Modulação da elastina cutânea induzida pelo fotoenvelhecimento: avaliação da expressão gênica e proteica de marcadores relacionados à elastogênese em diferentes condições de fotoexposição
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2015 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório do Centro Universitário Braz Cubas |
Texto Completo: | https://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/2596 |
Resumo: | Photoaging is a process triggered by environmental factors, especially by exposure to solar radiation and leading to development of clinical skin changes. Elastin is a matrix protein that provides a great importance in skin resilience and elasticity, and has a strong relation with photodamage by appearance of clinical features known as solar elastosis. Thus, the objective of this research was to identify a specific structural modification caused by alternative splicing that can occur in elastin after sun exposure, known as exon 26A, in in vitro models of reconstituted skin and ex vivo skin for analysis of gene expression by qPCR. We also evaluated other molecules related to elastogenesis (normal elastin, tropoelastin, fibrillin 1, LOX and MAGP2) and the main metaloproteinase that degrades elastin (MMP12) by qPCR assays and immunohistochemical analyzes. The results obtained from the gene expression analyzes of ex vivo skin showed that the modified elastin (26A) is increased in sun-exposed conditions (3,61 times in face lifting and 2,58 times in blepharoplasty) with a significant increase (p value = 0,0008 and 0,0076 respectively) when compared to non-photoexposed controls. The MMP12 also increase by 5.98 times in face lifting and 3,14 times in blepharoplasty, these being significant data (p value <0,0001 and 0,0096 respectively) and LOX increased significantly in blepharoplasty region (increase by 1,64 times and p value = 0,0080). In gene expression analysis of reconstructed skin, we observed a significant increase of altered elastin by 4,59 times in irradiated skin when compared to non-irradiated conditions (p value = 0,0298). By immunohistochemical analyzes of reconstructed skins it was observed an increase of tropoelastin and fibrillin 1 expression in sunexposed conditions and other markers used differences were not observed. Thus, this work can contribute to a better understanding of another important process of photoaging and allow to obtain new compounds and cosmetics products that could prevent or reduce photoaging. This work is divided into two chapters. The first chapter refers to a literature review on the elastin role in photoaging and the second chapter consists of an experimental scientific article with the results obtained with this project. |
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Modulação da elastina cutânea induzida pelo fotoenvelhecimento: avaliação da expressão gênica e proteica de marcadores relacionados à elastogênese em diferentes condições de fotoexposiçãoElastinaFotoenvelhecimentoElastose solarSplicing alternativoCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOLOGIA GERALPhotoaging is a process triggered by environmental factors, especially by exposure to solar radiation and leading to development of clinical skin changes. Elastin is a matrix protein that provides a great importance in skin resilience and elasticity, and has a strong relation with photodamage by appearance of clinical features known as solar elastosis. Thus, the objective of this research was to identify a specific structural modification caused by alternative splicing that can occur in elastin after sun exposure, known as exon 26A, in in vitro models of reconstituted skin and ex vivo skin for analysis of gene expression by qPCR. We also evaluated other molecules related to elastogenesis (normal elastin, tropoelastin, fibrillin 1, LOX and MAGP2) and the main metaloproteinase that degrades elastin (MMP12) by qPCR assays and immunohistochemical analyzes. The results obtained from the gene expression analyzes of ex vivo skin showed that the modified elastin (26A) is increased in sun-exposed conditions (3,61 times in face lifting and 2,58 times in blepharoplasty) with a significant increase (p value = 0,0008 and 0,0076 respectively) when compared to non-photoexposed controls. The MMP12 also increase by 5.98 times in face lifting and 3,14 times in blepharoplasty, these being significant data (p value <0,0001 and 0,0096 respectively) and LOX increased significantly in blepharoplasty region (increase by 1,64 times and p value = 0,0080). In gene expression analysis of reconstructed skin, we observed a significant increase of altered elastin by 4,59 times in irradiated skin when compared to non-irradiated conditions (p value = 0,0298). By immunohistochemical analyzes of reconstructed skins it was observed an increase of tropoelastin and fibrillin 1 expression in sunexposed conditions and other markers used differences were not observed. Thus, this work can contribute to a better understanding of another important process of photoaging and allow to obtain new compounds and cosmetics products that could prevent or reduce photoaging. This work is divided into two chapters. The first chapter refers to a literature review on the elastin role in photoaging and the second chapter consists of an experimental scientific article with the results obtained with this project.O fotoenvelhecimento é um processo desencadeado por fatores ambientais, especialmente pela exposição à radiação solar e que leva ao desenvolvimento de alterações