Identificação molecular de Enteroparasitos em areia de praias do Rio de Janeiro
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2016 |
Tipo de documento: | Tese |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) |
Texto Completo: | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/47637 |
Resumo: | Para a Organização Mundial da Saúde, ambientes contaminados enquadram-se como importantes meios de transmissão de doenças para humanos e animais, por apresentar condições intrínsecas ideais ao desenvolvimento e manutenção de ciclos parasitários. Nesse contexto, dois agentes assumem importância principal, Ascaris lumbricoides e Giardia intestinalis, em razão a elevada endemicidade registrada no mundo e pelos aspectos patológicos por vezes registrados no homem. Em ambos os casos, a infecção mostra-se diretamente relacionada a processos de contaminação fecal do ambiente, garantindo a veiculação de estruturas parasitárias que serão adquiridas por hospedeiros susceptíveis. Atualmente, os avanços relacionados aos métodos moleculares fornecem novas oportunidades para o diagnóstico parasitológico em amostras ambientais, permitindo atuar na genotipagem e no melhor entendimento dos aspectos epidemiológicos envolvidos no aparecimento e dispersão desses agentes no meio. O objetivo desse estudo foi padronizar métodos moleculares voltados para a detecção de DNA de parasitos em amostras de areia, contribuindo para o estabelecimento de novos padrões de qualidade sanitária. Um total de 129 amostras de areia foram coletadas de 4 praias da Baía de Guanabara, duas situadas na Ilha do Governador (IG), praia da Bica e da Ponta do Tubiacanga, e as outras duas localizadas na Ilha de Paquetá (IP), José Bonifácio e dos Tamoios. Estas foram previamente processadas pela técnica de Lutz adaptada, permitindo concentrar as amostras estudadas. A extração de DNA foi realizada do sobrenadante da técnica em questão, por meio de dois métodos de extração adaptados: QIAamp DNA Stool Mini Kit® - Qiagen e GeneClean Kit. Os produtos da PCR originaram bandas amplificadas de 264 pb para A. lumbricoides e 753 pb para G. intestinalis. Do total das amostras estudas 56,6% (73/129) foram consideradas positivas para A. lumbricoides e 82,2% (23/28) positivas para G. intestinalis. Esses dados confirmam que as técnicas de biologia molecular desenvolvidas podem ser utilizadas para identificar a presença de parasitos em amostras ambientais. E tais achados confirmaram molecularmente a contaminação fecal das amostras estudadas e ressaltam a presença de estruturas infectantes que colocam em risco a saúde humana. Estes dados alertam as autoridades sobre os cuidados envolvidos no tratamento e monitoramento dessas matrizes, ressaltando a necessidade de implementar novas medidas focadas na prevenção e controle da acaríase e giardíase. |
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Amaral, Ludimila SantosDuarte, Antonio NascimentoMartins, Adriana Sotero2021-06-11T00:22:34Z2021-06-11T00:22:34Z2016AMARAL, Ludimila Santos. Identificação molecular de Enteroparasitos em areia de praias do Rio de Janeiro. 2016. 97 f. Tese (Doutorado em Saúde Pública e Meio Ambiente) - Escola Nacional de Saúde Pública Sergio Arouca, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2016.https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/47637Para a Organização Mundial da Saúde, ambientes contaminados enquadram-se como importantes meios de transmissão de doenças para humanos e animais, por apresentar condições intrínsecas ideais ao desenvolvimento e manutenção de ciclos parasitários. Nesse contexto, dois agentes assumem importância principal, Ascaris lumbricoides e Giardia intestinalis, em razão a elevada endemicidade registrada no mundo e pelos aspectos patológicos por vezes registrados no homem. Em ambos os casos, a infecção mostra-se diretamente relacionada a processos de contaminação fecal do ambiente, garantindo a veiculação de estruturas parasitárias que serão adquiridas por hospedeiros susceptíveis. Atualmente, os avanços relacionados aos métodos moleculares fornecem novas oportunidades para o diagnóstico parasitológico em amostras ambientais, permitindo atuar na genotipagem e no melhor entendimento dos aspectos epidemiológicos envolvidos no aparecimento e dispersão desses agentes no meio. O objetivo desse estudo foi padronizar métodos moleculares voltados para a detecção de DNA de parasitos em amostras de areia, contribuindo para o estabelecimento de novos padrões de qualidade sanitária. Um total de 129 amostras de areia foram coletadas de 4 praias da Baía de Guanabara, duas situadas na Ilha do Governador (IG), praia da Bica e da Ponta do Tubiacanga, e as outras duas localizadas na Ilha de Paquetá (IP), José Bonifácio e dos Tamoios. Estas foram previamente processadas pela técnica de Lutz adaptada, permitindo concentrar as amostras estudadas. A extração de DNA foi realizada do sobrenadante