Otimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania sp
Autor(a) principal: | |
---|---|
Data de Publicação: | 2009 |
Tipo de documento: | Trabalho de conclusão de curso |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) |
Texto Completo: | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/14185 |
Resumo: | As Leishmanioses constituem umgrupo de doenças infecciosas, não contagiosas, causadas por diferentes espécies de protozoários do gênero Leishmania, sendo transmitidas pela picada de fêmeas de insetos conhecidos como flebotomíneos, apresentando-se sob duas formas clínicas: Leishmaniose tegumentar americana e Leishmaniose visceral. O diagnóstico de certeza é realizado por demonstração do parasito podendo ser feita através de inoculação de fragmentos de lesão ou outro material clínico em meios de cultura específicos. Um dos inconvenientes desse método é a possibilidade de contaminação da cultura, o que inviabiliza o exame Para evitar essa contaminação alguns cuidados são tomados como a utilização de antibióticos (benzilpenicilina e estreptomicina) e antifúngico (flucitosina) que são adicionados à solução de coleta e a utilização de antibióticos no meio de cultura. O conhecimento da estabilidadee as concentrações ideais dos compostos utilizados são fatores importantes a serem considerados, pois podem determinar o sucesso do diagnóstico. Neste estudo avaliamos a estabilidade e o efeito dessas substâncias no crescimento do parasito in vitro. Para análise da estabilidade foi primeiramente desenvolvido um método para separação das substâncias de interesse por Cromatografia líquida de alta eficiência que se mostrou muito eficazpara a separação, os resultados desta análise mostraram que o antibiótico benzilpenicilina sofreu cerca de 10% de degradação no prazo de 4 dias a 4 ºC e cerca de 20% de degradação durante 24 horas a temperatura ambiente enquanto a concentração de estreptomicina permaneceu praticamente inalterada sob as mesmas condições. Esses resultados mostram a importância da utilização correta dessas soluções a fim de evitar perda da sua atividade. Com relação à inibição do crescimento do parasito in vitro, as concentrações de 1000, 500 U/mL de benzilpenicilina e 1000, 500 μg/mL de estreptomicina e flucitosina assim como 200 U/mL benzilpenicilina + 200 μg/mL estreptomicina mostraram inibição significativa do crescimento, mostrando que as concentrações de benzilpenicilina e estreptomicina na composição de culturas de Leishmania sp.devem ser abaixo de 200 U/mL e 200 μg/mL, respectivamente. |
id |
CRUZ_76129f5a49893a99807c05725802b19a |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:www.arca.fiocruz.br:icict/14185 |
network_acronym_str |
CRUZ |
network_name_str |
Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) |
repository_id_str |
2135 |
spelling |
Mello, Cintia XavierZamith, Helena Pereira da SilvaMadeira, Maria de FátimaMazzei, André AlbertNóbrega, Armi Wanderley daAbrantes, Shirley de Mello Pereira2016-05-11T12:50:34Z2016-05-11T12:50:34Z2009MELLO, C. X. Otimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania sp. 2009. 38 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Especialização em Controle da Qualidade em Produtos, Ambientes e Serviços Vinculados à Vigilância Sanitária) - Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2009.https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/14185As Leishmanioses constituem umgrupo de doenças infecciosas, não contagiosas, causadas por diferentes espécies de protozoários do gênero Leishmania, sendo transmitidas pela picada de fêmeas de insetos conhecidos como flebotomíneos, apresentando-se sob duas formas clínicas: Leishmaniose tegumentar americana e Leishmaniose visceral. O diagnóstico de certeza é realizado por demonstração do parasito podendo ser feita através de inoculação de fragmentos de lesão ou outro material clínico em meios de cultura específicos. Um dos inconvenientes desse método é a possibilidade de contaminação da cultura, o que inviabiliza o exame Para evitar essa contaminação alguns cuidados são tomados como a utilização de antibióticos (benzilpenicilina e estreptomicina) e antifúngico (flucitosina) que são adicionados à solução de coleta e a utilização de antibióticos no meio de cultura. O conhecimento da estabilidadee as concentrações ideais dos compostos utilizados são fatores importantes a serem considerados, pois podem determinar o sucesso do diagnóstico. Neste estudo avaliamos a estabilidade e o efeito dessas substâncias no crescimento do parasito in vitro. Para análise da estabilidade foi primeiramente desenvolvido um método para separação das substâncias de interesse por Cromatografia líquida de alta eficiência que se mostrou muito eficazpara a separação, os resultados desta análise mostraram que o antibiótico benzilpenicilina sofreu cerca de 10% de degradação no prazo de 4 dias a 4 ºC e cerca de 20% de