Expressão diferencial de genes que codificam peptídeos antimicrobianos de aedes aegypti em resposta`a infecção por Wuchereria bancrofti

• Autor(a) principal: Oliveira, Iêda Ferreira de
• Data de Publicação: 2008
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
• Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/3935
• topic: Aedes Aegypti; Culex; Wuchereria bancrofti

No Brasil, a filariose linfática causada por Wuchereria bancrofti ainda é um grave problema de saúde pública. O mosquito Culex quinquefasciatus é o principal vetor nas áreas onde este nematódeo tem periodicidade noturna, enquanto Aedes aegypti é uma espécie naturalmente refratária. Os mecanismos responsáveis pela refratariedade a W. bancrofti nesta espécie de mosquito são desconhecidos. Desse modo, estudos sobre a resposta imune de Ae. aegypti à W. bancrofti são importantes para compreender os mecanismos que limitam o desenvolvimento deste patógeno nesta espécie de mosquito. O objetivo deste trabalho foi avaliar o padrão de expressão temporal dos genes defensina, cecropina e transferrina de Ae. aegypti infectados artificialmente com W. bancrofti, assim como observar o desenvolvimento do filarídeo neste mosquito comparado com Cx. quinquefasciatus. Fêmeas de Ae. aegypti Rec Lab e Cx. quinquefasciatus CqSF foram alimentadas artificialmente com amostras de sangue venoso de voluntários infectados e não infectados com W. bancrofti. Após o repasto sanguíneo, foi extraído o RNA total de pools Ae. aegypti - tanto do grupo controle, quanto do grupo infectado, coletados nos seguintes tempos: 2h, 24h, 48h, 72h e 7 dias. Os RNAs foram submetidos a reações de RT-PCR em tempo real com primers específicos para os genes da defensina, cecropina, transferrina e rpL8 (controle endógeno), separadamente e em duplicata. A expressão relativa destes genes foi calculada pelo método 2- C T. Nas observações microscópicas, a cabeça, tórax e abdômen de mosquitos Ae. aegypti e Cx. Quinquefasciatus foram dissecados durante os 15 dias pós-infecção, a fim de avaliar a migração, o desenvolvimento e o movimento dos parasitas. Os resultados mostraram que a transcrição da defensina, cecropina e transferrina aumentou em Ae. aegypti logo após a infecção com W. bancrofti, apresentou picos às 2h (cecropina) ou 24h (defensina e transferrina), e diminuiu a partir de 48h. Os picos de transcritos imunes coincidiram com o período de migração da microfilária para o tórax de Ae. aegypti, que ocorreu nas primeiras 24h. Após a migração, vermes filarídeos diferenciaram-se em larvas de primeiro estádio salsichóide, mas interromperam o desenvolvimento a partir desse momento, diferentemente de Cx. quinquefasciatus, cujo desenvolvimento de W. bancrofti foi normal. É possível que defensina, cecropina e transferrina estejam envolvidas na resposta imune de Ae. aegypti à infecção por W. bancrofti