Efeito do potencial de água no solo na população de Bradyrhizobium sp (cicer) avaliada através de mutantes contendo o transposon Tn5 (Km-) e imuno-fluorescência
Autor(a) principal: | |
---|---|
Data de Publicação: | 1991 |
Outros Autores: | |
Tipo de documento: | Artigo |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Pesquisa Agropecuária Brasileira (Online) |
Texto Completo: | https://seer.sct.embrapa.br/index.php/pab/article/view/3442 |
Resumo: | Foram obtidos mutantes de Bradyrhizobium sp com o transposon Tn5 através de conjugação com a estirpe MV-12 de Escherichia coli contendo o plasmídio suicida pGS9, com estirpes de Bradyrhizobium de grão-de-bico (Cicer arietinum L.). Um dos mutantes Tn5 da estirpe A8 foi selecionado, inoculado em solo não estéril submetido a três tensões de água: -0.033, -0.3 e -3 MPa, e feito o acompanhamento de sua população através de contagem em placas e através de imunofluorescência (FA). O maior índice de sobrevivência da estirpe A8 foi observado em -0.3 MPa, mantendo-se a população ao nível inicial até pelo menos 55 dias. Nos dois outros níveis de tensões de água, a população de Bradyrhizobium sofreu um decréscimo acentuado com o tempo, particularmente no nível de -3 MPa. Inicialmente, os valores obtidos através da contagem em placas e FA foram similares, mas 10 dias após a inoculação, as contagens através do FA foram cerca de 100 vezes superiores aos da contagem em placas nas amostras mantidas a 3 MPa. A discrepância entre os dois métodos poderia ser atribuída à contagem de células mortas, mas ainda mantendo propriedades antigênicas intactas, ou incapacidade de células vivas mas estressadas, de crescerem no meio utilizado. Em solos com teores mais elevados de água (-0.033 e -0.3 MPa) os resultados obtidos pelos dois métodos foram similares. Os resultados indicam que mutações induzidas pelo transposon Tn5 podem ser utilizadas em estudos ecológicos. Também sugerem que o método de FA parece superestimar a população de Bradyrhizobium no solo sob condições de baixa umidade, que reduza a atividade microbiana no solo. |
id |
EMBRAPA-4_3e6283ec408261fd3b9522478db5b2fb |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:ojs.seer.sct.embrapa.br:article/3442 |
network_acronym_str |
EMBRAPA-4 |
network_name_str |
Pesquisa Agropecuária Brasileira (Online) |
repository_id_str |
|
spelling |
Efeito do potencial de água no solo na população de Bradyrhizobium sp (cicer) avaliada através de mutantes contendo o transposon Tn5 (Km-) e imuno-fluorescênciaInfluence of water potential on the enumeration of Bradyrhizobium sp (cicer) by Tn5 mutants (km-) and fluorescent antibodyBradyrhizobium; Tn5; transposon; ecologiaBradyrhizobium; Tn5; transposon; ecologyForam obtidos mutantes de Bradyrhizobium sp com o transposon Tn5 através de conjugação com a estirpe MV-12 de Escherichia coli contendo o plasmídio suicida pGS9, com estirpes de Bradyrhizobium de grão-de-bico (Cicer arietinum L.). Um dos mutantes Tn5 da estirpe A8 foi selecionado, inoculado em solo não estéril submetido a três tensões de água: -0.033, -0.3 e -3 MPa, e feito o acompanhamento de sua população através de contagem em placas e através de imunofluorescência (FA). O maior índice de sobrevivência da estirpe A8 foi observado em -0.3 MPa, mantendo-se a população ao nível inicial até pelo menos 55 dias. Nos dois outros níveis de tensões de água, a população de Bradyrhizobium sofreu um decréscimo acentuado com o tempo, particularmente no nível de -3 MPa. Inicialmente, os valores obtidos através da contagem em placas e FA foram similares, mas 10 dias após a inoculação, as contagens através do FA foram cerca de 100 vezes superiores aos da contagem em placas nas amostras mantidas a 3 MPa. A discrepância entre os dois métodos poderia ser atribuída à contagem de células mortas, mas ainda mantendo propriedades antigênicas intactas, ou incapacidade de células vivas mas estressadas, de crescerem no meio utilizado. Em solos com teores mais elevados de água (-0.033 e -0.3 MPa) os resultados obtidos pelos