Novas perspectivas de fármacos com propriedade tripanocida: estudos biológicos de compostos heterocíclicos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Higino, Taciana Mirely Maciel
Data de Publicação: 2012
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/60898
Resumo: Os compostos mesoiônicos são moléculas não aromáticas planas, pertencentes à classe das betaínas, os quais apresentam um grande número de atividades biológicas incluindo antibacteriana, anti-inflamatória e anti-protozoária. A despeito do potencial quimoterápico destes compostos, estudos destas moléculas contra o Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença de Chagas, ainda são incipientes. No presente trabalho nós avaliamos as atividades tripanocida e citotóxica dos mesoiônicos MECPYR-04, MEC-02, MC-01 e MC-02. Nossos resultados demonstraram que todos os compostos inibiram o crescimento de formas epimastigotas e causaram decréscimo da viabilidade celular em tripomastigotas. Estes compostos também foram efetivos em inibir a infecção de macrófagos e diminuir a viabilidade das formas amastigotas. MECPYR-04 foi o mais efetivo contra todas as formas evolutivas do parasito, entretanto também apresentou alta toxicidade para células de mamíferos, enquanto MEC02, MC-01 e MC-02 apresentaram baixa toxidade em células de mamíferos e alta seletividade para os parasitas. Apenas MEC-02 e MECPYR-04 aumentaram a produção de NO em macrófagos quando comparados com o controle, sugerindo um potencial imunomodulatório destes compostos. Com objetivo de analisar os efeitos de MEC02, MC-01 e MC-02 sobre a integridade da membrana plasmática e o potencial de membrana mitocondrial, células tratadas e controles foram submetidas a marcação com iodeto de propidio e rodamina 123 respectivamente, e analisadas por microscopia confocal. Nenhuma diferença significativa na integridade da membrana foi observada em células tratadas. Estes achados foram confirmados pela microscopia eletrônica de varredura. Apenas MC-01 e MC02 foram capazes de induzir alterações no potencial de membrana mitocondrial como observado por microscopia confocal e citometria de fluxo. Análise ultraestrutural revelou apenas pequenas alterações em formas tripomastigotas tratadas com MEC-02. Por outro lado, células tratadas com MC-01 e MC-02 apresentaram drástico inchaço da mitocôndria com desorganização ou perda do material da matriz mitocondrial, sugerindo que esta estrutura seja o alvo de ação de MC-01 e MC-02. Todos estes resultados apontam MEC-02, MC-01 e MC02 como candidatos a fármacos contra a doença de Chagas .
id CRUZ_96b9a716d46a7cdd9602f052b1821f79
oai_identifier_str oai:www.arca.fiocruz.br:icict/60898
network_acronym_str CRUZ
network_name_str Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
repository_id_str 2135
spelling Higino, Taciana Mirely MacielFigueiredo, Regina Célia Bressan Queiroz dePereira, Valéria Rêgo AlvesMelo, Janaína Viana deFigueiredo, Regina Celia Bressan Queiroz de2023-10-25T12:43:56Z2023-10-25T12:43:56Z2012HIGINO, Taciana Mirely Maciel. Novas perspectivas de fármacos com propriedade tripanocida: estudos biológicos de compostos heterocíclicos. 2012. 84 pilus. Dissertação, (mestrado)-Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães, Fundação Oswaldo Cruz, Recife, 2012.https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/60898Os compostos mesoiônicos são moléculas não aromáticas planas, pertencentes à classe das betaínas, os quais apresentam um grande número de atividades biológicas incluindo antibacteriana, anti-inflamatória e anti-protozoária. A despeito do potencial quimoterápico destes compostos, estudos destas moléculas contra o Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença de Chagas, ainda são incipientes. No presente trabalho nós avaliamos as atividades tripanocida e citotóxica dos mesoiônicos MECPYR-04, MEC-02, MC-01 e MC-02. Nossos resultados demonstraram que todos os compostos inibiram o crescimento de formas epimastigotas e causaram decréscimo da viabilidade celular em tripomastigotas. Estes compostos também foram efetivos em inibir a infecção de macrófagos e diminuir a viabilidade das formas amastigotas. MECPYR-04 foi o mais efetivo contra todas as formas evolutivas do parasito, entretanto também apresentou alta toxicidade para células de mamíferos, enquanto