Estabelecimento de uma RT-qPCR multiplex, capaz de realizar o diagnóstico, diferencial, dos arbovírus Chikungunya X Mayaro

• Autor(a) principal: Celerino, Tarciana Fernanda da Silva
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
• Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/59898
• topic: Alphavirus; Febre de Chikungunya; Infecções por alphavirus; Reação em cadeia da polimerase; Técnicas de diagnóstico molecular; Alphavirus; chikungunya fever; alphavirus infections; polymerase chain reaction; Molecular diagnostic techniques; Alfavirus; fiebre chikungunya; infecciones por alfavirus; reacción en cadena de la polimerasa; Técnicas de diagnóstico molecular; Alphavirus; fièvre chikungunya; infections à alphavirus; réaction en chaîne par polymérase; Techniques de diagnostic moléculaire; Reação em Cadeia da Polimerase via Transcriptase Reversa; Reação em Cadeia da Polimerase Multiplex; Infecções por Alphavirus; Febre de Chikungunya; Alphavirus; Vírus Chikungunya; Sensibilidade e Especificidade; Diagnóstico Diferencial; Técnicas de Diagnóstico Molecular; Limite de Detecção

As arboviroses constituem um importante problema de saúde pública mundial, responsáveis por milhares de infecções anualmente. O Brasil, assim como outros países de clima tropical, apresenta condições favoráveis para a manutenção e disseminação de seus agentes infecciosos, devido a sua vasta diversidade ambiental e animal. Esses fatores também contribuem para a facilidade de adaptação de seus vetores, alguns destes capazes de transmitir mais de um patógeno. A similaridade clínica entre as infecções, principalmente quando ocasionadas por arbovírus pertencentes a mesma família, representa um grande desafio para os sistemas de saúde. Os vírus Chikungunya (CHIKV) e Mayaro (MAYV), ambos Alphavirus, da família Togaviridae, possuem características clínicas relevantes, sendo capazes de deixar o indivíduo portador da infecção debilitado por meses e até anos, muitas vezes incapacitados de desenvolverem sequer as suas atividades diárias normalmente, devido a artralgia severa, gerando impactos econômicos significativos. Por estarem sintomatologicamente relacionados, estes arbovírus são frequentemente confundidos entre si, havendo a necessidade de diagnósticos diferenciais entre eles. Este trabalho teve por objetivo, estabelecer um protocolo de diagnóstico molecular (através da técnica de RT-qPCR) para diferenciar CHIKV e MAYV em uma única reação, visando permitir o diagnóstico diferencial dessas doenças para os serviços de saúde. O ensaio duplex para o diagnóstico diferencial do CHIKV X MAYV demonstrou uma boa performance para o diagnóstico do CHIKV, ao ser comparado com o ensaio simples de CHIKV, já estabelecido. O limite de detecção apresentou resultados similares aos encontrados na literatura, com parâmetros de eficiência ainda superiores. Por outro lado, para detecção do MAYV, o ensaio não demonstrou eficiência aceitável. Ajustes precisam ser realizados, buscando a melhor performance. O diagnóstico preciso destas infecções tem ainda a finalidade de melhorar a qualidade das notificações, evitando subnotificação ou notificações errôneas, servindo inclusive de suporte para inquéritos epidemiológicos.