Influência de reinfecções sequenciais com clones da cepa colombiana do Trypanosoma cruzi com diferentes graus de virulência, sobre a miocardite crônica no modelo murino
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Data de Publicação: | 2009 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) |
Texto Completo: | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/34886 |
Resumo: | Reinfecções pelo Trypanosoma cruz em pacientes residentes de áreas endêmicas têm sido mencionadas como fator agravante das manifestações cardíacas na doença de Chagas. Achados experimentais demonstram que animais quando submetidos a infecções sucessivas apresentam reações inflamatórias mais intensas quando comparados àqueles com infecção única. O estudo da tríplice infecção com cepas de diferentes Biodemas demonstrou exacerbação das lesões teciduais músculo cardíaco e esquelético provavelmente devido ao abrigo de diferentes populações (cepas). Neste trabalho, utilizando-se o modelo murino, procura-se investigar a influência de infecções sucessivas com clones de T. cruzi de um mesmo Biodema, com diferentes graus de virulência, como fator agravante da miocardite crônica. Para o presente estudo foram utilizados camundongos suíços infectados com os clones (Col-C1/Col-C5/Col-C8) sacrificados na fase aguda 14°; 20°; 25°; 30°) todos os grupos e na fase crônica da infecção (150 dias) para os grupos Col-C5 e Col-C8. O clone Col-C1 não teve a fase crônica estudada devido a mortalidade total ao 30° dia de infecção. O grupo submetido à infecção tríplice foi avaliado entre o 115° e o 130° dias da primeira infecção e aos 175 dias. O inóculo para todos os grupos experimentais (infecção única e tríplice infecção) foi de 5 x 10 4 formas tripomastigotas sanguícolas do T. cruz por via intraperitoneal. Os camundongos sacrificados na fase aguda e na fase crônica em todos os grupos tiveram as secções coração e músculo esquelético coletadas, fixadas e posteriormente processadas para o estudo patológico em secções coradas pela Hematoxilina e Eosina ou pelo método do Picro-Sirius para investigação da fibrose. Investigou-se também a resposta humoral pela sorologia Iimunofluorescência indireta) e pela reação de Elisa. Os camundongos sacrificados na fase aguda nos grupos experimentais submetidos à infecção única demonstraram no geral lesões inflamatórias que variaram de discretas a moderadas, com necrose de miocélulas cardíacas e infiltrados inflamatórios mononucleares e fibrose intersticial difusa e focal. Os camundongos com tríplice infecção demonstraram exacerbação das lesões que variaram na maioria dos casos de moderadas a intensas no coração e no músculo esquelético, aos 25° e 30° dia após a tríplice infecção com relação aos animais submetidos a infecção única. Os camundongos com tríplice infecção avaliados aos 175 dias havia miocardite crônica em todos os casos, com lesões que variaram de discretas a moderadas. Os títulos sorológicos variaram de 1/10 a 1/640 nos grupos infecção única e de 1/10 a moderadas nos animais submetidos à tríplice infecção. A dosagem das imunoglobulinas IgM e IgG2a mostraram-se mais elevadas nos animais submetidos a tríplice infecção e, a IgG1 abaixo dos níveis normais. A análise quantitativa dos infiltrados inflamatórios (miocárdio e do teste cutâneo de hipersensibilidade tardia) demonstrou diferença significativa nos animais submetidos a tríplice infecção quando comparados com os animais submetidos à infecção única. Os resultados confirmaram que os animais submetidos a múltiplas infecções apresentam exacerbação das lesões inflamatórias, maiores níveis de imunoglobulinas e de títulos sorológicos quando comparados àqueles com infecção única. Concluímos que as reinfecções ao T. cruz é um fator agravante para a evolução da miocardiopatia chagásica no modelo murino da doença de Chagas. |
