Influência da alimentação sanguínea e da infecção experimental pelo Trypanosoma cruzi na modulação da atividade enzimática e expressão gênica de glicosídeo hidrolases de Rhodnius prolixus

• Autor(a) principal: Souza, Gerson Profeta de
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
• Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/19367
• topic: Rhodnius; Glicosídeo Hidrolases; Doença de Chagas; Digestão

A Doença de Chagas é uma infecção parasitária, endêmica no Brasil, onde diversos biomas ainda são favoráveis à instalação de vetores. O protozoário Trypanosoma cruzi, agente etiológico da Doença de Chagas, é naturalmente transmitido pelas fezes e urina de triatomíneos infectados. A espécie Rhodnius prolixus é um modelo muito utilizado em estudos fisiológicos de interação parasito-vetor, além de ser considerada um importante vetor da Doença de Chagas em alguns países do continente americano. As glicosídeo hidrolases (GHs) são enzimas responsáveis por realizar a hidrólise de ligações glicosídicas, e podem desempenhar papel importante na digestão de açúcares do sangue da alimentação. O estudo de enzimas que participam do processo de digestão torna-se um ponto importante a ser estudado, pois todo ciclo do T.cruzi ocorre no trato digestivo dos triatomíneos. Verificamos que ensaios contínuos podem ser utilizados para medidas de atividade de diferentes glicosidases, fornecendo algumas vantagens sobre a metodologia tradicionalmente utilizada. Através deste método determinamos o perfil de atividade enzimática de seis glicosidases (\F061-Glicosidase, \F062-Glicosidase,\F020\F061-Manosidase, N-acetil hexosaminidase, \F062- Galactosidase e \F061-Fucosidase) no aparelho digestivo, ao longo da digestão de Rhodnius prolixus. Foram observados padrões distintos de atividade enzimática nos diferentes compartimentos estudados Algumas glicosidases são induzidas após alimentação, mostrou-se também que na maioria dos tecidos o pico máximo de atividade encontra-se no 5º, 7º ou 9º dia após alimentação. \F061-Glicosidase mostrou-se majoritária na fração tecidual do intestino médio, apresentando concentrações muito superiores às demais GHs em qualquer parte do intestino. Na fração solúvel do intestino médio anterior esta glicosidase apresentou indução de 7,5 vezes 9 dias após alimentação. Estudos de expressão gênica revelaram que alguns genes são expressos de forma constante nos compartimentos estudados, conforme apresentado por RPRC007504, identificador de \F020\F061-Fucosidase. Os genes de \F062-Galactosidase investigados são preferencialmente expressos no intestino médio posterior, e estes dados são coerentes com a alta atividade desta enzima neste compartimento. Observamos também que a infecção pelo protozoário Trypanosoma cruzi modula a atividade de Glicosídeo Hidrolases em diferentes compartimentos do triatomíneo em etapas distintas da digestão, sugerindo que o estudo destas enzimas pode fornecer informações a cerca de novos aspectos das interações parasito-vetor