dois métodos foram similares. Os resultados indicam que mutações induzidas pelo transposon Tn5 podem ser utilizadas em estudos ecológicos. Também sugerem que o método de FA parece superestimar a população de Bradyrhizobium no solo sob condições de baixa umidade, que reduza a atividade microbiana no solo.Tn5 induced insertion mutants were generated in Bradyrhizobium sp (Cicer) by mating with Escherichia coli MV-12 carrying the suicide plasmid pGS9. One Tn5 mutant of strain A8 was selected, inoculated in nonsterile soil at three water potentials (-0.033, -0.3 and -3 MPa) and enumerated for survival by plate count using kanamycin (Km) amended medium and by the fluorescent antibody (FA). Survival, as determined by plate count and FA was optimum at -0.3 MPa where the strain remained viable at near the initial inoculum level for at least 55 days. At the other two water potentials, bradyrhizobial viable counts decreased sharply, particularly at -3 MPa. Initially, FA and plate counts were similar, but 10 days after inoculation, estimates by FA were two log units higher than by plate count for soils held at -3 MPa. The discrepancy between the two methods may be due to identification of fluorescent active dead cells or failure of alive, but stressed cells to grow on the artificial medium. Under minimum water stress (-0.033 and -0.3 MPa water potential), results with both methods were similar. These results show that Tn5 mutagenesis can be used to mark bacteria and to conduct effective ecological studies. Additionally, they indicate that FA enumeration tends to overestimate the bradyrhizobial population under some dry soil conditions that reduce the microbial activity in soil.Pesquisa Agropecuaria BrasileiraPesquisa Agropecuária BrasileiraVargas, Milton A.TBezdicek, David F.1991-07-01info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionapplication/pdfhttps://seer.sct.embrapa.br/index.php/pab/article/view/3442Pesquisa Agropecuaria Brasileira; v.26, n.7, jul. 1991; 1081-1089Pesquisa Agropecuária Brasileira; v.26, n.7, jul. 1991; 1081-10891678-39210100-104xreponame:Pesquisa Agropecuária Brasileira (Online)instname:Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa)instacron:EMBRAPAporhttps://seer.sct.embrapa.br/index.php/pab/article/view/3442/775info:eu-repo/semantics/openAccess2010-08-19T14:28:11Zoai:ojs.seer.sct.embrapa.br:article/3442Revistahttp://seer.sct.embrapa.br/index.php/pabPRIhttps://old.scielo.br/oai/scielo-oai.phppab@sct.embrapa.br || sct.pab@embrapa.br1678-39210100-204Xopendoar:2010-08-19T14:28:11Pesquisa Agropecuária Brasileira (Online) - Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa)false |
dc.title.none.fl_str_mv |
Efeito do potencial de água no solo na população de Bradyrhizobium sp (cicer) avaliada através de mutantes contendo o transposon Tn5 (Km-) e imuno-fluorescência Influence of water potential on the enumeration of Bradyrhizobium sp (cicer) by Tn5 mutants (km-) and fluorescent antibody |
title |
Efeito do potencial de água no solo na população de Bradyrhizobium sp (cicer) avaliada através de mutantes contendo o transposon Tn5 (Km-) e imuno-fluorescência |
spellingShingle |
Efeito do potencial de água no solo na população de Bradyrhizobium sp (cicer) avaliada através de mutantes contendo o transposon Tn5 (Km-) e imuno-fluorescência Vargas, Milton A.T Bradyrhizobium; Tn5; transposon; ecologia Bradyrhizobium; Tn5; transposon; ecology |
title_short |
Efeito do potencial de água no solo na população de Bradyrhizobium sp (cicer) avaliada através de mutantes contendo o transposon Tn5 (Km-) e imuno-fluorescência |
title_full |
Efeito do potencial de água no solo na população de Bradyrhizobium sp (cicer) avaliada através de mutantes contendo o transposon Tn5 (Km-) e imuno-fluorescência |
title_fullStr |
Efeito do potencial de água no solo na população de Bradyrhizobium sp (cicer) avaliada através de mutantes contendo o transposon Tn5 (Km-) e imuno-fluorescência |
title_full_unstemmed |