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Guerreiro, Marcos Lázaro da SilvaAraújo-Jorge, Tania Cremonini deMacambira, Simone GarciaAthanazio, Daniel AbensurSantos, Marcos Vannier dosAndrade, Sonia GumesAndrade, Sonia Gumes2019-08-19T17:50:13Z2019-08-19T17:50:13Z2009GUERREIRO, Marcos Lázaro da Silva. Influência de reinfecções sequenciais com clones da cepa colombiana do Trypanosoma cruzi com diferentes graus de virulência, sobre a miocardite crônica no modelo murino. 2014. 155 f. Tese (Doutorado em Patologia) – Universidade Federal da Bahia; Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz, Fundação Oswaldo Cruz, Salvador, 2014.https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/34886Reinfecções pelo Trypanosoma cruz em pacientes residentes de áreas endêmicas têm sido mencionadas como fator agravante das manifestações cardíacas na doença de Chagas. Achados experimentais demonstram que animais quando submetidos a infecções sucessivas apresentam reações inflamatórias mais intensas quando comparados àqueles com infecção única. O estudo da tríplice infecção com cepas de diferentes Biodemas demonstrou exacerbação das lesões teciduais músculo cardíaco e esquelético provavelmente devido ao abrigo de diferentes populações (cepas). Neste trabalho, utilizando-se o modelo murino, procura-se investigar a influência de infecções sucessivas com clones de T. cruzi de um mesmo Biodema, com diferentes graus de virulência, como fator agravante da miocardite crônica. Para o presente estudo foram utilizados camundongos suíços infectados com os clones (Col-C1/Col-C5/Col-C8) sacrificados na fase aguda 14°; 20°; 25°; 30°) todos os grupos e na fase crônica da infecção (150 dias) para os grupos Col-C5 e Col-C8. O clone Col-C1 não teve a fase crônica estudada devido a mortalidade total ao 30° dia de infecção. O grupo submetido à infecção tríplice foi avaliado entre o 115° e o 130° dias da primeira infecção e aos 175 dias. O inóculo para todos os grupos experimentais (infecção única e tríplice infecção) foi de 5 x 10 4 formas tripomastigotas sanguícolas do T. cruz por via intraperitoneal. Os camundongos sacrificados na fase aguda e na fase crônica em todos os grupos tiveram as secções coração e músculo esquelético coletadas, fixadas e posteriormente processadas para o estudo patológico em secções coradas pela Hematoxilina e Eosina ou pelo método do Picro-Sirius para investigação da fibrose. Investigou-se também a resposta humoral pela sorologia Iimunofluorescência indireta) e pela reação de Elisa. Os camundongos sacrificados na fase aguda nos grupos experimentais submetidos à infecção única demonstraram no geral lesões inflamatórias que variaram de discretas a moderadas, com necrose de miocélulas cardíacas e infiltrados inflamatórios mononucleares e fibrose intersticial difusa e focal. Os camundongos com tríplice infecção demonstraram exacerbação das lesões que variaram na maioria dos casos de moderadas a intensas no coração e no músculo esquelético, aos 25° e 30° dia após a tríplice infecção com relação aos animais submetidos a infecção única. Os camundongos com tríplice infecção avaliados aos 175 dias havia miocardite crônica em todos os casos, com lesões que variaram de discretas a moderadas. Os títulos sorológicos variaram de 1/10 a 1/640 nos grupos infecção única e de 1/10 a moderadas nos animais submetidos à tríplice infecção. A dosagem das imunoglobulinas IgM e IgG2a mostraram-se mais elevadas nos animais submetidos a tríplice infecção e, a IgG1 abaixo dos níveis normais. A análise quantitativa dos infiltrados inflamatórios (miocárdio e do teste