Propriedades bioquímicas e biológicas de proteínas de sementes de leguminosas arbóreas da Amazônia

• Autor(a) principal: Bariani, Adriana
• Data de Publicação: 2007
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional do INPA
• Texto Completo: https://repositorio.inpa.gov.br/handle/1/5023; http://lattes.cnpq.br/2261532429866897
• topic: Inibidor de tripsina; Lectinas; Fungos fitopatogênicos

As sementes de leguminosas apresentam alta concentração de proteínas, incluindo os inibidores de proteinases e as lectinas. Estas proteínas estão envolvidas em vários processos metabólicos nas plantas, incluindo o mecanismo de defesa contra fungos fitopatogênicos. Assim, neste trabalho objetivou-se detectar a presença dessas duas classes protéicas em sementes de quatro espécies de leguminosas arbóreas da Amazônia (Caesalpinia ferrea var. cearensis, Cedrelinga catenaeformis, Swartzia polyphylla e Peltogyne venosa), bem como caracterizar o efeito dos extratos totais sobre o crescimento micelial e a esporulação de Colletotrichum guaranicola Corynespora cassiicola, Fusarium oxysporum e Sclerotium rolfssi. Os extratos totais das sementes foram utilizados nas etapas de detecção, purificação parcial e caracterização de inibidores de tripsina e AHE e em ensaios in vitro sobre fungos fitopatogênicos. Os inibidores parcialmente purificados foram designados CfTI e SpTI, para inibidores de C. ferrea var. cearensis e S. polyphylla, respectivamente. As frações com AHE de C. catenaeformis foram designadas CeCL e as de P. venosa de PeVL. Na presença de 3,8 μg de CfTI e 12 μg de SpTI, a atividade da enzima foi reduzida em aproximadamente 99 % e 62 %, respectivamente. As frações com AHE de CeCL foram inibidas por glicose, lactose, sacarose, manose, maltose, D-galactosamina, -methyl-mannopyranosil e juntamente com as frações de PeVL, houve também inibição pelos açúcares maltose e N-acetil-galactosamina. O EDTA, quando foi adicionado em concentrações de 3,1 mM e 50 mM, não inibiu a AHE de CeCL e PeVL. O teor protéico dos extratos foi de aproximadamente 52, 48, 269 e 82 μg.mL-1 para os extratos de C. ferrea var. cearensis, C. catenaeformis, S. polyphylla e P. venosa, respectivamente. O perfil eletroforético revelou uma única banda em CfTI, oito bandas em SpTI e três bandas em PeVL. Em CeCL as bandas de proteínas ficaram pouco evidentes. A presença do DTT não modificou o padrão de migração das proteínas no gel. Quanto aos bioensaios, os extratos de C. ferea var. cearensis, C. catenaeformis e S. polyphylla tiveram efeito significativo na diminuição da esporulação dos fungos testados, sendo que para Sclerotium rolfssi apenas o extrato de C. ferrea var. cearensis e C. catenaeformis tiveram efeito significativo na diminuição da esporulação. Já na diminuição do crescimento micelial das colônias, os três extratos tiveram efeito sobre F. oxysporum, enquanto que o efeito sobre C. guaranicola foi ocasionado apenas pelo extrato de S. polyphylla, em C. cassiicola apenas pelo extrato de C. ferrea var. cearensis e C. catenaeformis e em S. rolfssi pelos extratos de C. ferrea var. cearensis e S. polyphylla. Portanto, conclui-se que somente C. ferrea var. cearensis e S. polyphylla apresentaram inibidores específicos para tripsina bovina, enquanto que C. catenaeformis e P. venosa podem apresentar lectinas em suas sementes. Isto evidencia que as subfamílias Caesalpinioideae, Papilionoideae e Mimosoideae podem diferir quanto à presença e especificidade dos inibidores de proteinases e lectinas. Os bioensaios in vitro revelaram que nem todos os extratos tiveram efeito na diminuição do crescimento micelial e na esporulação das colônias de C. guaranicola, C. cassiicola, F. oysporum e S. rolfssi.