degradação durante 24 horas a temperatura ambiente enquanto a concentração de estreptomicina permaneceu praticamente inalterada sob as mesmas condições. Esses resultados mostram a importância da utilização correta dessas soluções a fim de evitar perda da sua atividade. Com relação à inibição do crescimento do parasito in vitro, as concentrações de 1000, 500 U/mL de benzilpenicilina e 1000, 500 μg/mL de estreptomicina e flucitosina assim como 200 U/mL benzilpenicilina + 200 μg/mL estreptomicina mostraram inibição significativa do crescimento, mostrando que as concentrações de benzilpenicilina e estreptomicina na composição de culturas de Leishmania sp.devem ser abaixo de 200 U/mL e 200 μg/mL, respectivamente.The Leishmaniasis is a group of infectious diseases, not contagious, caused by different species of protozoa of the genus Leishmaniaand is transmitted by the bite of insects known as the female sandfly, presenting clinics in two forms: Leishmaniasis and Visceral Leishmaniasis. The diagnosis of certainty is achieved by demonstration of the parasite can be done by inoculation of fragments of injury or otherclinical material in culture specific. One of the drawbacks of this method is the possibility of contamination of culture, which makes the examination to avoid contamination that some care is taken as the use of antibiotics (benzylpenicillin and streptomycin) and antifungal (flucytosine) that are added to the collection and use of solution of antibiotics in the culture medium. Knowledge of the stability and the optimal concentrations of the compounds used are important factors to be considered, as they may determine the success of the diagnosis. This study evaluated the stability and the effect of these substances in the growth of the parasite in vitro. For analysis of stability was first developed a method for separation of substances of interest by HPLC which was highly effective for the separation, the results of this analysis showed that the antibiotic benzylpenicillin suffered about 10% of degradation within 4 days to 4 ºC and about 20% of degradation for 24 hours at room temperature while the concentration of streptomycin remained virtually unchanged under the same conditions. These results show the importance of correct use of these solutions to avoid loss of its activity. Regarding the inhibition of growth of the parasite in vitro, the concentrations of1000, 500 U/ mL benzylpenicillin and 1000, 500 μg/mL streptomycin and flucytosine and 200 U/mL benzylpenicillin + 200 μg/mL streptomycin showed inhibition significant growth, showing that concentrations ofbenzylpenicillin and streptomycin in the composition of cultures of Leishmania sp.must be below 200 U/mL and 200 μg/mL, respectively.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.porOtimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania spinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesis2009Coordenação de Pós-GraduaçãoFundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em SaúdeRio de Janeiro/RJPrograma de Pós-Graduação em Vigilância SanitáriaLeishmaniaCromatografia Liquida de Alta PressãoInibição de Crescimento in VitroVigilância Sanitáriainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZORIGINAL10.pdfapplication/pdf4581139https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/14185/1/10.pdf66709ed4be2fdee0a0c26b3771937febMD51LICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/14185/2/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD52TEXT10.pdf.txt10.pdf.txtExtracted texttext/plain83208https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/14185/3/10.pdf.txtad242457f818db1219a362e560e4647fMD53icict/141852022-03-08 21:30:54.714oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352022-03-09T00:30:54Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false |
dc.title.pt_BR.fl_str_mv |
Otimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania sp |
title |
Otimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania sp |
spellingShingle |
Otimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania sp Mello, Cintia Xavier Leishmania Cromatografia Liquida de Alta Pressão Inibição de Crescimento in Vitro Vigilância Sanitária |
title_short |
Otimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania sp |
title_full |
Otimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania sp |
title_fullStr |
Otimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania sp |
title_full_unstemmed |
Otimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania sp |
title_sort |
Otimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania sp |
author |
Mello, Cintia Xavier |
author_facet |
Mello, Cintia Xavier |
author_role |
author |
dc.contributor.member.pt_BR.fl_str_mv |
Zamith, Helena Pereira da Silva Madeira, Maria de Fátima Mazzei, André Albert |
dc.contributor.author.fl_str_mv |
Mello, Cintia Xavier |
