2PDqiBkZWNsYXJhIHF1ZSBvYnRldmUgYSBwZXJtaXNzw6NvIGlycmVzdHJpdGEgZG8gZGV0ZW50b3IgZG9zIGRpcmVpdG9zIGF1dG9yYWlzIHBhcmEgY29uY2VkZXIgYW8gUmVwb3NpdMOzcmlvIEluc3RpdHVjaW9uYWwgZGEgVUZNRyBvcyBkaXJlaXRvcyBhcHJlc2VudGFkb3MgbmVzdGEgbGljZW7Dp2EsIGUgcXVlIGVzc2UgbWF0ZXJpYWwgZGUgcHJvcHJpZWRhZGUgZGUgdGVyY2Vpcm9zIGVzdMOhIGNsYXJhbWVudGUgaWRlbnRpZmljYWRvIGUgcmVjb25oZWNpZG8gbm8gdGV4dG8gb3Ugbm8gY29udGXDumRvIGRhIHB1YmxpY2HDp8OjbyBvcmEgZGVwb3NpdGFkYS4KCkNBU08gQSBQVUJMSUNBw4fDg08gT1JBIERFUE9TSVRBREEgVEVOSEEgU0lETyBSRVNVTFRBRE8gREUgVU0gUEFUUk9Dw41OSU8gT1UgQVBPSU8gREUgVU1BIEFHw4pOQ0lBIERFIEZPTUVOVE8gT1UgT1VUUk8gT1JHQU5JU01PLCBWT0PDiiBERUNMQVJBIFFVRSBSRVNQRUlUT1UgVE9ET1MgRSBRVUFJU1FVRVIgRElSRUlUT1MgREUgUkVWSVPDg08gQ09NTyBUQU1Cw4lNIEFTIERFTUFJUyBPQlJJR0HDh8OVRVMgRVhJR0lEQVMgUE9SIENPTlRSQVRPIE9VIEFDT1JETy4KCk8gUmVwb3NpdMOzcmlvIEluc3RpdHVjaW9uYWwgZGEgVUZNRyBzZSBjb21wcm9tZXRlIGEgaWRlbnRpZmljYXIgY2xhcmFtZW50ZSBvIHNldSBub21lKHMpIG91IG8ocykgbm9tZXMocykgZG8ocykgZGV0ZW50b3IoZXMpIGRvcyBkaXJlaXRvcyBhdXRvcmFpcyBkYSBwdWJsaWNhw6fDo28sIGUgbsOjbyBmYXLDoSBxdWFscXVlciBhbHRlcmHDp8OjbywgYWzDqW0gZGFxdWVsYXMgY29uY2VkaWRhcyBwb3IgZXN0YSBsaWNlbsOnYS4KRepositório de PublicaçõesPUBhttps://repositorio.ufmg.br/oaiopendoar:2022-11-16T14:19:03Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)false
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