Estudo comparativo da marcacao do anticorpo anti-CD20 com sup(188)Re

• Autor(a) principal: DIAS, CARLA R. de B.R.
• Data de Publicação: 2010
• Tipo de documento: Tese
• Título da fonte: Repositório Institucional do IPEN
• Texto Completo: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/9502
• topic: monoclonal antibodies; labelling; rhenium 188; radiopharmaceuticals; immunotherapy; chromatography; comparative evaluations

A Medicina Nuclear ?? uma modalidade de particular import??ncia em oncologia e a investiga????o de novos radiof??rmacos direcionados a tumores, seja para diagn??stico e/ou terapia, ?? uma ??rea de interesse para os pesquisadores. Rituximab (RTX) ?? um anticorpo monoclonal (AcM) quim??rico (IgG 1) que se liga especificamente ao ant??geno CD20 com alta afinidade e tem sido usado com sucesso para tratar Linfoma N??o-Hodgkin (LNH) de c??lulas-B. O ant??geno CD20 ?? expresso sobre mais de 90% dos LNH de c??lulas-B. Tecn??cio-99m (99mTc) e r??nio-188 (188Re) representam um atrativo par de radionucl??deos para uso m??dico devido as favor??veis propriedades de decaimento para diagn??stico (99mTc: T1/2 = 6 h, radia????o γ = 140 keV) e terapia (188Re: T1/2 = 17 h, radia????o m??xima = 2,12 MeV) e por causa de sua disponibilidade gra??as aos sistemas de geradores correspondentes 99Mo/99mTc e 188W/188Re. Estes dois radionucl??deos podem ser conjugados aos anticorpos usando m??todos qu??micos similares. O objetivo geral deste trabalho foi estudar a marca????o do AcM anti-CD20 (Rituximab) com o radiois??topo 188Re usando duas t??cnicas: m??todo direto de marca????o [188Re(V)] e m??todo de marca????o via n??cleo carbonila [188Re(I)]. Al??m do controle de qualidade, o anticorpo radiomarcado foi submetido a estudo biol??gico in vivo, in vitro e ex vivo. Para a marca????o direta, o RTX foi reduzido pela incuba????o com o agente redutor 2-mercaptoetanol para a gera????o de grupos sulfidrilas (-SH) e posteriormente marcado com 188Re(V), fazendo-se um amplo estudo de vari??veis para se chegar a uma formula????o otimizada. Para a marca????o usando o n??cleo carbonila foram usados os radiois??topos 99mTc e 188Re e dois procedimentos de radiomarca????o: (1) RTX nativo marcado com 99mTc(I) e (2) RTX reduzido (RTXred) marcado com 99mTc(I)/188Re(I). Tamb??m foi feito um estudo de vari??veis para se chegar a formula????o otimizada. O m??todo de controle de qualidade para avalia????o da pureza radioqu??mica mostrou um bom rendimento de marca????o (93%) para o m??todo direto. Na marca????o com o n??cleo carbonila, os resultados mostraram que os grupos -SH do anticorpo reduzido s??o uma poss??vel via de liga????o. A forma????o do composto 99mTc(I)-RTXred foi mais r??pida do que 188Re(I)- RTXred, que por sua vez mostrou melhor estabilidade em plasma humano e nenhuma transquela????o no desafio a histidina ou ciste??na. Os dois compostos mostraram boa afinidade de liga????o e uma biodistribui????o em camundongos portadores de tumor coerente com a biodistribui????o normal do anticorpo e razo??vel capta????o no tumor provando a efici??ncia do m??todo de marca????o e potencial uso cl??nico.