Participação dos núcleos colinérgicos do prosencéfalo basal no desempenho cognitivo de camundongos geneticamente modificados

• Autor(a) principal: Parfitt, Gustavo Morrone Barbat
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da FURG (RI FURG)
• Texto Completo: http://repositorio.furg.br/handle/1/8249
• topic: Memória espacial; Sistema colinérgico; Memória de trabalho; Working memory; Spatial memory; Cholinergic system; Ach

Esta tese de doutorado objetivou compreender como a transmissão tônica colinérgica influencia aspectos cognitivos e comportamentais em camundongos. Nocapítulo 1 desta tese, fazemos uma revisão sobre a modulação colinérgica, gabaérgica e glutamatérgica do septo medial e as implicações no aprendizado aversivo. O capítulo 2, trata sobre os aspectos cognitivos como memória espacial e de trabalho usando como modelo animais geneticamente modificados para o gene do transportador vesicular de acetilcolina (VAChT). Visando entender taismecanismos, foram gerados animais em que a transmissão colinérgica foi abolida no prosencéfalo basal. Para tanto, foram cruzados animais VAChT flox/flox com animais VAChTNkx2.1-Cre gerando a linhagem VAChTNkx2.1-Cre-flox/flox. Camundongos VAChTNkx2.1-Cre-flox/flox tem a proteína VAChT deletada no prosencéfalo basal, causando alteração na liberação de ACh. Neste estudo estes animais foram submetidos a diversas tarefas comportamentais; primeiramente avaliamos a memória espacial no teste de labirinto aquático de Morris (LAM). Nesta tarefa, os animais não apresentaram prejuízos na aquisição e retenção da memória espacial. No entanto, quando o teste reverso foi realizado, no qual a plataforma foi deslocada para o quadrante oposto, os animais apresentaram prejuízos de aquisição e retenção da memória espacial. Posteriormente, estes animais foram submetidos ao teste de pareamento do objeto no lugar, do inglês object-in-place paired-associatedlearning (PAL), que consiste em um tarefa touchscreem para avaliação do aprendizado espacial, apresentando déficits na capacidade de adquirir este aprendizado espacial. Além disso, foi testada nestes animais a capacidade de desenvolver potencialização de longa duração (LTP), in vivo. Esses animais possuem a capacidade de desenvolver LTP, mas não conseguem mantê-la, como observado pelo decaimento da fase tardia da mesma. Para avaliar qual a contribuição da transmissão colinérgica septo-hipocampal nos déficits observados, foram gerados animais VAChT (Knockout) KOs seletivamente para o hipocampo. Para tanto, animais VAChTflox/flox foram injetados com um vetor viral AAV8 contendo o transgene da Cre ou da GFP. Estes animais foram testados nos mesmos comportamentos mencionados acima. Na tarefa de LAM os animais AAV8-Cre não apresentaram déficits, tendo comportamento semelhante ao controle. No entanto, similarmente ao animais VAChTNkx2.1-Cre-flox/flox, durante o teste reverso foram observados prejuízos na aquisição e retenção no LAM. Posteriormente, nestes animais, foi realizada a tarefa de PAL. Nessa tarefa, foi observada uma correlação entre os níveis da proteína VAChT e a performance dos animais. Os níveis da proteína VAChT foram medidos no hipocampo e córtex dos animais por Western Blotting. Ainda, foram realizadas as tarefas de memória de trabalho na tarefa de LAM e de alternações espontâneas. Em ambas as tarefas tanto os animais VAChTNkx2.1-Cre-flox/flox ,quanto os animais AAV8-Cre, apresentaram prejuízos na memória de trabalho. No capítulo 3 desta tese, foram avaliados aspectos da atividade locomotora nestes animais com deleção da proteína VAChT no prosencéfalo basal ou seletivamente na via septo-hipocampal. Para esse objetivo,tanto os animais VAChTNkx2.1-Cre-flox/flox quanto os animais AAV8-CRE foram submetidos ao teste de campo aberto. Neste teste, os animais VAChTNkx2.1-Cre-flox/flox apresentaram um aumento na atividade locomotora em relação aos controles VAChTflox/flox. Entretanto, nos animais AAV8-CRE não foram observadas alterações na atividade locomotora. Posteriormente a atividade locomotora durante o período de 24h foi avaliada, neste período os animais VAChTNkx2.1-Cre-flox/flox apresentaram um aumento da atividade locomotora durante a noite. Em conclusão, essa tese mostrou que a transmissão colinérgica, especialmente através da via septo hipocampal, é crucial para o aprendizado reverso na tarefa de LAM e para o bom desempenho da tarefa de PAL, além de ter importância na memória de trabalho, bem como tem um papel importante no controle da atividade locomora provavelmente mediado pela transmissão cortical.