Caracterização do cluster de glutationa-S- transferases da classe epsilon de Aedes aegypti e o seu papel na resistência aos inseticidas químicos

• Autor(a) principal: Helvecio, Elisama
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
• Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/60868
• topic: Mosquitos vetores; Enzimas; Cinética; Diversidade genética; Transcriptoma; Mosquitoes vectors; Enzymes; Kinetics; Genetical diversity; Transcriptome; Vectores de mosquitos; enzimas; Cinética; Diversidad genética; Transcriptoma; Vecteurs de moustiques; Enzymes; Cinétique; Diversité génétique; Transcriptome

As Glutationa S-transferases (GSTs), especialmente das classes Delta e Epsilon, atuam no metabolismo de inseticidas que são usados para o controle de populações de insetos, porém o seu papel na resistência ao temephos não está totalmente elucidado. Assim, foram objetivos deste trabalho estudar o cluster de GSTs da classe Epsilon em populações de Aedes aegypti com diferentes perfis de susceptibilidade ao temephos. Para tanto, foi estudado o papel molecular da GSTE2 na resistência ao temephos em RecR, com a investigação de quatro polimorfismos de aminoácidos exclusivos em RecR e sua influência na atividade enzimática da GSTE2. Foram realizados ensaios de inibição da atividade enzimática utilizando o temephos como inibidor e parâmetros cinéticos foram avaliados. A GSTE2 da RecR apresentou maior capacidade de metabolização do substrato CDNB e o temephos se mostrou um inibidor fraco da GSTE2. Também foi observado que as mutações atuam em conjunto e são responsáveis pelas mudanças significativas nos parâmetros catalíticos em RecR. A diversidade genética do cluster Epsilon foi avaliada em populações naturais de Ae. aegypti. As populações continentais do mosquito, que sofreram pressão de seleção do temephos foram monomórficas para o cluster Epsilon. Nas populações insulares, com ausência de pressão de seleção ao inseticida, os genes do cluster foram polimórficos. Por último, foram investigados os perfis transcriptômicos de larvas de uma linhagem resistente (RecR) comparado a uma colônia susceptível (RecL). A análise do transcriptoma mapeou 6.084 genes, sendo 202 induzidos e 106 reprimidos na RecR. Em indução foram identificados genes que estão associados ao metabolismo de lipídeos, carboidratos e xenobióticos. Em repressão foram identificadas moléculas envolvidas com a síntese de proteínas, imunidade e apoptose. Pode-se concluir que o cluster Epsilon provavelmente está sendo selecionado em campo, sugerindo que ele exerce relevante papel na sobrevivência da espécie.