MEC02, MC-01 e MC-02 apresentaram baixa toxidade em células de mamíferos e alta seletividade para os parasitas. Apenas MEC-02 e MECPYR-04 aumentaram a produção de NO em macrófagos quando comparados com o controle, sugerindo um potencial imunomodulatório destes compostos. Com objetivo de analisar os efeitos de MEC02, MC-01 e MC-02 sobre a integridade da membrana plasmática e o potencial de membrana mitocondrial, células tratadas e controles foram submetidas a marcação com iodeto de propidio e rodamina 123 respectivamente, e analisadas por microscopia confocal. Nenhuma diferença significativa na integridade da membrana foi observada em células tratadas. Estes achados foram confirmados pela microscopia eletrônica de varredura. Apenas MC-01 e MC02 foram capazes de induzir alterações no potencial de membrana mitocondrial como observado por microscopia confocal e citometria de fluxo. Análise ultraestrutural revelou apenas pequenas alterações em formas tripomastigotas tratadas com MEC-02. Por outro lado, células tratadas com MC-01 e MC-02 apresentaram drástico inchaço da mitocôndria com desorganização ou perda do material da matriz mitocondrial, sugerindo que esta estrutura seja o alvo de ação de MC-01 e MC-02. Todos estes resultados apontam MEC-02, MC-01 e MC02 como candidatos a fármacos contra a doença de Chagas .Mesoionic compounds are not aromatic planar heterocyclic betaines which present a number of biological activities including antibacterial, anti-inflammatory and antiprotozan. Despite the chemotherapic potential of these compounds, studies on these molecules against Trypanosoma cruzi are still incipient. In the present work, we evaluated the tripanocidal and cytotoxic activities of the mesoionic compounds MECPYR-04, MEC-02, MC-01 and MC-02. Our results showed that all compounds inhibited the growth of epimastigote and caused considerable loss of trypomastigote forms viability. These compound were also effective in inhibit the macrophage infection and decrease amastigote viability. MECPYR-04 was the most effective against all evolutive forms of parasite, but it was very toxic to mammalian cells, whereas MEC-02, MC-01 and MC-02 presented low toxicity to mammal cells and high selectivity against the parasites. Only MEC-02 and MECPYR-04 increased the production of NO as compared with control cells suggesting an immunomodulatory potential of these compounds. Aiming to evaluate the effects of MEC-02, MC-01 and MC-02 on membrane integrity and mitochondrial membrane potential treated and untreated cells were submitted propidium iodide and Rhodamin 123 staining, respectively and analyzed by confocal microscopy. Our results showed no significant change in the plasma membrane integrity in treated cells. This finding was confirmed by Scanning electron microscopy. Only MC-01 e MC-02 were able to induce changes in the mitochondrial membrane potential as observed by confocal microscopy and flow cytometry. Ultrastructural analysis revealed only slight morphological changes in trypomastigotes treated with MEC-02 as compared with untreated cells. On the other hand, cells treated with MC-01 and MC-02 presented drastic swelling of mitochondrion with disorganization or loss of mitochondrial matrix, suggesting that mitochondrion is a target for MC-01 and MC-02. Taken together our results point MEC-02, MC-01 and MC-02 as drug candidates against Chagas disease .Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil.Centro de Tecnologias Estratégicas do Nordeste.porBetaína - toxicidadeBetaína - farmacologiaTrypanosoma cruzi - ultraestruturaTrypanosoma cruzi – efeitos de drogasBiologia celularBetaine - toxicityBetaine - pharmacologyTrypanosoma cruzi - ultrastructureTrypanosoma cruzi – drug effectsCell biologyBetaína - toxicidadBetaína - farmacologíaTrypanosoma cruzi - ultraestructuraTrypanosoma cruzi – efectos de las drogasBiología CelularBétaïne - toxicitéBétaïne - pharmacologieTrypanosoma cruzi - ultrastructureTrypanosoma cruzi – effets des médicamentsBiologie cellulaireBetaínaToxBetaínaFarmacolTrypanosoma CruziUltraestTrypanosoma CruziEf DrogasTrypanosoma CruziCitolTrypanosoma CruziCrescDoença de ChagasQuimioterAntiparasitáriosNovas perspectivas de fármacos com propriedade tripanocida: estudos biológicos de compostos heterocíclicosNovel perspectives of drugs