Protocolo de purificación en dos etapas de fosfolipasas A2 a partir de la anémona marina Condylactis gigantea

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Bourzac, Frenkel Guisado
Data de Publicação: 2017
Outros Autores: Sol, Dolores Lázara Romero Del, Seijas, José Manuel Guisán, Bacerio, Jorge González, Brito, Joaquín Díaz, Soares, Andreimar Martins, Martínez, Alberto del Monte
Tipo de documento: Artigo
Idioma: eng
Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/33474
Resumo: El veneno de los celenterados marinos constituyen mezclas complejas de varios componentes, muchos de naturaleza proteica, y para los cuales se ha descrito la actividad fosfolipásica A2. El objetivo de la presente investigación fue purificar las fosfolipasas A2 (FLA2) procedentes de la anémona marina Condylactis gigantea a partir de un protocolo de dos etapas para su posterior caracterización. Se muestra la purificación de FLA2 en un soporte cromatográfico de afinidad con fosfatidilcolina de huevo inmovilizada covalentemente para la purificación de fosfolipasas A2, a los que se les comprobó cualitativamente la actividad fosfolipásica A2 por cromatografía en placa (TLC) utilizando sustrato marcado con fluorescencia. Dicho soporte cromatográfico permite que en un protocolo de purificación de solamente dos pasos se obtengan tres componentes proteicos de pesos moleculares entre 18000 y 14000, con al menos un componente que posee actividad fosfolipásica A2.
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spelling Bourzac, Frenkel GuisadoSol, Dolores Lázara Romero DelSeijas, José Manuel GuisánBacerio, Jorge GonzálezBrito, Joaquín DíazSoares, Andreimar MartinsMartínez, Alberto del Monte2019-06-12T20:08:42Z2019-06-12T20:08:42Z2017BOURZAC, Frenkel Guisado et al. Protocolo de purificación en dos etapas de fosfolipasas A2 a partir de la anémona marina Condylactis gigantea. Revista Cubana Química, v. 29, n. 1, p. 133-149, 2017.0258-5995https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/334742224-5421engRevista Cubana de QuímicaProtocolo de purificación en dos etapas de fosfolipasas A2 a partir de la anémona marina Condylactis giganteaA Two-Step Purification Procedure of Phospholipases A2 from the Sea Anemone Condylactis giganteainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/articleEl veneno de los celenterados marinos constituyen mezclas complejas de varios componentes, muchos de naturaleza proteica, y para los cuales se ha descrito la actividad fosfolipásica A2. El objetivo de la presente investigación fue purificar las fosfolipasas A2 (FLA2) procedentes de la anémona marina Condylactis gigantea a partir de un protocolo de dos etapas para su posterior caracterización. Se muestra la purificación de FLA2 en un soporte cromatográfico de afinidad con fosfatidilcolina de huevo inmovilizada covalentemente para la purificación de fosfolipasas A2, a los que se les comprobó cualitativamente la actividad fosfolipásica A2 por cromatografía en placa (TLC) utilizando sustrato marcado con fluorescencia. Dicho soporte cromatográfico permite que en un protocolo de purificación de solamente dos pasos se obtengan tres componentes proteicos de pesos moleculares entre 18000 y 14000, con al menos un componente que posee actividad fosfolipásica A2.Universidad de Oriente. Facultad de Ciencias Naturales. Santiago de Cuba, Cuba.Universidad de La Habana. Facultad de Biología. Centro de Estudio de Proteínas. Ciudad Habana, Cuba.Instituto de Catálisis y Petroleoquímica. Madrid, España.Universidad de La Habana. Facultad de Biología. Centro de Estudio de Proteínas. Ciudad Habana, Cuba.Universidad de La Habana. Facultad de Biología. Centro de Estudio de Proteínas. Ciudad Habana, Cuba.Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Estudos de Biomoléculas Aplicadas à Saúde. Universidade Federal de Rondônia. Departamento de Medicina. Porto Velho, RO, Brasil.Universidad de La Habana. Facultad de Biología. Centro de Estudio de Proteínas. Ciudad Habana, Cuba.Marine coelenterate venom is composed of complex mixtures of several substances, mainly of proteins, for which phospholipase A2 activity has been described. This research study aims to test a two-step purification procedure for phospholipases A2 (PLA2) to filter enzymes for further characterization. PLA2 purification from the sea anemone Condylactis gigantean is conducted through a chromatographic affinity support MANA - Sepharose CL 4B with covalently immobilized phosphatidylcholine egg. The phospholipase A2 activity was corroborated by using qualitative TLC and a fluorogenic substrate. By means of the above-mentioned support, purification of three protein-based components can be carried out. These components are produced with molecular weights between 18000 and 14000, and at least one component possessing phospholipase A2 activity.AffinityPhospholipase A2Condylactis giganteaSea anemoneProtein purificationCromatografía de afinidadFosfolipasa A2Anémona marinaCondylactis giganteaPurificación de proteínasinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82991https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/33474/1/license.txt5a560609d32a3863062d77ff32785d58MD51ORIGINALProtocolo de purificación en dos etapas de fosfolipasas A2 a partir de la anémona marina Condylactis gigantea.pdfProtocolo de purificación en dos etapas de fosfolipasas A2 a partir de la anémona marina Condylactis 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