Identificação de Staphyloccus aureus, avaliação do seu pontecial enterotoxigênico e resistência a meticilina pela técnica de PCR em amostras de leite da microrregião de Sete Lagoas - MG, 2009

• Autor(a) principal: Natanael Lamas Dias
• Data de Publicação: 2010
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/SSLA-87QN2J
• topic: MRSA; enterotoxinas; Staphylococcus aureus; PCR; Veterinária; Leite Análise; Estafilococos aureos; Reação em cadeia de polimerase

Neste trabalho foi realizada a identificação de Staphylococcus aureus e a avaliação do seu potencial enterotoxigênico a partir de amostras de leite de bovinos de propriedades rurais localizadas na microrregião de Sete Lagoas-MG, no período de março a junho de 2009. Utilizou-se a extração de DNA de S. aureus diretamente de amostras de leite, seguida da amplificação pela técnica da PCR dos genes fem A, sea, seb e sec. Os S. aureus resistentes à Meticilina (MRSA) foram detectados pela amplificação do gene mec A. A avaliação da sensibilidade e especificidade da técnica foi realizada em leite artificialmente contaminado com amostras de S. aureus padrão (ATCC 25923, ATCC 13565, ATCC 14458, ATCC 19095 e ATCC 33591) em concentração bacteriana conhecida. A especificidade foi demonstrada pela presença de produtos de PCR de tamanho esperado ao utilizar como molde, o DNA das amostras de referência (controle positivo) e pela ausência de amplificação do DNA de S. epidermidis (controle negativo). O limite de detecção dos microrganismos foi de 10 UFC/mL para todos os genes avaliados com os iniciadores específicos. Foram analisadas 200 amostras de leite de tanque de expansão da microrregião de Sete Lagoas -MG, quanto à presença do gene fem A. Das 200 amostras estudadas analisou-se estatisticamente se houve correlação entre a presença de S. aureus identificados nas amostras de leite com maiores Contagens bacteriana totais (CBT) e se as maiores Contagens de células somáticas (CCS) também estavam relacionadas com a maior presença de S. aureus. Dessas 200 amostras, em 145 (72,5%) houve amplificação do gene fem A e estas foram analisadas quanto à presença dos genes sea, seb, sec e mec A. Os genes das enterotoxinas mais prevalentes foram: sea (60%), seguida de seb (37,93%) e posteriormente sec (6,89%). Foram encontradas 18 amostras de leite (11,03 %) com S. aureus portadores do gene mec A, identificando a presença de MRSA no leite da microrregião estudada. Não houve correlação entre as taxas de identificação de S. aureus e altas CCS e CBT. A detecção de S. aureus diretamente do leite, sem a necessidade de isolamento bacteriano, e a caracterização do potencial enterotoxigênico sugere a utilização da técnica de PCR para estudos epidemiológicos das infecções estafilocócicas da glândula mamária. O alto percentual (72,5%) de amostras de leite positivas para a presença do gene fem A, sugere que S. aureus constitui-se em um dos principais agentes causadores de infecções intramamárias na microrregião de Sete Lagoas-MG e que seu potencial enterotoxigênico representa um risco potencial à saúde pública. Ressalta-se que a presença de MRSA evidencia a seleção de microorganismos resistentes a antibióticos, provavelmente devido ao uso indiscriminado de antibióticos além de comprometer a qualidade do leite e de produtos derivados é também um risco a saúde humana