Radiometric studies of mycobacterium tuberculosis
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 1987 |
Outros Autores: | , , , |
Tipo de documento: | Artigo |
Idioma: | eng |
Título da fonte: | Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo |
Texto Completo: | https://www.revistas.usp.br/rimtsp/article/view/28485 |
Resumo: | A atividade metabólica do M. tuberculosis sob diversas condições experimentais foi estudada utilizando um sistema radiométrico automático, capaz de quantificar o 14CO2 produzido pela oxidação de substâncias marcadas com carbono-14. As experiências realizadas incluíram: a) vias metabólicas; b) determinação dos tempos de detecção para inoculações de diversas magnitudes; c) efeito da filtração sobre a reprodutibilidade dos resultados; d) influência de meio hostil; e) determinação das concentrações inibitórias mínimas para hidrazida, estreptomicina, etambutol e rifampicina f) tempo de duplicação para o M. tuberculosis e M. bovis. Estes microorganismos metabolizaram até 14CO2 o 14c-formato, (U-14C) acetato, (U-14C)glicerol, ácido palmítico, (1-14C) ácido láurico, ((U-14C) L-ácido málico, (U-14C) D glicose e (1-14C) D-glicose, mas não (1-14C) L-glicose, (U-14C) glicina ou (U-14C) piruvato. Usando 14C-formato, (1-14C) ácido palmítico ou (1-14C) ácido láurico foi possível detectar 10 bacilos/frasco em 24-48 horas e até 10 bacilos/ frasco em 16-20 dias. Resultados reprodutíveis foram obtidos sem filtrar a suspensão de bactérias, desde que cultivadas em meio 7H9 líquido com 0,05% de polissorbato 80 e homogenizadas antes da experiência. Drogas que bloqueiam a síntese protêica apresentaram concentração inibitória mínima menor com o método radiométrico do que com o convencional. O tempo médio de duplicação para o M. bovis e várias cepas de M. tuberculosis com diversas substâncias marcadas foi 9 ± 1 horas. |
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Radiometric studies of mycobacterium tuberculosis Estudos radiométricos com o Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium tuberculosis14C-substratesRadiometric systemDrug-actionGeneration time A atividade metabólica do M. tuberculosis sob diversas condições experimentais foi estudada utilizando um sistema radiométrico automático, capaz de quantificar o 14CO2 produzido pela oxidação de substâncias marcadas com carbono-14. As experiências realizadas incluíram: a) vias metabólicas; b) determinação dos tempos de detecção para inoculações de diversas magnitudes; c) efeito da filtração sobre a reprodutibilidade dos resultados; d) influência de meio hostil; e) determinação das concentrações inibitórias mínimas para hidrazida, estreptomicina, etambutol e rifampicina f) tempo de duplicação para o M. tuberculosis e M. bovis. Estes microorganismos metabolizaram até 14CO2 o 14c-formato, (U-14C) acetato, (U-14C)glicerol, ácido palmítico, (1-14C) ácido láurico, ((U-14C) L-ácido málico, (U-14C) D glicose e (1-14C) D-glicose, mas não (1-14C) L-glicose, (U-14C) glicina ou (U-14C) piruvato. Usando 14C-formato, (1-14C) ácido palmítico ou (1-14C) ácido láurico foi possível detectar 10 bacilos/frasco em 24-48 horas e até 10 bacilos/ frasco em 16-20 dias. Resultados reprodutíveis foram obtidos sem filtrar a suspensão de bactérias, desde que cultivadas em meio 7H9 líquido com 0,05% de polissorbato 80 e homogenizadas antes da experiência. Drogas que bloqueiam a síntese protêica apresentaram concentração inibitória mínima menor com o método radiométrico do que com o convencional. O tempo médio de duplicação para o M. bovis e várias cepas de M. tuberculosis com diversas substâncias marcadas foi 9 ± 1 horas. An in vitro assay system that included automated radiometric quantification of 14CO2 released as a result of oxidation of 14C- substrates was applied for studying the metabolic activity of M. tuberculosis under various experimental conditions. These experiments included the study of a) mtabolic pathways, b) detection times for various inoculum sizes, c) effect