cutâneo de hipersensibilidade tardia) demonstrou diferença significativa nos animais submetidos a tríplice infecção quando comparados com os animais submetidos à infecção única. Os resultados confirmaram que os animais submetidos a múltiplas infecções apresentam exacerbação das lesões inflamatórias, maiores níveis de imunoglobulinas e de títulos sorológicos quando comparados àqueles com infecção única. Concluímos que as reinfecções ao T. cruz é um fator agravante para a evolução da miocardiopatia chagásica no modelo murino da doença de Chagas.Infection with T. cruzi determines an immunological response in the vertebrate host, wit h parasites multiplication in macrophages, with production of TNFα by these cells an IFNγ, by stimulated T. cells: a polyclonal multiplication of spleen cells is present, with immunossuppression. Treatment of infected mice with BENZ showed that this chemotherapy determines parasitic destruction and also stimulates the immunological system in mice infected either with the Y or the Colombian strain which differs in the susceptibility to chemotherapy with BENZ. In the present study we intend to investigate the influence of treatment with BENZ on the immunological response in mice infected either with the Y strain (susceptible) or the Colombian strain (resistant). This study was performed by comparing the results obtained with the groups of mice not infected and treated, and infected controls, not treated. Material and methods : Number of animals: 320, sub-divided in the experimental groups:Ystrain infected and treated with BENZ(YT) or not-treated (YNT); Colombian treated (COL-T) and not-treated (COL-NT); treated not infected (TNI); Control not treated (COL-NT). Inoculum : 1x104 trypomastigotes, (blood forms) injected intraperitoneally. Treatment was initiated in the peak of parasitemia for each strain:7th day for the Y strain and in the 18th day in the infection with the Colombian strain. Chemotherapy was performed in 60 doses (100mg x kg x day) of BENZ. Mice were killed in the acute and chronic phases post infection; sections of the heart and skeletal muscles were collected, fixed and processed for histopathology, in sections stained with Hematoxylin and Eosin, and with Picro-Sirius staining, for collagen. The humoral response was evaluated by serological reactium of indirect immununofluorescence and ELISA reaction. Celular responses were evaluated by celular proliferation in the spleen of CD4+, CD8+ and memory cells (CD62L) macrophages and B cells. DTH was evaluated by intradermal skin teste. Serological titles varied in ted several grupos follows: YT: 0 - 1/640; COL-T: 1/80 to 1/640; COL-NT: 1/80 to 1/2560; TNI and CI: 0 – 1/10. Immunoglobulins leves (IgM, IgG1, IgG2a and total IgG) were higher in the groups COL-NT as ampered with the other groups. Evaluation of serum cytokines leves (IL-6, IL-10, MCP-1, IFN-γ and TNF-α): They were higler in mice infected with the Y strain. Treatment with Benzonidazole/BENZ did not influence the levels of cytokines in the group TNI. Cytometric analysis of the spleen in the acute phase showed a higher frequency of CD4+ and CD8+ cells in the group TNI; B cells (B220) in the CI group. In the chronic phase it has been show a higler frequency of CD4+ AND CD8+ in the groups COL-T; memory cells (CD4/CD62L) in the group YT; CD8/CD62L in the group COL-T; CD11B in the group COL-T acute phases the YT acute chronic . Histopathology of the heart and muscles showed presence of inflammatory infiltrates more intense in the group COL-NT as compared whit the several groups. The Skin Test for DTH revealed a higler cellularity of the inflammatory infiltrates in the groups YT, with 48 and 72 hours. Results suggest an influence of treatment with BENZ on the immunological response.