Efeito do potencial de água no solo na população de Bradyrhizobium sp (cicer) avaliada através de mutantes contendo o transposon Tn5 (Km-) e imuno-fluorescência |
title_sort |
Efeito do potencial de água no solo na população de Bradyrhizobium sp (cicer) avaliada através de mutantes contendo o transposon Tn5 (Km-) e imuno-fluorescência |
author |
Vargas, Milton A.T |
author_facet |
Vargas, Milton A.T Bezdicek, David F. |
author_role |
author |
author2 |
Bezdicek, David F. |
author2_role |
author |
dc.contributor.none.fl_str_mv |
|
dc.contributor.author.fl_str_mv |
Vargas, Milton A.T Bezdicek, David F. |
dc.subject.por.fl_str_mv |
Bradyrhizobium; Tn5; transposon; ecologia Bradyrhizobium; Tn5; transposon; ecology |
topic |
Bradyrhizobium; Tn5; transposon; ecologia Bradyrhizobium; Tn5; transposon; ecology |
description |
Foram obtidos mutantes de Bradyrhizobium sp com o transposon Tn5 através de conjugação com a estirpe MV-12 de Escherichia coli contendo o plasmídio suicida pGS9, com estirpes de Bradyrhizobium de grão-de-bico (Cicer arietinum L.). Um dos mutantes Tn5 da estirpe A8 foi selecionado, inoculado em solo não estéril submetido a três tensões de água: -0.033, -0.3 e -3 MPa, e feito o acompanhamento de sua população através de contagem em placas e através de imunofluorescência (FA). O maior índice de sobrevivência da estirpe A8 foi observado em -0.3 MPa, mantendo-se a população ao nível inicial até pelo menos 55 dias. Nos dois outros níveis de tensões de água, a população de Bradyrhizobium sofreu um decréscimo acentuado com o tempo, particularmente no nível de -3 MPa. Inicialmente, os valores obtidos através da contagem em placas e FA foram similares, mas 10 dias após a inoculação, as contagens através do FA foram cerca de 100 vezes superiores aos da contagem em placas nas amostras mantidas a 3 MPa. A discrepância entre os dois métodos poderia ser atribuída à contagem de células mortas, mas ainda mantendo propriedades antigênicas intactas, ou incapacidade de células vivas mas estressadas, de crescerem no meio utilizado. Em solos com teores mais elevados de água (-0.033 e -0.3 MPa) os resultados obtidos pelos dois métodos foram similares. Os resultados indicam que mutações induzidas pelo transposon Tn5 podem ser utilizadas em estudos ecológicos. Também sugerem que o método de FA parece superestimar a população de Bradyrhizobium no solo sob condições de baixa umidade, que reduza a atividade microbiana no solo. |
publishDate |
1991 |
dc.date.none.fl_str_mv |
1991-07-01 |
dc.type.none.fl_str_mv |
|
dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/article info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
format |
article |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.uri.fl_str_mv |
https://seer.sct.embrapa.br/index.php/pab/article/view/3442 |
url |
https://seer.sct.embrapa.br/index.php/pab/article/view/3442 |
dc.language.iso.fl_str_mv |
por |
language |
por |
dc.relation.none.fl_str_mv |
https://seer.sct.embrapa.br/index.php/pab/article/view/3442/775 |
dc.rights.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.format.none.fl_str_mv |
application/pdf |
dc.publisher.none.fl_str_mv |
Pesquisa Agropecuaria Brasileira Pesquisa Agropecuária Brasileira |
publisher.none.fl_str_mv |
Pesquisa Agropecuaria Brasileira Pesquisa Agropecuária Brasileira |
dc.source.none.fl_str_mv |
Pesquisa Agropecuaria Brasileira; v.26, n.7, jul. 1991; 1081-1089 Pesquisa Agropecuária Brasileira; v.26, n.7, jul. 1991; 1081-1089 1678-3921 0100-104x reponame:Pesquisa Agropecuária Brasileira (Online) instname:Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa) instacron:EMBRAPA |
instname_str |
Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa) |
instacron_str |
EMBRAPA |
institution |
EMBRAPA |
reponame_str |
Pesquisa Agropecuária Brasileira (Online) |
collection |
Pesquisa Agropecuária Brasileira (Online) |
repository.name.fl_str_mv |
Pesquisa Agropecuária Brasileira (Online) - Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa) |
repository.mail.fl_str_mv |
pab@sct.embrapa.br || sct.pab@embrapa.br |
_version_ |
1793416698860142592 |