Caracterização fenotípica, genotípica e avaliação por PCR do potencial enterotoxigênico de Staphylococcus aureus isolados de amostras de leite cru refrigerado

• Main Author: Junia Pacheco Teixeira
• Publication Date: 2013
• Format: Doctoral thesis
• Language: por
• Source: Repositório Institucional da UFMG
• Download full: http://hdl.handle.net/1843/SMOC-9QBPYC
• topic: Enterotoxinas estafilocócicas; Concentração inibitória mínima; FemA; Leite bovino; Mastite; mecA; MRSA; PCR multiplex; Staphylococcus aureus; Leite Análise; Enterotoxinas; Estafilococos aureos; Reação em cadeia de polimerase

Staphylococcus aureus tem sido associado a surtos de origem alimentar, em virtude da capacidade de produzirem enterotoxinas. Dentre os alimentos envolvidos nestas intoxicações estão o leite e seus derivados, em decorrência de contaminação por estes patógenos que são os principais causadores da mastite bovina. Neste trabalho foi realizada a identificação de S. aureus e a avaliação do seu potencial enterotoxigênico, a partir de amostras de leite cru refrigerado de bovinos, obtidas do Laboratório de Análise da Qualidade de Leite da Escola de Veterinária da UFMG (LabUFMG), no período de Julho de 2009 a Março de 2010. Foram analisadas 251 amostras de leite de tanque de expansão e destas, foram obtidos 278 isolados de S. aureus (86,06%) e 45 isolados de Staphylococcus coagulase negativas-SCN (13,93%), pelos métodos microbiológicos de rotina. Estes isolados foram avaliados, por PCR convencional e biplex, para amplificação dos genes femA e mecA, e por PCR multiplex para pesquisa dos genes que codificam as enterotoxinas estafilocócicas. O percentual de 82,06%, para a presença do gene femA, entre os isolados de S. aureus, sugere o uso desta ferramenta para a identificação desta bactéria a partir do leite. Em 12 isolados, 4,31% deles apresentaram o gene mecA, identificando a presença de Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA), nas amostras de leite trabalhadas. Entre as enterotoxinas estafilocócicas predominaram a seA e seB (1,07% cada). As presenças de genes de enterotoxinas e de amostras de MRSA evidenciam o potencial enterotoxigênico dos S. aureus isolados do leite originado de animais com mastites, e os riscos que isto pode apresentar para a saúde pública. S. aureus, avaliados pelo método de disco-difusão em ágar, apresentaram susceptibilidade à gentamicina (94%) e resistência à penicilina (90%) e a enrofloxacina (58%). Ao teste de concentração inibitória mínimaCIM, os isolados de S. aureus apresentaram susceptibilidade à enrofloxacina (92,54% e CIM90 4 µg/mL) e gentamicina (80% e CIM90 16 µg/mL) e resistência à penicilina G (18,47% e CIM90 64 µg/mL).