Caracterização da atividade locomotora e perfis de expressão gênica em Rhodnius prolixus

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Marliére, Newmar Pinto
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/49047
Resumo: Rhodnius prolixus é o principal vetor da doença de Chagas, que afeta vários milhões de pessoas na América Latina. Esses insetos noturnos passam a maior parte de sua atividade locomotora durante as primeiras horas da escotofase em busca de hospedeiros adequados. Neste estudo, utilizamos análises multivariadas para caracterizar perfis de atividade locomotiva não orientada apresentadas pelas ninfas de 5º estádio ao longo do ciclo diário. Investigamos se o sexo e a expressão do gene forrageador (Rpfor) poderiam estar envolvidos na modulação dessa característica comportamental. Adicionalmente, silenciamos os genes foraging e o neuropeptídeo F (RpNPF) e avaliamos o seu efeito sobre a atividade locomotora, a dinâmica de forrageamento de indivíduos em jejum e parâmetros nutricionais de R. prolixus. A análise da RDA detectou indivíduos com características distintas em relação ao seu perfil locomotor. Além de uma grande variação na intensidade locomotora, descobrimos que uma proporção das ninfas andava durante intervalos diários incomuns. Os perfis de atividade locomotora foram afetados principalmente pela atividade total das ninfas. Esses efeitos promovidos pela atividade cumulativa foram, por sua vez, influenciados pelo sexo das ninfas. O sexo e a expressão de Rpfor tiveram uma influência significativa nos perfis, bem como nos níveis de atividade total. Quando silenciado, o gene Rpfor promoveu uma redução generalizada na atividade locomotora e um aumento no forrageamento das ninfas em jejum. Nenhum destes parâmetros foram alterados nos insetos silenciados para o gene RpNPF. Contraditoriamente, apenas os insetos silenciados para RpNPF apresentaram alterações nas taxas de ingestão de sangue e a quantidade de açúcar na hemolinfa. Os presentes resultados mostram que a variabilidade interindividual é mascarada quando o número médio de movimentos é usado como único parâmetro para descrever perfis locomotores. Além disso, nosso conjunto de dados revela efeitos específicos do sexo nos padrões de locomoção dos triatomíneos imaturos, aparentemente modulados pela expressão diferencial do gene Rpfor. E apresenta indícios da participação do gene Rpfor nos comportamentos relacionados a busca por alimento em ninfas R. prolixus. As sutis alterações observadas nos parâmetros nutricionais revelam a necessidade de investigação aprofundada para atribuir o real impacto dos genes estudados no metabolismo dos vetores da doença de Chagas.
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Neste estudo, utilizamos análises multivariadas para caracterizar perfis de atividade locomotiva não orientada apresentadas pelas ninfas de 5º estádio ao longo do ciclo diário. Investigamos se o sexo e a expressão do gene forrageador (Rpfor) poderiam estar envolvidos na modulação dessa característica comportamental. Adicionalmente, silenciamos os genes foraging e o neuropeptídeo F (RpNPF) e avaliamos o seu efeito sobre a atividade locomotora, a dinâmica de forrageamento de indivíduos em jejum e parâmetros nutricionais de R. prolixus. A análise da RDA detectou indivíduos com características distintas em relação ao seu perfil locomotor. Além de uma grande variação na intensidade locomotora, descobrimos que uma proporção das ninfas andava durante intervalos diários incomuns. Os perfis de atividade locomotora foram afetados principalmente pela atividade total das ninfas. Esses efeitos promovidos pela atividade cumulativa foram, por sua vez, influenciados pelo sexo das ninfas. O sexo e a expressão de Rpfor tiveram uma influência significativa nos perfis, bem como nos níveis de atividade total. Quando silenciado, o gene Rpfor promoveu uma redução generalizada na atividade locomotora e um aumento no forrageamento das ninfas em jejum. Nenhum destes parâmetros foram alterados nos insetos silenciados para o gene RpNPF. Contraditoriamente, apenas os insetos silenciados para RpNPF apresentaram alterações nas taxas de ingestão de sangue e a quantidade de açúcar na hemolinfa. Os presentes resultados mostram que a variabilidade interindividual é