Detection and quantification of Roundup Ready® soybean residues in sausage samples by conventional and real-time PCR

• Autor(a) principal: De-Barros, Everaldo Gonçalves
• Data de Publicação: 2008
• Outros Autores: Marcelino, Francismar Corrêa, Guimarães, Marta Fonseca Martins
• Tipo de documento: Artigo
• Idioma: eng
• Título da fonte: LOCUS Repositório Institucional da UFV
• Texto Completo: http://dx.doi.org/10.1590/S0101-20612008000500007; http://locus.ufv.br//handle/123456789/25971
• topic: PCR quantitative; GMO; Sausage; Transgenic residues; PCR quantitativo; OGM; Salsicha; Resíduos transgênicos

A presença crescente de produtos derivados de plantas geneticamente modificadas (GM) na dieta humana e de animais tem levado ao desenvolvimento de métodos de detecção capazes de distinguir entre alimentos derivados da biotecnologia e alimentos convencionais. As técnicas de PCR convencional e em tempo real têm sido as mais utilizadas para detectar e quantificar resíduos GM em alimentos altamente processados, respectivamente. A extração de DNA é um passo crítico durante o processo de análise. Alguns fatores, tais como, degradação de DNA, efeito de matriz e a presença de inibidores da PCR, implicam que um limite de detecção ou quantificação estabelecido para um determinado método é restrito à matriz usada durante validação e não pode ser estendido a qualquer outra matriz fora do escopo do método. No Brasil, amostras de salsicha constituíram a principal classe de produtos, nas quais resíduos de soja Roundup Ready® (RR) foram detectados. Então a validação de metodologias para detecção e quantificação destes resíduos é urgente. Amostras de salsicha foram submetidas a dois diferentes métodos de extração de DNA: Wizard modificado e CTAB. O rendimento e a qualidade foram comparados em ambos os métodos. As amostras foram analisadas por PCR convencional e em tempo real para detecção e quantificação de resíduos de soja RR. Pelo menos 200 ng de DNA total da amostra de salsicha foram necessários para garantir uma quantificação confiável. Reações contendo concentrações de DNA abaixo deste limite apresentaram grande variação nos valores de porcentagem de GM esperados. Na PCR convencional, o limite de detecção variou de 1,0 a 500 ng, dependendo do conteúdo de soja GM na amostra. A precisão, performance e linearidade foram relativamente altas, indicando que o método de análise foi satisfatório.