with tripanocidal properties: Biological study of heterocyclic compoundsinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2012-03-09Departamento de Saúde PúblicaFundação Oswaldo CruzMestrado AcadêmicoRecifePrograma de Pós-Graduação em Saúde Públicainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/60898/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALtaciana_higino_iam_mest_2012.pdftaciana_higino_iam_mest_2012.pdfapplication/pdf2279467https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/60898/3/taciana_higino_iam_mest_2012.pdf1afa2871b930df3b676c06bc7ef54628MD53icict/608982023-10-25 09:43:57.462oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352023-10-25T12:43:57Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false
dc.title.en_US.fl_str_mv Novas perspectivas de fármacos com propriedade tripanocida: estudos biológicos de compostos heterocíclicos
dc.title.alternative.en_US.fl_str_mv Novel perspectives of drugs with tripanocidal properties: Biological study of heterocyclic compounds
title Novas perspectivas de fármacos com propriedade tripanocida: estudos biológicos de compostos heterocíclicos
spellingShingle Novas perspectivas de fármacos com propriedade tripanocida: estudos biológicos de compostos heterocíclicos
Higino, Taciana Mirely Maciel
Betaína - toxicidade
Betaína - farmacologia
Trypanosoma cruzi - ultraestrutura
Trypanosoma cruzi – efeitos de drogas
Biologia celular
Betaine - toxicity
Betaine - pharmacology
Trypanosoma cruzi - ultrastructure
Trypanosoma cruzi – drug effects
Cell biology
Betaína - toxicidad
Betaína - farmacología
Trypanosoma cruzi - ultraestructura
Trypanosoma cruzi – efectos de las drogas
Biología Celular
Bétaïne - toxicité
Bétaïne - pharmacologie
Trypanosoma cruzi - ultrastructure
Trypanosoma cruzi – effets des médicaments
Biologie cellulaire
BetaínaTox
BetaínaFarmacol
Trypanosoma CruziUltraest
Trypanosoma CruziEf Drogas
Trypanosoma CruziCitol
Trypanosoma CruziCresc
Doença de ChagasQuimioter
Antiparasitários
title_short Novas perspectivas de fármacos com propriedade tripanocida: estudos biológicos de compostos heterocíclicos
title_full Novas perspectivas de fármacos com propriedade tripanocida: estudos biológicos de compostos heterocíclicos
title_fullStr Novas perspectivas de fármacos com propriedade tripanocida: estudos biológicos de compostos heterocíclicos
title_full_unstemmed Novas perspectivas de fármacos com propriedade tripanocida: estudos biológicos de compostos heterocíclicos
title_sort Novas perspectivas de fármacos com propriedade tripanocida: estudos biológicos de compostos heterocíclicos
author Higino, Taciana Mirely Maciel
author_facet Higino, Taciana Mirely Maciel
author_role author
dc.contributor.member.none.fl_str_mv Figueiredo, Regina Célia Bressan Queiroz de
Pereira, Valéria Rêgo Alves
Melo, Janaína Viana de
dc.contributor.author.fl_str_mv Higino, Taciana Mirely Maciel
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Figueiredo, Regina Celia Bressan Queiroz de
contributor_str_mv Figueiredo, Regina Celia Bressan Queiroz de
dc.subject.other.en_US.fl_str_mv Betaína - toxicidade
Betaína - farmacologia
Trypanosoma cruzi - ultraestrutura
Trypanosoma cruzi – efeitos de drogas
Biologia celular
topic Betaína - toxicidade
Betaína - farmacologia
Trypanosoma cruzi - ultraestrutura
Trypanosoma cruzi – efeitos de drogas
Biologia celular
Betaine - toxicity
Betaine - pharmacology
Trypanosoma cruzi - ultrastructure
Trypanosoma cruzi – drug effects
Cell biology
Betaína - toxicidad
Betaína - farmacología
Trypanosoma cruzi - ultraestructura
Trypanosoma cruzi – efectos de las drogas
Biología Celular
Bétaïne - toxicité
Bétaïne - pharmacologie
Trypanosoma cruzi - ultrastructure
Trypanosoma cruzi – effets des médicaments
Biologie cellulaire
BetaínaTox
BetaínaFarmacol
Trypanosoma CruziUltraest
Trypanosoma CruziEf Drogas
Trypanosoma CruziCitol
Trypanosoma CruziCresc
Doença de ChagasQuimioter
Antiparasitários
dc.subject.en.en_US.fl_str_mv Betaine - toxicity
Betaine - pharmacology
Trypanosoma cruzi - ultrastructure
Trypanosoma cruzi – drug effects
Cell biology
dc.subject.es.en_US.fl_str_mv Betaína - toxicidad
Betaína - farmacología
Trypanosoma cruzi - ultraestructura
Trypanosoma cruzi – efectos de las drogas
Biología Celular
dc.subject.fr.en_US.fl_str_mv Bétaïne - toxicité
Bétaïne - pharmacologie