clínicas na pele. A elastina é uma proteína de matriz que proporciona uma grande importância na elasticidade e resiliência da pele e apresenta grande relação com o fotoenvelhecimento através do aparecimento de características clínicas conhecidas como elastose solar. Com isso, o objetivo dessa pesquisa foi identificar uma alteração estrutural específica causada por splicing alternativo, que pode acontecer na elastina após a fotoexposição, conhecida como exon 26A, em modelos in vitro de pele reconstituída e pele ex vivo, por análises de expressão gênica por qPCR. Também foram avaliadas outras moléculas relacionadas a elastogênese (elastina normal, tropoelastina, fibrilina 1, LOX e MAGP2) e a principal metaloproteinase que degrada elastina (MMP12) por ensaios de qPCR e por análises por imunohistoquímica. Os resultados obtidos com as análises por expressão gênica das peles ex vivo demonstraram que a elastina alterada (26A) está aumentada nas condições fotoexpostas (ritidoplastia 3,61 vezes e blefaroplastia 2,58 vezes) sendo esse aumento significativo (p value = 0,0008 e 0,0076 respectivamente) quando comparadas com os controles não fotoexpostos. A MMP12 também apresentou aumento de 5,98 vezes na ritidoplastia e 3,14 vezes na blefaroplastia, sendo esses dados significativos (p value < 0,0001 e 0,0096 respectivamente) e a LOX aumentou significativamente na região da blefaroplastia (aumento de 1,64 vezes e p value = 0,0080). Nas análises de expressão gênica em pele reconstituída, foi possível observar um aumento significativo da elastina alterada de 4,59 vezes nas peles irradiadas quando comparada às condições não irradiadas (p value = 0,0298). Pelas análises de imunohistoquímica das peles reconstituídas foi observado um aumento da marcação da tropoelastina e da fibrilina 1 nas condições fotoexpostas e nos demais marcadores utilizados não foram percebidas diferenças. Sendo assim, esse trabalho pode contribuir com um melhor entendimento de mais um processo importante do fotoenvelhecimento e permitirá à obtenção de novos ativos ou produtos dermocosméticos que possam prevenir ou diminuir o fotoenvelhecimento. O presente trabalho está dividido em dois capítulos. O primeiro capítulo refere-se a uma revisão de literatura sobre a relação da elastina no fotoenvelhecimento e o segundo capítulo consiste em um artigo científico experimental com os resultados obtidos com esse projeto.Universidade PositivoBrasilPós-GraduaçãoPrograma de Pós-Graduação em Biotecnologia IndustrialUPCarvalho, Camila Miranda dehttp://lattes.cnpq.br/0342033597198723Weihermann, Ana Cristina2021-08-17T18:41:06Z20152021-08-17T18:41:06Z2015info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/2596porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório do Centro Universitário Braz Cubasinstname:Centro Universitário Braz Cubas (CUB)instacron:CUB2021-08-23T17:20:27Zoai:repositorio.cruzeirodosul.edu.br:123456789/2596Repositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.brazcubas.edu.br/oai/requestbibli@brazcubas.edu.bropendoar:2021-08-23T17:20:27Repositório do Centro Universitário Braz Cubas - Centro Universitário Braz Cubas (CUB)false |
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Photoaging is a process triggered by environmental factors, especially by exposure to solar radiation and leading to development of clinical skin changes. Elastin is a matrix protein that provides a great importance in skin resilience and elasticity, and has a strong relation with photodamage by appearance of clinical features known as solar elastosis. Thus, the objective of this research was to identify a specific structural modification caused by alternative splicing that can occur in elastin after sun exposure, known as exon 26A, in in vitro models of reconstituted skin and ex vivo skin for analysis of gene expression by qPCR. We also evaluated other molecules related to elastogenesis (normal elastin, tropoelastin, fibrillin 1, LOX and MAGP2) and the main metaloproteinase that degrades elastin (MMP12) by qPCR assays and immunohistochemical analyzes. The results obtained from the gene expression analyzes of ex vivo skin showed that the modified elastin (26A) is increased in sun-exposed conditions (3,61 times in face lifting and 2,58 times in blepharoplasty) with a significant increase (p value = 0,0008 and 0,0076 respectively) when compared to non-photoexposed controls. The MMP12 also increase by 5.98 times in face lifting and 3,14 times in blepharoplasty, these being significant data (p value <0,0001 and 0,0096 respectively) and LOX increased significantly in blepharoplasty region (increase by 1,64 times and p value = 0,0080). In gene expression analysis of reconstructed skin, we observed a significant increase of altered elastin by 4,59 times in irradiated skin when compared to non-irradiated conditions (p value = 0,0298). By immunohistochemical analyzes of reconstructed skins it was observed an increase of tropoelastin and fibrillin 1 expression in sunexposed conditions and other markers used differences were not observed. Thus, this work can contribute to a better understanding of another important process of photoaging and allow to obtain new compounds and cosmetics products that could prevent or reduce photoaging. This work is divided into two chapters. The first chapter refers to a literature review on the elastin role in photoaging and the second chapter consists of an experimental scientific article with the results obtained with this project. |
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