Caracterização da interação entre vírus da Dengue e plaquetas humanas: ativação plaquetária, função mitocondrial e secreção de citocinas

• Autor(a) principal: Hottz, Eugenio Damaceno
• Data de Publicação: 2010
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
• Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/7052
• topic: Dengue; Plaquetopenia; Função mitocondrial

A Dengue é considerada, hoje, a principal arbovirose humana no mundo, infectando milhões de pessoas e causando milhares de mortes anualmente. A infecção pode ser assintomática ou pode causar doença com quadro cínico variado, que inclui desde quadros febris sem maiores complicações até quadros graves de sangramentos e choque, nos quais plaquetopenia e aumento da permeabilidade vascular estão frequentemente presentes. A interação direta do vírus da dengue (DENV) com plaquetas parece ser um importante mecanismo implicado na plaquetopenia de pacientes com dengue, portanto a identificação e compreensão dos mecanismos envolvidos nesse processo serão de grande valia para a determinação de marcadores de gravidade e para o desenvolvimento de novos alvos terapêuticos visando prevenção e/ou resolução da febre hemorrágica do dengue/ síndrome do choque por dengue (FHD/SCD). Nesse trabalho, buscamos caracterizar os efeitos diretos do DENV-2 sobre a ativação e o metabolismo energético de plaquetas humanas a partir de um modelo de interação plaqueta-DENV in vitro. Nossos resultados mostraram que plaquetas expostas ao DENV-2 apresentaram alterações morfológicas inerentes à ativação plaquetária como espalhamento, filopodia e agregação, bem como aumento da expressão de P-selectina. Além disso, a exposição ao DENV-2 induziu a secreção de IL-4, IL-13, GM-CSF, MCP-1 e TNF-α. Importantemente, a exposição de plaquetas ao DENV-2 inativado não levou a ativação plaquetária. Para melhor compreender o papel da atividade mitocondrial durante a ativação de plaquetas expostas ao DENV-2 nós inicialmente investigamos o papel funcional da mitocôndria em plaquetas quiescentes e ativadas por trombina (controle positivo de ativação plaquetária nesse estudo). Observamos que plaquetas apesar de consumir O2 para gerar m podem também mantê-lo através da hidrólise de ATP, um processo associado com a prevenção da apoptose em outros tipos celulares. Observamos também que a ativação plaquetária por trombina promove diminuição ou aumento do m de acordo com a dose administrada, alterando consequentemente o fluxo de O2 através de mecanismos que envolvem transição de permeabilidade e reversão da ATP-sintase. Demonstramos que plaquetas expostas ao DENV-2 apresentam marcante despolarização do m e aumentada exposição de fosfatidilserina, sugerindo que o DENV pode diretamente induzir morte celular em plaquetas. Os mecanismos envolvidos na ativação e morte de plaquetas expostas ao DENV ainda devem ser elucidados, mas nossos resultados mostram que a ativação plaquetária induzida diretamente pelo DENV pode ter um papel importante na origem da plaquetopenia associada à FD/FHD, bem como na produção dos mediadores inflamatórios envolvidos na patogenia da doença.