of filtration on reproducibility of results, d) influence of stress environment e) minimal inhibitory concentrations for isoniazid, streptomycin, ethambutol and rifampin, and f) generation times of M. tuberculosis and M. bovis. These organisms were found to metabolize 14C-for-mate, (U-14C) acetate, (U-14C) glycerol, (1-14C) palmitic acid, 1-14C) lauric acid, (U-14C) L-malic acid, (U-14C) D-glucose, and (U-14C) D-glucose, but not (1-14C) L-glucose, (U-14C) glycine, or (U-14C) pyruvate to 14CO2. By using either 14C-for-mate, (1-14C) palmitic acid, or (1-14C) lauric acid, 10(7) organisms/vial could be detected within 24 48 hours and as few as 10 organisms/vial within 16-20 days. Reproducible results could be obtained without filtering the bacterial suspension, provided that the organisms were grown in liquid 7H9 medium with 0.05% polysorbate 80 and homogenized prior to the study. Drugs that block protein synthesis were found to have lower minimal inhibitory concentrations with the radiometric method when compared to the conventional agar dilution method. The mean generation time obtained for M. bovis and different strains of M. tuberculosis with various substrates was 9 ± 1 hours. Universidade de São Paulo. Instituto de Medicina Tropical de São Paulo1987-02-01info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionapplication/pdfhttps://www.revistas.usp.br/rimtsp/article/view/28485Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo; Vol. 29 No. 1 (1987); 18-25 Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo; Vol. 29 Núm. 1 (1987); 18-25 Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo; v. 29 n. 1 (1987); 18-25 1678-99460036-4665reponame:Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Pauloinstname:Instituto de Medicina Tropical (IMT)instacron:IMTenghttps://www.revistas.usp.br/rimtsp/article/view/28485/30338Copyright (c) 2018 Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Pauloinfo:eu-repo/semantics/openAccessCamargo, Edwaldo E.Kertcher, Judith A.Chen, Marianne F.Charache, PatriciaWagner Jr, Henry N.2012-07-02T00:56:42Zoai:revistas.usp.br:article/28485Revistahttp://www.revistas.usp.br/rimtsp/indexPUBhttps://www.revistas.usp.br/rimtsp/oai||revimtsp@usp.br1678-99460036-4665opendoar:2022-12-13T16:50:12.786306Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo - Instituto de Medicina Tropical (IMT)true |
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A atividade metabólica do M. tuberculosis sob diversas condições experimentais foi estudada utilizando um sistema radiométrico automático, capaz de quantificar o 14CO2 produzido pela oxidação de substâncias marcadas com carbono-14. As experiências realizadas incluíram: a) vias metabólicas; b) determinação dos tempos de detecção para inoculações de diversas magnitudes; c) efeito da filtração sobre a reprodutibilidade dos resultados; d) influência de meio hostil; e) determinação das concentrações inibitórias mínimas para hidrazida, estreptomicina, etambutol e rifampicina f) tempo de duplicação para o M. tuberculosis e M. bovis. Estes microorganismos metabolizaram até 14CO2 o 14c-formato, (U-14C) acetato, (U-14C)glicerol, ácido palmítico, (1-14C) ácido láurico, ((U-14C) L-ácido málico, (U-14C) D glicose e (1-14C) D-glicose, mas não (1-14C) L-glicose, (U-14C) glicina ou (U-14C) piruvato. Usando 14C-formato, (1-14C) ácido palmítico ou (1-14C) ácido láurico foi possível detectar 10 bacilos/frasco em 24-48 horas e até 10 bacilos/ frasco em 16-20 dias. Resultados reprodutíveis foram obtidos sem filtrar a suspensão de bactérias, desde que cultivadas em meio 7H9 líquido com 0,05% de polissorbato 80 e homogenizadas antes da experiência. Drogas que bloqueiam a síntese protêica apresentaram concentração inibitória mínima menor com o método radiométrico do que com o convencional. O tempo médio de duplicação para o M. bovis e várias cepas de M. tuberculosis com diversas substâncias marcadas foi 9 ± 1 horas. |
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