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv |
Nóbrega, Armi Wanderley da Abrantes, Shirley de Mello Pereira |
contributor_str_mv |
Nóbrega, Armi Wanderley da Abrantes, Shirley de Mello Pereira |
dc.subject.decs.pt_BR.fl_str_mv |
Leishmania Cromatografia Liquida de Alta Pressão Inibição de Crescimento in Vitro Vigilância Sanitária |
topic |
Leishmania Cromatografia Liquida de Alta Pressão Inibição de Crescimento in Vitro Vigilância Sanitária |
description |
As Leishmanioses constituem umgrupo de doenças infecciosas, não contagiosas, causadas por diferentes espécies de protozoários do gênero Leishmania, sendo transmitidas pela picada de fêmeas de insetos conhecidos como flebotomíneos, apresentando-se sob duas formas clínicas: Leishmaniose tegumentar americana e Leishmaniose visceral. O diagnóstico de certeza é realizado por demonstração do parasito podendo ser feita através de inoculação de fragmentos de lesão ou outro material clínico em meios de cultura específicos. Um dos inconvenientes desse método é a possibilidade de contaminação da cultura, o que inviabiliza o exame Para evitar essa contaminação alguns cuidados são tomados como a utilização de antibióticos (benzilpenicilina e estreptomicina) e antifúngico (flucitosina) que são adicionados à solução de coleta e a utilização de antibióticos no meio de cultura. O conhecimento da estabilidadee as concentrações ideais dos compostos utilizados são fatores importantes a serem considerados, pois podem determinar o sucesso do diagnóstico. Neste estudo avaliamos a estabilidade e o efeito dessas substâncias no crescimento do parasito in vitro. Para análise da estabilidade foi primeiramente desenvolvido um método para separação das substâncias de interesse por Cromatografia líquida de alta eficiência que se mostrou muito eficazpara a separação, os resultados desta análise mostraram que o antibiótico benzilpenicilina sofreu cerca de 10% de degradação no prazo de 4 dias a 4 ºC e cerca de 20% de degradação durante 24 horas a temperatura ambiente enquanto a concentração de estreptomicina permaneceu praticamente inalterada sob as mesmas condições. Esses resultados mostram a importância da utilização correta dessas soluções a fim de evitar perda da sua atividade. Com relação à inibição do crescimento do parasito in vitro, as concentrações de 1000, 500 U/mL de benzilpenicilina e 1000, 500 μg/mL de estreptomicina e flucitosina assim como 200 U/mL benzilpenicilina + 200 μg/mL estreptomicina mostraram inibição significativa do crescimento, mostrando que as concentrações de benzilpenicilina e estreptomicina na composição de culturas de Leishmania sp.devem ser abaixo de 200 U/mL e 200 μg/mL, respectivamente. |
publishDate |
2009 |
dc.date.issued.fl_str_mv |
2009 |
dc.date.accessioned.fl_str_mv |
2016-05-11T12:50:34Z |
dc.date.available.fl_str_mv |
2016-05-11T12:50:34Z |
dc.type.status.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/bachelorThesis |
format |
bachelorThesis |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.citation.fl_str_mv |
MELLO, C. X. Otimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania sp. 2009. 38 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Especialização em Controle da Qualidade em Produtos, Ambientes e Serviços Vinculados à Vigilância Sanitária) - Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2009. |
dc.identifier.uri.fl_str_mv |
https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/14185 |
identifier_str_mv |
MELLO, C. X. Otimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania sp. 2009. 38 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Especialização em Controle da Qualidade em Produtos, Ambientes e Serviços Vinculados à Vigilância Sanitária) - Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2009. |
url |
https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/14185 |
dc.language.iso.fl_str_mv |
por |
language |
por |
dc.rights.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ) instacron:FIOCRUZ |
instname_str |
Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ) |
instacron_str |
FIOCRUZ |
institution |
FIOCRUZ |
reponame_str |
Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) |
collection |
Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) |
bitstream.url.fl_str_mv |
https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/14185/1/10.pdf https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/14185/2/license.txt https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/14185/3/10.pdf.txt |
bitstream.checksum.fl_str_mv |
66709ed4be2fdee0a0c26b3771937feb 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 ad242457f818db1219a362e560e4647f |
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 |
repository.name.fl_str_mv |
Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ) |
repository.mail.fl_str_mv |
repositorio.arca@fiocruz.br |
_version_ |
1798325043991674880 |