A simple method to purify biologically and antigenically preserved bloodstream trypomastigotes of Trypanosoma cruzi using Deae-cellulose columns

• Autor(a) principal: Souza, Maria Auxiliadora de
• Data de Publicação: 1983
• Tipo de documento: Artigo
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
• Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/42145
• topic: Trypanosoma cruzi; Ttripomastigotas; Corrente sanguínea; Colunas de Deae-celulose; Método; Trypanosoma cruzi; Trypomastigotes; Method; Purify; Deae-cellulose columns

Usando colunas de DEAE-cellulose foi padronizado um método para purificação de tripomastigotas de várias cepas de Trypanosoma cruzi (Y, CL, FL, F, "Berenice", "Columbiana" e "São Felipe") a partir do sangue de camundongos. Este método é uma modificação daqueles descritos por Lanham & Godfrey e difere em vários aspectos de outros descritos para purificar as formas sanguíneas deste parasita, particularmente na dispensa de pré-purificações. Por ele foram isolados principalmente os tripomastigotas largos, oque certamente justifica as maiores percentagens de recuperação obtidas com cepas em que predominavam estas formas; por outro lado, o processamento de sangue infectado de camundongos irradiados podia ser vantajoso pela recuperação de maior número e percentagem de parasitas e eluição de mais formas finas. Os tripomastigotas purificados por este método apresentavam morfologia e motilidade normais e continuavam infectantes para barbeiros e camundongos. Nestes últimos apresentaram período pré-patente e curvas parasitêmicas semelhantes aos dos parasitas controles, além de reproduzirem o padrão de polimorfismo típico da cepa. Sua virulência e patogenicidade também manteve-se consideravelmente preservada, sendo que esta última propriedade foi avaliada por testes de DL 50, taxas de mortalidade e tempo médio de sobrevida de camundongos inoculados. Além do masi, os tripomastigotas purificados apresentaram reação de imunofluorescência positiva, nítida e periférica, cujos títulos eram comparáveis aos dos parasitas controles, assim sugerindo uma importante preservação de seus antígenos de superfície.