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES).Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.porCentro de Pesquisas Gonçalo MonizTrypanosoma CruziClonesVirulênciaMiocardite CrônicaTrypanosoma cruziClonesVirulenceChronic myocarditisInfluência de reinfecções sequenciais com clones da cepa colombiana do Trypanosoma cruzi com diferentes graus de virulência, sobre a miocardite crônica no modelo murinoinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2009Coordenação de EnsinoUniversidade Federal da Bahia. Centro de Pesquisas Goncalo MonizMestrado AcadêmicoSalvador/BAPós-Graduação em Patologiainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/34886/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALMarcos Lazaro Silva Guerreiro Influencia....pdfMarcos Lazaro Silva Guerreiro Influencia....pdfapplication/pdf2165714https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/34886/2/Marcos%20Lazaro%20Silva%20Guerreiro%20Influencia....pdf9a6d8386215fdb4bd40dfb88b8b772a4MD52TEXTMarcos Lazaro Silva Guerreiro Influencia....pdf.txtMarcos Lazaro Silva Guerreiro Influencia....pdf.txtExtracted texttext/plain215315https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/34886/3/Marcos%20Lazaro%20Silva%20Guerreiro%20Influencia....pdf.txt1b9784f53e66b3ffd1d79e5be00c4aefMD53icict/348862019-08-22 00:06:56.979oai:www.arca.fiocruz.br:icict/34886Tk9URTogUExBQ0UgWU9VUiBPV04gTElDRU5TRSBIRVJFClRoaXMgc2FtcGxlIGxpY2Vuc2UgaXMgcHJvdmlkZWQgZm9yIGluZm9ybWF0aW9uYWwgcHVycG9zZXMgb25seS4KCk5PTi1FWENMVVNJVkUgRElTVFJJQlVUSU9OIExJQ0VOU0UKCkJ5IHNpZ25pbmcgYW5kIHN1Ym1pdHRpbmcgdGhpcyBsaWNlbnNlLCB5b3UgKHRoZSBhdXRob3Iocykgb3IgY29weXJpZ2h0Cm93bmVyKSBncmFudHMgdG8gRFNwYWNlIFVuaXZlcnNpdHkgKERTVSkgdGhlIG5vbi1leGNsdXNpdmUgcmlnaHQgdG8gcmVwcm9kdWNlLAp0cmFuc2xhdGUgKGFzIGRlZmluZWQgYmVsb3cpLCBhbmQvb3IgZGlzdHJpYnV0ZSB5b3VyIHN1Ym1pc3Npb24gKGluY2x1ZGluZwp0aGUgYWJzdHJhY3QpIHdvcmxkd2lkZSBpbiBwcmludCBhbmQgZWxlY3Ryb25pYyBmb3JtYXQgYW5kIGluIGFueSBtZWRpdW0sCmluY2x1ZGluZyBidXQgbm90IGxpbWl0ZWQgdG8gYXVkaW8gb3IgdmlkZW8uCgpZb3UgYWdyZWUgdGhhdCBEU1UgbWF5LCB3aXRob3V0IGNoYW5naW5nIHRoZSBjb250ZW50LCB0cmFuc2xhdGUgdGhlCnN1Ym1pc3Npb24gdG8gYW55IG1lZGl1bSBvciBmb3JtYXQgZm9yIHRoZSBwdXJwb3NlIG9mIHByZXNlcnZhdGlvbi4KCllvdSBhbHNvIGFncmVlIHRoYXQgRFNVIG1heSBrZWVwIG1vcmUgdGhhbiBvbmUgY29weSBvZiB0aGlzIHN1Ym1pc3Npb24gZm9yCnB1cnBvc2VzIG9mIHNlY3VyaXR5LCBiYWNrLXVwIGFuZCBwcmVzZXJ2YXRpb24uCgpZb3UgcmVwcmVzZW50IHRoYXQgdGhlIHN1Ym1pc3Npb24gaXMgeW91ciBvcmlnaW5hbCB3b3JrLCBhbmQgdGhhdCB5b3UgaGF2ZQp0aGUgcmlnaHQgdG8gZ3JhbnQgdGhlIHJpZ2h0cyBjb250YWluZWQgaW4gdGhpcyBsaWNlbnNlLiBZb3UgYWxzbyByZXByZXNlbnQKdGhhdCB5b3VyIHN1Ym1pc3Npb24gZG9lcyBub3QsIHRvIHRoZSBiZXN0IG9mIHlvdXIga25vd2xlZGdlLCBpbmZyaW5nZSB1cG9uCmFueW9uZSdzIGNvcHlyaWdodC4KCklmIHRoZSBzdWJtaXNzaW9uIGNvbnRhaW5zIG1hdGVyaWFsIGZvciB3aGljaCB5b3UgZG8gbm90IGhvbGQgY29weXJpZ2h0LAp5b3UgcmVwcmVzZW50IHRoYXQgeW91IGhhdmUgb2J0YWluZWQgdGhlIHVucmVzdHJpY3RlZCBwZXJtaXNzaW9uIG9mIHRoZQpjb3B5cmlnaHQgb3duZXIgdG8gZ3JhbnQgRFNVIHRoZSByaWdodHMgcmVxdWlyZWQgYnkgdGhpcyBsaWNlbnNlLCBhbmQgdGhhdApzdWNoIHRoaXJkLXBhcnR5IG93bmVkIG1hdGVyaWFsIGlzIGNsZWFybHkgaWRlbnRpZmllZCBhbmQgYWNrbm93bGVkZ2VkCndpdGhpbiB0aGUgdGV4dCBvciBjb250ZW50IG9mIHRoZSBzdWJtaXNzaW9uLgoKSUYgVEhFIFNVQk1JU1NJT04gSVMgQkFTRUQgVVBPTiBXT1JLIFRIQVQgSEFTIEJFRU4gU1BPTlNPUkVEIE9SIFNVUFBPUlRFRApCWSBBTiBBR0VOQ1kgT1IgT1JHQU5JWkFUSU9OIE9USEVSIFRIQU4gRFNVLCBZT1UgUkVQUkVTRU5UIFRIQVQgWU9VIEhBVkUKRlVMRklMTEVEIEFOWSBSSUdIVCBPRiBSRVZJRVcgT1IgT1RIRVIgT0JMSUdBVElPTlMgUkVRVUlSRUQgQlkgU1VDSApDT05UUkFDVCBPUiBBR1JFRU1FTlQuCgpEU1Ugd2lsbCBjbGVhcmx5IGlkZW50aWZ5IHlvdXIgbmFtZShzKSBhcyB0aGUgYXV0aG9yKHMpIG9yIG93bmVyKHMpIG9mIHRoZQpzdWJtaXNzaW9uLCBhbmQgd2lsbCBub3QgbWFrZSBhbnkgYWx0ZXJhdGlvbiwgb3RoZXIgdGhhbiBhcyBhbGxvd2VkIGJ5IHRoaXMKbGljZW5zZSwgdG8geW91ciBzdWJtaXNzaW9uLgo=Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352019-08-22T03:06:56Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false |
