Seleção de antígenos candidatos à vacina contra carrapatos Rhipicephalus microplus.
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2019 |
Tipo de documento: | Tese |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da EMBRAPA (Repository Open Access to Scientific Information from EMBRAPA - Alice) |
Texto Completo: | http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1110379 |
Resumo: | O carrapato bovino Rhipicephalus microplus é um ectoparasita que transmite patógenos causadores de doenças, como babesiose (Babesia bovis e B. bigemina) e anaplasmose (Anaplasma marginale). Como as vacinas comerciais atualmente disponíveis oferecem apenas uma proteção parcial contra R. microplus, a necessidade de se buscar vacinas mais eficientes é uma tarefa contínua. Proteínas recombinantes foram avaliados usando diferentes estratégias de imunização e elas representam uma grande promessa de potenciais vacinais. Este trabalho teve como objetivo principal, selecionar antígenos candidatos à vacina contra carrapatos Rhipicephalus microplus e posteriormente caracterizar, por métodos moleculares, desenvolvendo uma vacina baseada na proteína recombinante rRmLTI-rBmCG-LTB contra o ectoparasita. Outro objetivo deste trabalho, foi avaliar por métodos in silico, a possibilidade de criar uma vacina global baseada em epítopos conservados da proteína Bm86, contra carrapatos Rhipicephalus microplus. Os antígenos selecionados são partes das proteínas RmLTI e Bm86-CG, fusionados a um antígeno de Escherichia coli (subunidade B). Nesta mesma bactéria, em cepas distintas, foi possível clonar e expressar a proteína recombinate rRmLTI- rBmCG-LTB e caracterizá-la por Western blotting. A proteína recombinante foi avaliada como potencial imunógeno em teste de estábulo com modelos bovinos. A proteína recombinante homogeneizada em adjuvante Montanide? ISA 61 (Seppic), obteve 55,6% de eficiência vacinal. A análise dos soros dos bovinos em teste ELISA possibilitou verificar que a proteína recombinante rRmLTI- rBmCG-LTB, aumentou a imunidade humoral adquirida contra este antígeno. Conclui-se que, foi possível selecionar os antígenos contra o carrapato Rhipicephalus microplus, além de caracterizar e desenvolver uma proteína recombinante com os antígenos selecionados. Apesar da eficiência encontrada para os antígenos serem razoáveis, pesquisas para melhorar esta ferramenta de controle serão indispensáveis. Com relação à possiblidade de se fazer uma vacina global, distintas análises in silico possibilitaram obter três epítopos conservados para a proteína Bm86, que podem ser reconhecidos por células B e MHC, tornando-se potenciais imunogênicos tanto para populações de Rhipicephalus microplus de regiões geograficamente distintas como para a espécies irmã como R. australis, além de outras espécies como R. annulatus, R. decoloratus, devido ao carater conservado de seus peptídeos. |
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