Monitoramento da suscetibilidade ao piretróide Deltametrina em populações de Triatoma sordida Stål, 1859 (Hemiptera: Reduviidae)
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2008 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) |
Texto Completo: | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/20781 |
Resumo: | A resistência de triatomíneos a inseticidas já foi relatada na Venezuela, Argentina e Bolívia, sendo possível a existência de out ros focos em regiões ainda mais amplas. Deste modo, torna-se necessário desenv olver estudos que investiguem a dispersão geográfica desses vet ores resistentes, bem como os mecanismos envolv idos, com vistas a elaborar estratégias adequadas às necessidades locais , ou até mesmo que impeçam o aparecimento deste fenômeno. O objetivo deste estudo foi padronizar ensaios biológicos para monitoramento de resistência de triatomíneos a inseticidas em laborat ório e caracterizar a su scetibilidade de quat orze populações de Tri atom a sordida Stal, 1859 de Minas Gerais (Sudest e do Bras il) ao piretróide Deltametrina. A área em que os triatomíneos foram coletados foi submetida ao controle químico por cerca de 30 anos. A linhagem referência de suscetibilid ade é oriunda de Uberaba. A metodologia foi orientada pelas recom endações da WHO (1994) e OPS (2005), tendo sido redefinidos alguns detalhes técnicos (dose diagnóstica adequada para triagem de resistência em triatomíneos, lo cal ideal de aplicaçã o do ins eticida nas ninfas I, idade e gera ção dos in setos utiliz ados). A linha base d e suscetibilidade da linhagem r eferência f oi inic ialm ente det erminada. A Deltametrina, solubilizada em acetona, foi aplicada topica ment e no dorso do abdômen de ninf as I da ger ação F 2 (cinco dias de idade, j ejum, ± 1,2 mg. de pes o) com auxílio de um a microseringa. Os resultados dos ensaios dose-resposta foram analisados com auxílio do programa PROBIT (Finney, 1971). Em seguida, as populações de campo foram submetidas a dose diagnóstica de 1XDL99 da linhagem re ferência de s uscetibi lidade e 2XDD99 da linhagem referência de susc etibilidad e. Todas as populações apresentaram-se menos sus cetíveis ao insetic ida quando co mparadas com a linhagem referência de suscetibilidade. As razões de r esistência encontradas variaram de 2,6 a 6,8. A comparação de um fragmento de DNA de 317 pb do gene mitocondrial do citocromo b (mtCytB) foi usada para inferir sobr e a varia bilidade genética das quatorze populações de T. sordida estudadas. Inferências filogenéticas, usando P. megistu s como grupo externo, não revelaram a formação de clados. O s 150 es pécimes analisados apresentaram 50 haplótipos gerando uma divers idade (Hd) de 0,831. Foi possível distinguir seis populaçõ es genet icamente diferentes. Anális e do Network revelou a presença de vários loops , demonstrando homoplas ia e a ocorrência de mutações reversas/paralelas. Com o ma rcador genético utiliz ado não foi possível estabelecer correlação entre a variabilid ade genética das populaç ões estudadas e a resistência a Deltametrina. Giordano et al. (2005) sugerem que os microssatélites podem ser uma ferramenta mais sensível e eficiente para este objetivo. A possível natureza bioquímica da resistência encontrada está sendo verificada. |
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Pessoa, Grasielle Caldas D ÁvilaDiotaiuti, Liléia GonçalvesValle, DeniseDias, João Carlos PintoDiotaiuti, Liléia Gonçalves2017-08-28T16:55:50Z2017-08-28T16:55:50Z2008PESSOA, Grasielle Caldas D`ávila. Monitoramento da suscetibilidade ao piretróide Deltametrina em populações de Triatoma sordida Stål, 1859 (Hemiptera: Reduviidae). 2008. 95 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde na área de concentração: Doenças Infecciosas e Parasitárias)-Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde)-Centro de Pesquisas René Rachou, Fundação Oswaldo Cruz, Belo Horizonte, 2008https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/20781A resistência de triatomíneos a inseticidas já foi relatada na Venezuela, Argentina e Bolívia, sendo possível a existência de out ros focos em regiões ainda mais amplas. Deste modo, torna-se necessário desenv olver estudos que investiguem a dispersão geográfica desses vet ores resistentes, bem como os mecanismos envolv idos, com vistas a elaborar estratégias adequadas às necessidades locais , ou até mesmo que impeçam o aparecimento