Mecanismos moleculares determinantes da sensibilidade diferencial de macrófagos de camundongos C57BL/6 e BALB/c a LPS para produção de NO

• Autor(a) principal: Luciana Souza de Oliveira
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-9QHEME
• topic: Bioquímica e Imunologia; Bioquímica e imunologia

Os macrófagos de camundongos C57BL/6 produzem níveis maiores de NO que os macrófagos de camundongos BALB/c quando estimulados com LPS. Este trabalho teve como objetivo investigar os mecanismos moleculares que determinam esta produção diferencial intríseca de NO pelos macrófagos de C57BL/6 e BALB/c. Analisando inicialmente a influencia da arginase, observamos que, embora as isoformas desta enzima sejam diferencialmente expressas nos macrófagos de C57BL/6 e BALB/c, a atividade total da arginase não difere nestas células e, portanto, não deve ser responsável pela diferença na produção de NO nas duas linhagens de camundongos. A menor produção de NO pelos macrófagos de BALB/c foi correlacionada com a menor expressão da proteína e do mRNA da iNOS. Nosso grupo já havia mostrado que a menor expressão do mRNA da iNOS não é devida a uma maior degradação desta molécula e, neste trabalho mostramos que a menor expressão da proteína iNOS também é independente de sua taxa de degradação. Esses dados sugeriram que a transcrição do gene da iNOS deve ser menos eficiente nos macrófagos de BALB/c do que de C57BL/6. A análise de dois fatores de transcrição importantes para a transcrição do gene da iNOS mostrou que, enquanto a ativação do NF- B não se correlaciona com a expressão da iNOS nos macrófagos desses camundongos, a ativação do STAT-1 é maior em macrófagos de camundongos C57BL/6 do que em camundongos BALB/c. Foi mostrado ainda que os macrófagos de C57BL/6 expressam mais TLR4, IFN- e IL-10 e menos TNF- do que células de BALB/c. No entanto, não há uma correlação entre a expressão de IL-10 e TNF-, uma vez que estas citocinas são conhecidas por respectivamente, inibir e estimular a produção de NO em macrófagos. A produção diferencial de IL-10 e TNF- também pode ser devido à produção diferencial de IFN-, já que esta citocina é capaz de induzir a produção de IL-10 que por sua vez inibe a produção de TNF-. A neutralização do IFN- aboliu a ativação de STAT-1 e diminuiu a produção de NO em camundongos C57BL/6 para níveis semelhantes aos produzidos por camundongos BALB/c, mostrando que o IFN- é determinante para o acréscimo na produção de NO por macrófagos de C57BL/6 em relação aos de BALB/c. Assim, é possível concluir que macrófagos de BALB/c produzem menos NO que os macrófagos de C57BL/6 devido a uma deficiência na sinalização mediada por TLR4 que leva à produção de IFN- e consequentemente à ativação de STAT-1.