da técnica em questão, por meio de dois métodos de extração adaptados: QIAamp DNA Stool Mini Kit® - Qiagen e GeneClean Kit. Os produtos da PCR originaram bandas amplificadas de 264 pb para A. lumbricoides e 753 pb para G. intestinalis. Do total das amostras estudas 56,6% (73/129) foram consideradas positivas para A. lumbricoides e 82,2% (23/28) positivas para G. intestinalis. Esses dados confirmam que as técnicas de biologia molecular desenvolvidas podem ser utilizadas para identificar a presença de parasitos em amostras ambientais. E tais achados confirmaram molecularmente a contaminação fecal das amostras estudadas e ressaltam a presença de estruturas infectantes que colocam em risco a saúde humana. Estes dados alertam as autoridades sobre os cuidados envolvidos no tratamento e monitoramento dessas matrizes, ressaltando a necessidade de implementar novas medidas focadas na prevenção e controle da acaríase e giardíase.According to the World Health Organization, contaminated environments are among the most important causes of the transmission of diseases to humans and animals, due to intrinsic conditions ideal for development and maintenance of parasite life cycles. In this context, two agents stand out, Ascaris lumbricoides and Giardia intestinalis, because of the high endemicity recorded in the world and the pathological aspects related to humans. In both cases, infection is directly related to contamination by fecal matter, promoting the spread of these parasites to susceptible hosts. Recent advances in molecular methods provide new opportunities for parasite diagnosis in environmental samples, permitting genotyping and better understanding of the epidemiological aspects involved in the appearance and dispersion of these agents in the environment. The objective of this study was to standardize molecular methods to detect DNA of parasites in beach sand samples, to help establish new sanitary quality standards. A total of 129 sand samples were collected at four beaches in Guanabara Bay (Rio de Janeiro), two located on Ilha do Governador (IG), Bica and Ponta do Tubiacanga beaches, and the two others located on Ilha de Paquetá (IP), José Bonifácio and Tamoios beaches. The samples were first processed according to the technique of Lutz, with adaptation, for concentration. The DNA was extracted from the supernatant from that technique with two commercial kits, with some modifications of the manufacturers\2019 recommendations: QIAamp DNA Stool Mini Kit® (Qiagen) and GeneClean Kit (MP Biomedicals). The PCR products originated amplified bands of 264 pb for A. lumbricoides and 753 pb for G. intestinalis. Of all the samples analyzed, 56.6% (73/129) were considered positive for A. lumbricoides and 82.2% (23/28) positive for G. intestinalis. These data confirm that the molecular biology techniques developed can be used to identify the presence of parasites in environmental samples. The findings also molecularly confirm the fecal contamination of the samples studied and emphasize the presence of infective structures that pose a risk to human health. Finally, these data serve as an alert to public authorities of the need for better monitoring and treatment of this contamination, in particular measures for prevention and control of acariasis and giardiasis.Fundação Oswaldo Cruz. Escola Nacional de Saúde Pública Sergio Arouca. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.porPraiasQualidade sanitáriaAreiaPCRHelmintosProtozoáriosBeachesSanitary QualitySandPCRHelminthsProtozoaPraiasQualidade AmbientalPerfis SanitáriosAreiaReação em Cadeia da PolimeraseEnteropatias ParasitáriasHelmintosDNA de ProtozoárioIdentificação molecular de Enteroparasitos em areia de praias do Rio de JaneiroMolecular identification of enteroparasites in sand of Rio de Janeiro beachesinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesis2016-10-31Escola Nacional de Saúde Pública Sergio Arouca, Fundação Oswaldo Cruz.Fundação Oswaldo Cruz, Escola Nacional de Saúde Pública Sergio Arouca.Rio de JaneiroPrograma de Pós-Graduação em Saúde Pública e Meio Ambienteinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/47637/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALludimila_santos_amaral_ensp_dout_2016.pdfapplication/pdf3558327https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/47637/2/ludimila_santos_amaral_ensp_dout_2016.pdf1abb115b54bcf777d2e9bebdb43a3e7fMD52TEXTludimila_santos_amaral_ensp_dout_2016.pdf.txtludimila_santos_amaral_ensp_dout_2016.pdf.txtExtracted texttext/plain177196https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/47637/3/ludimila_santos_amaral_ensp_dout_2016.pdf.txt0b4fb21cd1e5260a5dbc72fbd8fb512cMD53icict/476372021-06-11 02:01:46.279oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352021-06-11T05:01:46Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false |
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