deste fenômeno. O objetivo deste estudo foi padronizar ensaios biológicos para monitoramento de resistência de triatomíneos a inseticidas em laborat ório e caracterizar a su scetibilidade de quat orze populações de Tri atom a sordida Stal, 1859 de Minas Gerais (Sudest e do Bras il) ao piretróide Deltametrina. A área em que os triatomíneos foram coletados foi submetida ao controle químico por cerca de 30 anos. A linhagem referência de suscetibilid ade é oriunda de Uberaba. A metodologia foi orientada pelas recom endações da WHO (1994) e OPS (2005), tendo sido redefinidos alguns detalhes técnicos (dose diagnóstica adequada para triagem de resistência em triatomíneos, lo cal ideal de aplicaçã o do ins eticida nas ninfas I, idade e gera ção dos in setos utiliz ados). A linha base d e suscetibilidade da linhagem r eferência f oi inic ialm ente det erminada. A Deltametrina, solubilizada em acetona, foi aplicada topica ment e no dorso do abdômen de ninf as I da ger ação F 2 (cinco dias de idade, j ejum, ± 1,2 mg. de pes o) com auxílio de um a microseringa. Os resultados dos ensaios dose-resposta foram analisados com auxílio do programa PROBIT (Finney, 1971). Em seguida, as populações de campo foram submetidas a dose diagnóstica de 1XDL99 da linhagem re ferência de s uscetibi lidade e 2XDD99 da linhagem referência de susc etibilidad e. Todas as populações apresentaram-se menos sus cetíveis ao insetic ida quando co mparadas com a linhagem referência de suscetibilidade. As razões de r esistência encontradas variaram de 2,6 a 6,8. A comparação de um fragmento de DNA de 317 pb do gene mitocondrial do citocromo b (mtCytB) foi usada para inferir sobr e a varia bilidade genética das quatorze populações de T. sordida estudadas. Inferências filogenéticas, usando P. megistu s como grupo externo, não revelaram a formação de clados. O s 150 es pécimes analisados apresentaram 50 haplótipos gerando uma divers idade (Hd) de 0,831. Foi possível distinguir seis populaçõ es genet icamente diferentes. Anális e do Network revelou a presença de vários loops , demonstrando homoplas ia e a ocorrência de mutações reversas/paralelas. Com o ma rcador genético utiliz ado não foi possível estabelecer correlação entre a variabilid ade genética das populaç ões estudadas e a resistência a Deltametrina. Giordano et al. (2005) sugerem que os microssatélites podem ser uma ferramenta mais sensível e eficiente para este objetivo. A possível natureza bioquímica da resistência encontrada está sendo verificada.The resistance of triatomines to insectici de was reported in Vene zuela, Argentina and Boliv ia, being possib le the existe nce of other fo cus in still more ample regio ns. In this way, it becomes necessary to realize studie s to investigate the state of resistance of these vectors to insecticides, as well as its mechanisms, in order to develop adequate s trategies to the local necessities, or even to prevent t he emergence of this phenomenon. The objective of this study was standardized b iological assays for monitoring the triatomi nes resistance to inse cticide in laboratory, and to monitor the susceptibility of f ourteen populations of Triatoma sordida Stal, 1859 of Minas Gerais State (Southeast Brazil) to the pirethroid Deltamethrin . The area where the triatomines were collected was submitted to chemical c ontrol for about 30 years.The susceptibility reference strain is the U beraba. The methodology has been g uided by the OPS recommendations (2005) and WHO (1994), being redefined some technical details (ideal diagnost ic dose for resistance selection of triatomines, ideal place of application of the insecticide of nymphs I, age and generation of used insects). The baseline of the susceptibilit y of the reference strain was initially determined. Deltamethrin diluted in acetone was appli ed topically on the back of the abdomen of nymphs I of the F2 generation (five days of age, fasting, 1.0 ± 0. 