Identificação e caracterização morfológica de Tritrichomonas muris (Grassi, 1879) (Parabasalia: Tritrichomonadidae) em hamster golden (Mesocricetus auratus) (waterhouse, 1839) para controle parasitológico de instalações de animais de laboratório

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Santos, Incerlande Soares dos
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/55204
Resumo: Neste trabalho foram realizadas técnicas de identificação, com base na morfologia e foi avaliado o ciclo de vida de Tritrichomonas muris em hamsters golden (Mesocricetus auratus), procedentes do ICTB-Fiocruz. Para a identificação do protozoário, foram realizados exames parasitológicos por método direto da mucosa intestinal, além dos métodos de Willis-Mollay, Dennis Stone & Swanson e exame direto a fresco a partir das fezes formadas. A caracterização morfológica foi efetuada por análise morfotintorial por meio dos métodos de coloração de Panótico rápido e Giemsa, além de análises ultraestruturais de microscopia eletrônica de transmissão (MET) e varredura (MEV). Para avaliar o ciclo de vida deste agente etiológico, foi feito cultivo in vitro dos protozoários em dez meios sintéticos. A partir destes, foram detectados os meios que mais se adaptaram em termos de multiplicação, sendo quatro destes selecionados para delinear uma curva de crescimento e, assim, avaliar efetivamente a evolução da sua morfologia e o tempo de sua sobrevivência no meio selecionado. Um estudo retrospectivo feito entre 2005 e 2018 das parasitoses desta criação revelou elevada prevalência de T. muris em todos os anos de análise. A elevada carga parasitária de T. muris acarretou sinais clínicos nos animais acometidos, indicando que o mesmo pode ser patogênico e não comensal. Os métodos parasitológicos feitos a partir da mucosa intestinal e das fezes formadas mostraram peculiaridades inerentes do protozoário que se manifestaram de acordo com as suas diferentes fases do ciclo de vida. Quando realizado exame direto a fresco no interior da mucosa intestinal, identificou-se a forma trofozoítica, enquanto que nas fezes formadas, observou-se a forma de pseudocisto. Todos os métodos de identificação e de caracterização morfológica demonstraram a presença do protozoário, sendo possível averiguar as técnicas mais apropriadas de avaliação de T. muris. O exame direto é melhor método parasitológicos, enquanto Willis-Mollay uma técnica ineficaz de identificação de T. muris. Em relação à análise morfotintorial, verificou-se que ambas as técnicas de coloração adotadas (Panótico rápido e Giemsa) permitem uma boa visualização do protozoário. As análises processadas por MET e MEV demonstraram semelhanças entre as ultraestruturas de T. foetus e T. muris. No tocante à curva de crescimento de T. muris feita a partir de meios sintéticos, considerou-se o Diamond’s como o meio “padrão-ouro” para o crescimento do protozoário, sendo, contudo, necessário atentar-se ao tempo das análises, desde a coleta das amostras até o seu processamento, devido ao curto período de sobrevivência do protozoário (6 horas). Os resultados obtidos permitiram aprimorar o conhecimento de T. muris, viabilizando implantar técnicas apropriadas à sua identificação e caracterização morfológica, direcionando, assim, manejos técnicos com os animais e contribuindo sobremaneira com a comunidade científica mundial
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Dissertação (Mestrado Profissional em Ciência em Animais de Laboratório) - Instituto de Ciência e Tecnologia em Biomodelos, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2019.https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/55204Neste trabalho foram realizadas técnicas de identificação, com base na morfologia e foi avaliado o ciclo de vida de Tritrichomonas muris em hamsters golden (Mesocricetus auratus), procedentes do ICTB-Fiocruz. Para a identificação do protozoário, foram realizados exames parasitológicos por método direto da mucosa intestinal, além dos métodos de Willis-Mollay, Dennis Stone & Swanson e exame direto a fresco a partir das fezes formadas. A caracterização morfológica foi efetuada por análise morfotintorial por meio dos métodos de coloração de Panótico rápido e Giemsa, além de análises ultraestruturais de microscopia eletrônica de transmissão (MET) e varredura (MEV). 