Obtenção e avaliação do potencial imunoadjuvante de nanopartículas de quitosana na produção de antissoro contra a peçonha da serpente Crotalus durissus cascavella

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Silva, Fiamma Gláucia da
Data de Publicação: 2018
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFRN
Texto Completo: https://repositorio.ufrn.br/jspui/handle/123456789/26691
Resumo: O envenenamento por picada de serpente é uma doença tropical negligenciada em várias regiões do mundo. No Brasil, a serpente Crotalus durissus cascavella (CDC) pertence a um gênero com a peçonha de maior letalidade. A busca por novos imunoadjuvantes teve como objetivo ampliar as alternativas terapêuticas para melhorar as vacinas e soros antiveneno. Diante disso, esse estudo propôs a produção de nanopartículas de quitosana (NPQ) associadas a peçonha da CDC, por duas técnicas de associação: adsorção e incorporação, capazes de induzir uma resposta de anticorpos contra a peçonha da serpente CDC. O método de gelificação iônica induziu a formação de nanopartículas esféricas, estáveis e ligeiramente lisas (<160 nm) com eficiência de incorporação superior a 94%, para ambos os métodos de associação da peçonha. As interações entre proteínas da peçonha e as NPQ foram avaliadas usando espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier, que corroboraram com o comportamento de liberação in vitro das proteínas das nanopartículas. Por fim, a hiperimunização animal usando camundongos BALB/c demonstrou maior eficácia das NPQ associadas a peçonha da CDC, principalmente pelo método de adsorção, que produziu títulos de IgG mais elevados para as diferentes concentrações (0,5 e 1,0%) até a diluição de 1:6400 quando comparado com o hidróxido de alumínio, imunoadjuvante convencional. No método de incorporação também foi possível observar um maior título de anticorpos quando comparado aos anticorpos produzidos pelo hidróxido de alumínio, a partir da diluição 1:6400 até 1:25600 para a concentração de 0,5% e até a diluição de 1:3200 para a 1,0% da peçonha. Assim, as nanopartículas de quitosana associadas com a peçonha da CDC exibiram uma abordagem biotecnológica promissora para um futuro imunoadjuvante.
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Diante disso, esse estudo propôs a produção de nanopartículas de quitosana (NPQ) associadas a peçonha da CDC, por duas técnicas de associação: adsorção e incorporação, capazes de induzir uma resposta de anticorpos contra a peçonha da serpente CDC. O método de gelificação iônica induziu a formação de nanopartículas esféricas, estáveis e ligeiramente lisas (<160 nm) com eficiência de incorporação superior a 94%, para ambos os métodos de associação da peçonha. As interações entre proteínas da peçonha e as NPQ foram avaliadas usando espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier, que corroboraram com o comportamento de liberação in vitro das proteínas das nanopartículas. Por fim, a hiperimunização animal usando camundongos BALB/c demonstrou maior eficácia das NPQ associadas a peçonha da CDC, principalmente pelo método de adsorção, que produziu títulos de IgG mais elevados para as diferentes concentrações (0,5 e 1,0%) até a diluição de 1:6400 quando comparado com o hidróxido de alumínio, imunoadjuvante convencional. No método de incorporação também foi possível observar um maior título de anticorpos quando comparado aos anticorpos produzidos pelo hidróxido de alumínio, a partir da diluição 1:6400 até 1:25600 para a concentração de 0,5% e até a diluição de 1:3200 para a 1,0% da peçonha. Assim, as nanopartículas de quitosana associadas com a peçonha da CDC exibiram uma abordagem biotecnológica promissora para um futuro imunoadjuvante.Snakebite envenoming is a tropical disease neglected in many regions of the world world. In Brazil, the Crotalus durissus cascavella (CDC) snake belongs to a genus with venom of highest lethality. A search for new immunoadjuvants aimed to expand the therapeutic alternatives to improve vaccines and antivenom. Thus, this approach proposed to produce small and narrow-sized cationic CDC venom-loaded chitosan nanoparticles (CHNP), by the two association method: adsorption and incorporation, able to induce antibody response against the CDC venom. The ionic gelation method induced the formation of stable and slightly smooth spherical nanoparticles (< 160 nm) with protein loading efficiency superior to 90%. The interactions between venom proteins and CHNP assessed using Fourier transform infrared spectroscopy corroborated with the in vitro release behavior of proteins from nanoparticles. Finally, the immunization animal model using BALB/c mice demonstrated the higher effectiveness of CDC venom-loaded CHNP, mainly by the adsorption method, compared to aluminum hydroxide, from the dilution 1: 6400 to 1: 25600 for the concentration of 0.5% and up to the dilution of 1: 3200 to 1.0% of the venom. Thus, CHNPs loaded with CDC venom exhibited a promising biotechnological approach to immunoadjuvant future.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIAAntivenenoCrotalus durissus cascavellaNanopartículas de QuitosanaObtenção e avaliação do potencial imunoadjuvante de nanopartículas de quitosana na produção de antissoro contra a peçonha da serpente Crotalus durissus cascavellainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisPROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS FARMACÊUTICASUFRNBrasilinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UFRNinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)instacron:UFRNTEXTObtençãoavaliaçãopotencial_Silva_2018.pdf.txtObtençãoavaliaçãopotencial_Silva_2018.pdf.txtExtracted texttext/plain154210https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/26691/2/Obten%c3%a7%c3%a3oavalia%c3%a7%c3%a3opotencial_Silva_2018.pdf.txtb72c8bd180c4e8d0d8eef38ae02e4a7bMD52THUMBNAILObtençãoavaliaçãopotencial_Silva_2018.pdf.jpgObtençãoavaliaçãopotencial_Silva_2018.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1295https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/26691/3/Obten%c3%a7%c3%a3oavalia%c3%a7%c3%a3opotencial_Silva_2018.pdf.jpg00aaae2258f3aa5afec7075f424e2f55MD53ORIGINALObtençãoavaliaçãopotencial_Silva_2018.pdfapplication/pdf2122890https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/26691/1/Obten%c3%a7%c3%a3oavalia%c3%a7%c3%a3opotencial_Silva_2018.pdfcb6a311098440ecd415f0cbd52a9d86cMD51123456789/266912019-05-26 03:10:07.606oai:https://repositorio.ufrn.br:123456789/26691Repositório de PublicaçõesPUBhttp://repositorio.ufrn.br/oai/opendoar:2019-05-26T06:10:07Repositório Institucional da UFRN - Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)false
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