Otimização dos parâmetros de bombardeamento de partículas para a transformação genética de linhagens brasileiras de milho
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Data de Publicação: | 2014 |
Outros Autores: | , , , , |
Tipo de documento: | Artigo |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Pesquisa Agropecuária Brasileira (Online) |
Texto Completo: | https://seer.sct.embrapa.br/index.php/pab/article/view/19523 |
Resumo: | O objetivo deste trabalho foi desenvolver um sistema de transformação genética para genótipos tropicais de milho pelo bombardeamento de embriões imaturos com micropartículas. O bombardeamento compartículas foi realizado utilizando-se uma construção gênica contendo os genes bar e uidA sob o controle do promotor CaMV35S. As melhores condições para transformação das linhagens de milho tropical L3 e L1345foram obtidas após o cultivo de embriões imaturos durante 4 horas, antes do bombardeamento, em alta osmolaridade, e bombardeados com a pressão de 1.100 psi de gás hélio, dois tiros por placa e uma distância de vôo da micropartícula de 6,6 cm. As freqüências de transformação obtidas variaram entre 0,9 e 2,31%. A integração dos genes heterólogos no genoma das plantas transgênicas de milho foi confirmada por análises de Southern blot e expressão dos genes bar e uidA. O protocolo de transformação genética de milho desenvolvido neste estudo irá aumentar, provavelmente, a eficiência de produção de novas linhagens tropicais de milho expressando características agronômicas desejáveis. |
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Otimização dos parâmetros de bombardeamento de partículas para a transformação genética de linhagens brasileiras de milhoOptimization of particle bombardment parameters for the genetic transformation of Brazilian maize inbred linesZea mays; glufosinato de amônio; beta-glucuronidase; embriões imaturos; fosfinotricina acetil transferase; transformação de plantasZea mays; ammonium glufosinate; beta-glucuronidase; immature embryos; phosphinotricin acetyl transferase; plant transformationO objetivo deste trabalho foi desenvolver um sistema de transformação genética para genótipos tropicais de milho pelo bombardeamento de embriões imaturos com micropartículas. O bombardeamento compartículas foi realizado utilizando-se uma construção gênica contendo os genes bar e uidA sob o controle do promotor CaMV35S. As melhores condições para transformação das linhagens de milho tropical L3 e L1345foram obtidas após o cultivo de embriões imaturos durante 4 horas, antes do bombardeamento, em alta osmolaridade, e bombardeados com a pressão de 1.100 psi de gás hélio, dois tiros por placa e uma distância de vôo da micropartícula de 6,6 cm. As freqüências de transformação obtidas variaram entre 0,9 e 2,31%. A integração dos genes heterólogos no genoma das plantas transgênicas de milho foi confirmada por análises de Southern blot e expressão dos genes bar e uidA. O protocolo de transformação genética de milho desenvolvido neste estudo irá aumentar, provavelmente, a eficiência de produção de novas linhagens tropicais de milho expressando características agronômicas desejáveis.The objective of this work was to develop a genetic transformation system for tropical maize genotypes via particle bombardment of immature zygotic embryos. Particle bombardment was carried out using a genetic construct with bar and uidA genes under control of CaMV35S promoter. The best conditions to transform maize tropical inbred lines L3 and L1345 were obtained when immature embryos were cultivated, prior to the bombardment, in higher osmolarity during 4 hours and bombarded at an acceleration helium gas pressure of 1,100 psi, two shots per plate, and a microcarrier flying distance of 6.6 cm. Transformation frequencies obtained using these conditionsranged from 0.9 to 2.31%. Integration of foreign genes into the genome of maize plants was confirmed by Southern blot analysis as well as bar and uidA gene expressions. The maize genetic transformation protocol developed in this work will possibly improve the efficiency to produce new transgenic tropical maize lines expressing desirable agronomic characteristics.Pesquisa Agropecuaria BrasileiraPesquisa Agropecuária BrasileiraPetrillo, Caroline PereiraCarneiro, Newton PortilhoPurcino, Antônio Álvaro CorsettiCarvalho, Carlos Henrique SiqueiraAlves, José DonizetiCarneiro, Andréa Almeida2014-04-30info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionapplication/pdfhttps://seer.sct.embrapa.br/index.php/pab/article/view/19523Pesquisa Agropecuaria Brasileira; v.43, n.3, mar. 2008; 371-378Pesquisa Agropecuária Brasileira; v.43, n.3, mar. 2008; 371-3781678-39210100-104xreponame:Pesquisa Agropecuária Brasileira (Online)instname:Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa)instacron:EMBRAPAporhttps://seer.sct.embrapa.br/index.php/pab/article/view/19523/12561info:eu-repo/semantics/openAccess2014-04-30T19:38:38Zoai:ojs.seer.sct.embrapa.br:article/19523Revistahttp://seer.sct.embrapa.br/index.php/pabPRIhttps://old.scielo.br/oai/scielo-oai.phppab@sct.embrapa.br || sct.pab@embrapa.br1678-39210100-204Xopendoar:2014-04-30T19:38:38Pesquisa Agropecuária Brasileira (Online) - Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa)false |
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