Aperfeiçoamento de um teste imunoenzimático para o diagnóstico da hepatite A

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Lima, Maria Amélia das Virgens de
Data de Publicação: 2006
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/60614
Resumo: A hepatite A constitui um problema de saúde pública, principalmente nas cidades em desenvolvimento, onde o número de jovens e adultos susceptíveis à infecção é grande, portanto emerge como uma nova doença com alto potencial em causar epidemias. A hepatite A é transmitida através de água e alimentos contaminados. O diagnóstico rápido, específico e seguro, utilizando um teste acessível é extremamente importante para o controle de surtos da doença. Neste trabalho, foi aperfeiçoado um teste imunoenzimático (ELISA) para detecção de anticorpos da classe IgM contra o vírus da hepatite A (HAV), desenvolvido na FIOCRUZ, o qual utiliza misturas de soros humanos convalescentes conjugados à peroxidase e antígeno viral, altamente instável, produzido em cultura de células. O desenho original do teste ELISA IgM ANTI-HAV CAPTURA DIRETO/ IOC foi modificado para um ELISA de captura indireto pela introdução de um conjugado anti-IgG humana comercial e o uso de antígeno viral liofilizado. Foi também desenvolvido um simples e inteiramente novo ELISA direto que utiliza uma proteína recombinante, produzida em Escherichia coli, tendo como vantagens a estabilidade da proteína recombinante e principalmente a não utilização da mistura de soros humanos anti-HAV, como insumo. O novo ELISA IgM ANTI-HAV – PROTEÍNA RECOMBINANTE/EXPERIMENTAL mostrou ser promissor e a utilização da proteína recombinante otimizou o ELISA para detecção anticorpos anti-HAV IgM.
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Neste trabalho, foi aperfeiçoado um teste imunoenzimático (ELISA) para detecção de anticorpos da classe IgM contra o vírus da hepatite A (HAV), desenvolvido na FIOCRUZ, o qual utiliza misturas de soros humanos convalescentes conjugados à peroxidase e antígeno viral, altamente instável, produzido em cultura de células. O desenho original do teste ELISA IgM ANTI-HAV CAPTURA DIRETO/ IOC foi modificado para um ELISA de captura indireto pela introdução de um conjugado anti-IgG humana comercial e o uso de antígeno viral liofilizado. Foi também desenvolvido um simples e inteiramente novo ELISA direto que utiliza uma proteína recombinante, produzida em Escherichia coli, tendo como vantagens a estabilidade da proteína recombinante e principalmente a não utilização da mistura de soros humanos anti-HAV, como insumo. O novo ELISA IgM ANTI-HAV – PROTEÍNA RECOMBINANTE/EXPERIMENTAL mostrou ser promissor e a utilização da proteína recombinante otimizou o ELISA para detecção anticorpos anti-HAV IgM.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.porHAVELISA Aperfeiçoamento de um teste imunoenzimático para o diagnóstico da hepatite Ainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2006Universidade Federal do Rio de Janeiro. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Mestrado AcadêmicoRio de Janeiro, RJ.Programa de Pós-graduação em Ciências Biológicas (Microbiologia), Universidade Federal do Rio de Janeiro – UFRJinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/60614/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALve_maria_amélia_das_virgens_de_lima_biomanguinhos_2006.pdfapplication/pdf630596https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/60614/2/ve_maria_am%c3%a9lia_das_virgens_de_lima_biomanguinhos_2006.pdf99b9341af7537d717d286b4bad66ff44MD52icict/606142023-09-29 13:43:34.807oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352023-09-29T16:43:34Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false
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