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No tocante à curva de crescimento de T. muris feita a partir de meios sintéticos, considerou-se o Diamond’s como o meio “padrão-ouro” para o crescimento do protozoário, sendo, contudo, necessário atentar-se ao tempo das análises, desde a coleta das amostras até o seu processamento, devido ao curto período de sobrevivência do protozoário (6 horas). Os resultados obtidos permitiram aprimorar o conhecimento de T. muris, viabilizando implantar técnicas apropriadas à sua identificação e caracterização morfológica, direcionando, assim, manejos técnicos com os animais e contribuindo sobremaneira com a comunidade científica mundialIn this work, identification techniques based on the morphology of trophozoites and the life cycle of Tritrichomonas muris on golden hamsters (Mesocricetus auratus) from the ICTB-Fiocruz were performed. For the identification of the protozoan, parasitological examinations by direct method of the intestinal mucosa were performed, besides the coprological methods of Willis-Mollay, Dennis Stone & Swanson and the direct fresh examination from the feces samples. The morphological characterization was performed by morpho-staining methods analysis through Fast Panotic and Giemsa, as well as ultrastructural analyzes of transmission electron microscopy (TEM) and scanning electron microscopy (SEM). To evaluate the life cycle of this etiological agent, in vitro culture was carried out in ten culture media. From these, the means that most favored the multiplication process were indicated, four of them being selected to delineate a growth curve and, thus, to effectively evaluate the evolution of its morphology and the time of its survival in the selected medium. A retrospective study done between 2005 and 2018 of the parasitoses of this breeding revealed a high prevalence of T. muris in all the years of analysis. The high parasitic load of this etiological agent caused clinical changes in the affected animals, indicating that it may be pathogenic and not commensal. The parasitological methods made from the intestinal mucosa and the feces formed indicated peculiarities inherent to this protozoan that manifested themselves according to their different phases of the life cycle. When a fresh direct examination was performed from the inside of the intestinal mucosa, the trophozoite form was identified, while in the formed stools the pseudocyst form was observed. All methods of identification and morphological characterization have demonstrated the presence of the protozoan, and it is possible to ascertain the most appropriate techniques for the evaluation of T. muris. Direct examination is the best parasitological method, while Willis-Mollay is an ineffective technique for T. muris identification. Regarding the morphotintorial analysis, it was found that both adopted staining techniques (Panotic Rapid and Giemsa) allow a good visualization of the protozoan. The analyzes processed by TEM and SEM showed similarities between the ultrastructures of T. fetus and T. muris. With respect to the growth curve of T. muris made from synthetic media, Diamond's was considered the "gold standard" medium for protozoan growth, however, it is necessary to take into account the time of the analyzes, since the collection of the samples until their processing, due to the short period of survival of the protozoan (6 hours). The observed results allowed to improve the knowledge of T. muris, making it possible to implant diagnostic techniques appropriate to its identification and morphological characterization, thus directing technical management with the animals and greatly contributing to the world scientific communityFundação Oswaldo Cruz. Instituto de Ciência e Tecnologia em Biomodelos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.porTritrichomonas murisHamster goldenMesocricetus auratusIdentificação de Tritrichomonas murisMorfologiaTritrichomonas murisHamster goldenMesocricetus auratusIdentification of Tritrichomonas murisMorphologyTritrichomonasMesocricetusParasitologiaIdentificação e caracterização morfológica de Tritrichomonas muris (Grassi, 1879) (Parabasalia: Tritrichomonadidae) em hamster golden (Mesocricetus auratus) (waterhouse, 1839) para controle parasitológico de instalações de animais de laboratórioinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2019Instituto de Ciência e Tecnologia em BiomodelosFundação Oswaldo CruzMestrado ProfissionalRio de JaneiroPrograma de Pós-Graduação em Ciência em Animais de Laboratórioinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/55204/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALincerlande_santos_ictb_mest_2019.pdfapplication/pdf3035762https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/55204/2/incerlande_santos_ictb_mest_2019.pdf3c948cd28d33f52d67f95f0f04dcdd53MD52icict/552042022-10-19 15:44:22.638oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352022-10-19T18:44:22Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false
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