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Reinfecções pelo Trypanosoma cruz em pacientes residentes de áreas endêmicas têm sido mencionadas como fator agravante das manifestações cardíacas na doença de Chagas. Achados experimentais demonstram que animais quando submetidos a infecções sucessivas apresentam reações inflamatórias mais intensas quando comparados àqueles com infecção única. O estudo da tríplice infecção com cepas de diferentes Biodemas demonstrou exacerbação das lesões teciduais músculo cardíaco e esquelético provavelmente devido ao abrigo de diferentes populações (cepas). Neste trabalho, utilizando-se o modelo murino, procura-se investigar a influência de infecções sucessivas com clones de T. cruzi de um mesmo Biodema, com diferentes graus de virulência, como fator agravante da miocardite crônica. Para o presente estudo foram utilizados camundongos suíços infectados com os clones (Col-C1/Col-C5/Col-C8) sacrificados na fase aguda 14°; 20°; 25°; 30°) todos os grupos e na fase crônica da infecção (150 dias) para os grupos Col-C5 e Col-C8. O clone Col-C1 não teve a fase crônica estudada devido a mortalidade total ao 30° dia de infecção. O grupo submetido à infecção tríplice foi avaliado entre o 115° e o 130° dias da primeira infecção e aos 175 dias. O inóculo para todos os grupos experimentais (infecção única e tríplice infecção) foi de 5 x 10 4 formas tripomastigotas sanguícolas do T. cruz por via intraperitoneal. Os camundongos sacrificados na fase aguda e na fase crônica em todos os grupos tiveram as secções coração e músculo esquelético coletadas, fixadas e posteriormente processadas para o estudo patológico em secções coradas pela Hematoxilina e Eosina ou pelo método do Picro-Sirius para investigação da fibrose. Investigou-se também a resposta humoral pela sorologia Iimunofluorescência indireta) e pela reação de Elisa. Os camundongos sacrificados na fase aguda nos grupos experimentais submetidos à infecção única demonstraram no geral lesões inflamatórias que variaram de discretas a moderadas, com necrose de miocélulas cardíacas e infiltrados inflamatórios mononucleares e fibrose intersticial difusa e focal. Os camundongos com tríplice infecção demonstraram exacerbação das lesões que variaram na maioria dos casos de moderadas a intensas no coração e no músculo esquelético, aos 25° e 30° dia após a tríplice infecção com relação aos animais submetidos a infecção única. Os camundongos com tríplice infecção avaliados aos 175 dias havia miocardite crônica em todos os casos, com lesões que variaram de discretas a moderadas. Os títulos sorológicos variaram de 1/10 a 1/640 nos grupos infecção única e de 1/10 a moderadas nos animais submetidos à tríplice infecção. A dosagem das imunoglobulinas IgM e IgG2a mostraram-se mais elevadas nos animais submetidos a tríplice infecção e, a IgG1 abaixo dos níveis normais. A análise quantitativa dos infiltrados inflamatórios (miocárdio e do teste cutâneo de hipersensibilidade tardia) demonstrou diferença significativa nos animais submetidos a tríplice infecção quando comparados com os animais submetidos à infecção única. Os resultados confirmaram que os animais submetidos a múltiplas infecções apresentam exacerbação das lesões inflamatórias, maiores níveis de imunoglobulinas e de títulos sorológicos quando comparados àqueles com infecção única. Concluímos que as reinfecções ao T. cruz é um fator agravante para a evolução da miocardiopatia chagásica no modelo murino da doença de Chagas. |
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