Avaliação da resistência a antibióticos beta-lactâmicos em isolados de Staphylococcus spp
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Data de Publicação: | 2012 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) |
Texto Completo: | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/60874 |
Resumo: | O uso indiscriminado de antibiótico favorece o surgimento de cepas de Staphylococcus spp. resistentes à oxacilina. O mecanismo dessa resistência é devido à produção da proteína PBP2a, codificada pelo gene mecA. Alguns isolados clínicos apresentam o gene mecA, porém são sensíveis a concentrações de oxacilina e cefoxitina, ou seja, nesses isolados, denominados pré-MRS ou OSMRS, a presença do mecA não está associada à sua expressão. Acredita-se que, ao sofrerem pressão seletiva pelo uso indiscriminado de antibióticos, isolados pré-MRS podem tornar-se resistentes. O objetivo desse trabalho foi determinar se o surgimento de cepas de Staphylococcus resistentes à oxacilina e cefoxitina ocorre devido ao estímulo da expressão da PBP2a (indução) ou por seleção antibiótica de linhagens resistentes. Para isso, foram analisadas 42 isolados de Staphylococcus spp., vinte e cinco Staphylococcus aureus e 17 Staphylococcus Coagulase Negativa (SCN) de um Hospital Universitário de Recife-PE. Antes da exposição ao antibiótico a Concentração Inibitória Mínima (MIC) dos isolados foi determinada, o reconhecimento da PBP2a foi avaliado pelos testes de Western blot e Imunofluorescência Indireta (IFI) e realizadas provas de indução de resistência e de seleção por uso de antibiótico. O Western blot e a IFI mostraram que em algumas amostras havia expressão da PBP2a mesmo na ausência do antibiótico. No teste de indução com oxacilina houve uma estabilização do MIC e os isolados não alcançaram o MIC de resistência sugerindo um mecanismo de seleção. No teste para confirmação do processo de seleção, foi observada variabilidade entre as colônias de um mesmo isolado caracterizando um perfil de heteroresistência, enquanto alguns isolados se mostraram homogêneos, com alto nível de resistência. Esses achados reforçam a importância da detecção do gene mecA e da proteína PBP2a para conduta de prescrição de antibióticos na prática clínica . |
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Mangueira, Eduarda Vanessa CavalcanteLea, Nilma CintraVilela, Marinalda AnselmoOliveira, Sheilla AndradeLeal, Nilma Cintra2023-10-23T15:06:01Z2023-10-23T15:06:01Z2012MANGUEIRA, Eduarda Vanessa Cavalcante. Avaliação da resistência a antibióticos beta-lactâmicos em isolados de Staphylococcus spp. 2012. 55 pilus. Dissertação, (mestrado)-Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães, Fundação Oswaldo Cruz, Recife, 2012.https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/60874O uso indiscriminado de antibiótico favorece o surgimento de cepas de Staphylococcus spp. resistentes à oxacilina. O mecanismo dessa resistência é devido à produção da proteína PBP2a, codificada pelo gene mecA. Alguns isolados clínicos apresentam o gene mecA, porém são sensíveis a concentrações de oxacilina e cefoxitina, ou seja, nesses isolados, denominados pré-MRS ou OSMRS, a presença do mecA não está associada à sua expressão. Acredita-se que, ao sofrerem pressão seletiva pelo uso indiscriminado de antibióticos, isolados pré-MRS podem tornar-se resistentes. O objetivo desse trabalho foi determinar se o surgimento de cepas de Staphylococcus resistentes à oxacilina e cefoxitina ocorre devido ao estímulo da expressão da PBP2a (indução) ou por seleção antibiótica de linhagens resistentes. Para isso, foram analisadas 42 isolados de Staphylococcus spp., vinte e cinco Staphylococcus aureus e 17 Staphylococcus Coagulase Negativa (SCN) de um Hospital Universitário de Recife-PE. Antes da exposição ao antibiótico a Concentração Inibitória Mínima (MIC) dos isolados foi determinada, o reconhecimento da PBP2a foi avaliado pelos testes de Western blot e Imunofluorescência Indireta (IFI) e realizadas provas de indução de resistência e de seleção por uso de antibiótico. O Western blot e a IFI mostraram que em algumas amostras havia expressão da PBP2a mesmo na ausência do antibiótico. No teste de indução com oxacilina houve uma estabilização do MIC e os isolados não alcançaram o MIC de resistência sugerindo um mecanismo de seleção. No teste para confirmação do processo de seleção, foi observada variabilidade entre as colônias de um mesmo isolado caracterizando um perfil de heteroresistência, enquanto alguns isolados se mostraram homogêneos, com alto nível de resistência. Esses achados reforçam a importância da detecção do gene mecA e da proteína PBP2a para conduta de prescrição de antibióticos na prática clínica .The indiscriminate use of antibiotics promotes the emergence of meticillin-resistant Staphylococcus strains. The mechanism of this resistance is the production of PBP2a protein, encoded by mecA. Some clinical isolates have the gene mecA but are sensitive to concentrations of oxacillin and cefoxitina. In these isolates, termed pre-MRS or OS-MRS, the presence of mecA is not associated with its expression. It is believed that due to selective pressure by the use of antibiotics, pre-MRS isolates become resistant. The aim of this study was to determine whether MRS strains emergence is due to stimulation PBP2a expression (induction) or by antibiotic selection of resistant strains. We analyzed 42 isolates of Staphylococcus spp, 25 Staphylococcus aureus and 17 Staphylococcus coagulase negative (SCN) isolated from a University Hospital of Recife-PE. Prior to antibiotic exposure the minimum inhibitory concentracion (MIC) was determined and the Western blot and indirect immunofluorescence (IFI) immunological tests for PBP2a detection and tests of induction and selection by use of antibiotics were performed. The Western blot and IFI showed that some samples expressed PBP2a in the absence of antibiotics. In the induction test with oxacillin the isolates did not reach the resistance MIC suggesting selection mechanism. In the selection test, variation was observed among colonies of the same strain, revealing a heteroresistance profile, and some isolates were homogeneous, with a high level of resistance. These findings reinforce the importance of mecA gene and PBP2a protein detection for antibiotic prescription management in clinical practice .Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil.Universidade de Pernambuco. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil.porStaphylococcusResistência Microbiana a MedicamentosWestern BlottingImunofluorescênciaStaphylococcusMicrobial Drug ResistanceWestern BlottingImmunofluorescenceEstafilococoResistencia microbiana a los medicamentosTransferencia WesterninmunofluorescenciaStaphylocoqueRésistance aux médicaments microbiensWestern BlotImmunofluorescenceStaphylococcusEf DrogasStaphylococcusImunolResistência Microbiana a MedicamentosGenetWestern BlottingMétodosWestern BlottingUtilImunofluorescênciaMétodosImunofluorescênciaUtilAvaliação da resistência a antibióticos beta-lactâmicos em isolados de Staphylococcus sppEvaluation of beta-lactam antibiotic resistance in isolates of Staphylococcus sppinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2012-03-01Fundação Oswaldo CruzMestrado AcadêmicoRecifePrograma de Pós-Graduação em Saúde Públicainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/60874/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALeduarda_mangueira_iam_mest_2012.pdfeduarda_mangueira_iam_mest_2012.pdfapplication/pdf1484547https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/60874/3/eduarda_mangueira_iam_mest_2012.pdf1dd679c21bb5a8c0e51983851f9a0099MD53icict/608742023-10-23 12:06:02.774oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352023-10-23T15:06:02Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false |
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