2 mg. of weight) with the aid of a microsyringe. The r esults of the dose-response tes ts were analyzed using the program PROBIT (Finney, 1971). After that, the fi eld populations were submitted to the two diagnostic doses (1 XDL99 and 2XDL99 of the susceptibility reference strain) . All the populations were less susceptible to the insecticide when compared with the susceptibilit y reference strain. The resistance rate ranged from 2.6 to 6.8. The comparison of a DNA fragment of 317 pb of the DNA mitoc hondria l cytochrome b (mtCytB) gene has been used to infer the genetic variability of the fourteen T. sordida populations studi ed. Phylogenetics inferences , with P. megistus as external group, had not shown the formation of clades. The 150 s pecimens analyzed showed 50 haplotypes resulting a divers ity (Hd) of 0,831. It was possible to distinguish six different genetic populations. Analys is of the Network reveled several loops , dem onstrating homoplas ia and the occurrenc e of reverses/parallels mutations. With the genetic marker used it was not po ssible to es tablish correlation between the genetic var iability of t he ins ects and the resistance to the De ltamethrin. Giordano et al. (2005) suggests that the mi crosatellite s wou ld be a more s ensib le an d efficient tool to define this obj ective. The possible bi ochemical nature for the resistance ratios encountered is being v erifiedCNPqFAPEMIGFundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil.porresistência a inseticidasDeltametrinamtCytBvariabilidade genéticatriatomíneosTriatoma sordidainsecticide resistanceDelt amethrinmtCytgenetic variabilityMonitoramento da suscetibilidade ao piretróide Deltametrina em populações de Triatoma sordida Stål, 1859 (Hemiptera: Reduviidae)info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2008Fundação Oswaldo Cruz. 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A resistência de triatomíneos a inseticidas já foi relatada na Venezuela, Argentina e Bolívia, sendo possível a existência de out ros focos em regiões ainda mais amplas. Deste modo, torna-se necessário desenv olver estudos que investiguem a dispersão geográfica desses vet ores resistentes, bem como os mecanismos envolv idos, com vistas a elaborar estratégias adequadas às necessidades locais , ou até mesmo que impeçam o aparecimento deste fenômeno. O objetivo deste estudo foi padronizar ensaios biológicos para monitoramento de resistência de triatomíneos a inseticidas em laborat ório e caracterizar a su scetibilidade de quat orze populações de Tri atom a sordida Stal, 1859 de Minas Gerais (Sudest e do Bras il) ao piretróide Deltametrina. A área em que os triatomíneos foram coletados foi submetida ao controle químico por cerca de 30 anos. A linhagem referência de suscetibilid ade é oriunda de Uberaba. A metodologia foi orientada pelas recom endações da WHO (1994) e OPS (2005), tendo sido redefinidos alguns detalhes técnicos (dose diagnóstica adequada para triagem de resistência em triatomíneos, lo cal ideal de aplicaçã o do ins eticida nas ninfas I, idade e gera ção dos in setos utiliz ados). A linha base d e suscetibilidade da linhagem r eferência f oi inic ialm ente det erminada. A Deltametrina, solubilizada em acetona, foi aplicada topica ment e no dorso do abdômen de ninf as I da ger ação F 2 (cinco dias de idade, j ejum, ± 1,2 mg. de pes o) com auxílio de um a microseringa. Os resultados dos ensaios dose-resposta foram analisados com auxílio do programa PROBIT (Finney, 1971). Em seguida, as populações de campo foram submetidas a dose diagnóstica de 1XDL99 da linhagem re ferência de s uscetibi lidade e 2XDD99 da linhagem referência de susc etibilidad e. Todas as populações apresentaram-se menos sus cetíveis ao insetic ida quando co mparadas com a linhagem referência de suscetibilidade. As razões de r esistência encontradas variaram de 2,6 a 6,8. A comparação de um fragmento de DNA de 317 pb do gene mitocondrial do citocromo b (mtCytB) foi usada para inferir sobr e a varia bilidade genética das quatorze populações de T. sordida estudadas. Inferências filogenéticas, usando P. megistu s como grupo externo, não revelaram a formação de clados. O s 150 es pécimes analisados apresentaram 50 haplótipos gerando uma divers idade (Hd) de 0,831. Foi possível distinguir seis populaçõ es genet icamente diferentes. Anális e do Network revelou a presença de vários loops , demonstrando homoplas ia e a ocorrência de mutações reversas/paralelas. Com o ma rcador genético utiliz ado não foi possível estabelecer correlação entre a variabilid ade genética das populaç ões estudadas e a resistência a Deltametrina. Giordano et al. (2005) sugerem que os microssatélites podem ser uma ferramenta mais sensível e eficiente para este objetivo. A possível natureza bioquímica da resistência encontrada está sendo verificada. |
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