mascarada quando o número médio de movimentos é usado como único parâmetro para descrever perfis locomotores. Além disso, nosso conjunto de dados revela efeitos específicos do sexo nos padrões de locomoção dos triatomíneos imaturos, aparentemente modulados pela expressão diferencial do gene Rpfor. E apresenta indícios da participação do gene Rpfor nos comportamentos relacionados a busca por alimento em ninfas R. prolixus. As sutis alterações observadas nos parâmetros nutricionais revelam a necessidade de investigação aprofundada para atribuir o real impacto dos genes estudados no metabolismo dos vetores da doença de Chagas.The triatomine bug Rhodnius prolixus is a main vector of Chagas disease, which affects several million people in Latin-America. These nocturnal insects spend most of their locomotory activity during the first hours of the scotophase searching for suitable hosts. In this study we used multivariate analysis to characterize non-oriented locomotory activity profiles presented by 5th instar nymphs along the daily cycle. We investigated whether sex and the expression of the foraging (Rpfor) gene could be involved in the modulation of this behavioral trait. In addition, we silenced the foraging genes and neuropeptide F (RpNPF) and evaluated their effect on R. prolixus locomotor activity, foraging dynamics and nutritional parameters. RDA analysis detected individuals with distinct characteristics regarding their locomotory profile. In addition to a great variation in locomotory intensity, we found that a proportion of nymphs walked during unusual daily intervals. The locomotory activity profiles were mostly affected by the cumulative activity expressed by the nymphs. These effects promoted by cumulative activity were in turn influenced by the sex of the nymphs. Sex and the Rpfor expression had a significant influence on the profiles, as well as the levels of total activity. When silenced, the Rpfor gene promoted a generalized reduction in locomotor activity and an increase in foraging of starved nymphs. None of these parameters were altered in the silenced insects for the RpNPF gene. Contradictorily, only insects silenced for RpNPF showed changes in blood intake rates and hemolymph sugar content. The present results show that interindividual variability is masked when the mean number of movements is used as a sole parameter to describe locomotory profiles. In addition, our dataset reveals sex-specific effects on the locomotion patterns of immature triatomines, which are apparently modulated by the differential expression of the Rpfor gene. And it presents evidences of the participation of the Rpfor gene in the context of food search in R. prolixus nymphs. Subtle changes observed in nutritional parameters reveal the need for in-depth investigation to attribute the real impact of the genes studied on Chagas disease vectors metabolism.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto René Rachou. Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde. Belo Horizonte, MG, Brasil.porRhodnius prolixusAtividade locomotoraExpressão gênicaGene ForagingDoença de ChagasRhodnius prolixusLocomotory activityGene expressionForaging geneChagas diseaseCaracterização da atividade locomotora e perfis de expressão gênica em Rhodnius prolixusinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesis2019Fundação Oswaldo Cruz. Instituto René Rachou. Belo Horizonte, MG, BrasilUniversidade Federal de Minas Gerais. Belo Horizonte, BrasilBelo Horizonte, MG, BrasilPrograma de Pós-Graduação em Ciências da Saúdeinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-83082https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/49047/1/license.txt9193a7c197bc67acd023525e72a03240MD51ORIGINALT_2019_Newmar Pinto Marliere.pdfT_2019_Newmar Pinto Marliere.pdfapplication/pdf2928705https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/49047/2/T_2019_Newmar%20Pinto%20Marliere.pdf771396b78b448a1464aca6a00cb51541MD52TEXTT_2019_Newmar Pinto Marliere.pdf.txtT_2019_Newmar Pinto Marliere.pdf.txtExtracted texttext/plain182429https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/49047/3/T_2019_Newmar%20Pinto%20Marliere.pdf.txtf3aa80936b8f62d78da25deb05e934e8MD53icict/490472021-09-12 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