Trypanosoma cruzi - ultrastructure
Trypanosoma cruzi – effets des médicaments
Biologie cellulaire
dc.subject.decs.en_US.fl_str_mv BetaínaTox
BetaínaFarmacol
Trypanosoma CruziUltraest
Trypanosoma CruziEf Drogas
Trypanosoma CruziCitol
Trypanosoma CruziCresc
Doença de ChagasQuimioter
Antiparasitários
description Os compostos mesoiônicos são moléculas não aromáticas planas, pertencentes à classe das betaínas, os quais apresentam um grande número de atividades biológicas incluindo antibacteriana, anti-inflamatória e anti-protozoária. A despeito do potencial quimoterápico destes compostos, estudos destas moléculas contra o Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença de Chagas, ainda são incipientes. No presente trabalho nós avaliamos as atividades tripanocida e citotóxica dos mesoiônicos MECPYR-04, MEC-02, MC-01 e MC-02. Nossos resultados demonstraram que todos os compostos inibiram o crescimento de formas epimastigotas e causaram decréscimo da viabilidade celular em tripomastigotas. Estes compostos também foram efetivos em inibir a infecção de macrófagos e diminuir a viabilidade das formas amastigotas. MECPYR-04 foi o mais efetivo contra todas as formas evolutivas do parasito, entretanto também apresentou alta toxicidade para células de mamíferos, enquanto MEC02, MC-01 e MC-02 apresentaram baixa toxidade em células de mamíferos e alta seletividade para os parasitas. Apenas MEC-02 e MECPYR-04 aumentaram a produção de NO em macrófagos quando comparados com o controle, sugerindo um potencial imunomodulatório destes compostos. Com objetivo de analisar os efeitos de MEC02, MC-01 e MC-02 sobre a integridade da membrana plasmática e o potencial de membrana mitocondrial, células tratadas e controles foram submetidas a marcação com iodeto de propidio e rodamina 123 respectivamente, e analisadas por microscopia confocal. Nenhuma diferença significativa na integridade da membrana foi observada em células tratadas. Estes achados foram confirmados pela microscopia eletrônica de varredura. Apenas MC-01 e MC02 foram capazes de induzir alterações no potencial de membrana mitocondrial como observado por microscopia confocal e citometria de fluxo. Análise ultraestrutural revelou apenas pequenas alterações em formas tripomastigotas tratadas com MEC-02. Por outro lado, células tratadas com MC-01 e MC-02 apresentaram drástico inchaço da mitocôndria com desorganização ou perda do material da matriz mitocondrial, sugerindo que esta estrutura seja o alvo de ação de MC-01 e MC-02. Todos estes resultados apontam MEC-02, MC-01 e MC02 como candidatos a fármacos contra a doença de Chagas .
publishDate 2012
dc.date.issued.fl_str_mv 2012
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2023-10-25T12:43:56Z
dc.date.available.fl_str_mv 2023-10-25T12:43:56Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.citation.fl_str_mv HIGINO, Taciana Mirely Maciel. Novas perspectivas de fármacos com propriedade tripanocida: estudos biológicos de compostos heterocíclicos. 2012. 84 pilus. Dissertação, (mestrado)-Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães, Fundação Oswaldo Cruz, Recife, 2012.
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/60898
identifier_str_mv HIGINO, Taciana Mirely Maciel. Novas perspectivas de fármacos com propriedade tripanocida: estudos biológicos de compostos heterocíclicos. 2012. 84 pilus. Dissertação, (mestrado)-Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães, Fundação Oswaldo Cruz, Recife, 2012.
url https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/60898
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)
instacron:FIOCRUZ
instname_str Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)
instacron_str FIOCRUZ
institution FIOCRUZ
reponame_str Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
collection Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
bitstream.url.fl_str_mv https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/60898/1/license.txt
https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/60898/3/taciana_higino_iam_mest_2012.pdf
bitstream.checksum.fl_str_mv 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33
1afa2871b930df3b676c06bc7ef54628
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)
repository.mail.fl_str_mv repositorio.arca@fiocruz.br
_version_ 1813008844218957824