Compara????o entre a nefrotoxicidade da crotoxina nativa e a irradiada com raios gama de Co-60 em camundongos

• Autor(a) principal: ROCHA, ANDRE M.
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Título da fonte: Repositório Institucional do IPEN
• Texto Completo: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/26084
• topic: snakes; venoms; toxins; kidneys; failures; biological effects; mice; gamma radiation; cobalt 60; comparative evaluations

Os venenos das serpentes s??o compostos prot??icos complexos com extensas atividades biol??gicas. Estas mol??culas abrangem at?? 95% do peso seco do veneno, e compreendem enzimas, toxinas n??o enzim??ticas e prote??nas at??xicas. Dentre as complica????es fisiol??gicas, a Insufici??ncia Renal Aguda - IRA ?? bem comum nos acidentes crot??licos, onde as concentra????es renais do veneno se apresentam at?? 50% maiores do que na concentra????o plasm??tica. A fra????o t??xica respons??vel por essa complica????o ?? a crotoxina. O veneno das serpentes, quando irradiado com raios gama de 60Co, tem a sua toxicidade diminu??da, entretanto, s??o mantidas as suas propriedades imunol??gicas. Nossa hip??tese ?? que a utiliza????o de veneno irradiado em substitui????o ao nativo pode reduzir a taxa de les??es renais em animais de grande porte durante a produ????o de soros antiof??dicos, propiciando melhor qualidade de vida e bem estar desses animais. No presente estudo realizou-se o isolamento da crotoxina por t??cnicas cromatogr??ficas, a partir do veneno da serpente Crotalus durissus terrificus. Parte da toxina isolada foi reservada e denominada crotoxina nativa (CTXN) enquanto que outra parte foi irradiada com 2 kGy de raios gama oriundos de uma fonte de 60Co e denominada crotoxina irradiada (CTXI). Diferentes grupos de camundongos Balb/c receberam a toxina nativa ou irradiada e tiveram seus rins removidos em diferentes tempos p??s-inje????o da crotoxina. Realizou-se a nefrectomia dos animais e foi feito o preparo dos cortes histol??gicos em Hematoxilina-Eosina (HE) e cortes de imunohistoqu??mica com anticorpo policlonal de coelho anticrotoxina. As altera????es histopatol??gicas encontradas nas amostras foram glomerulonefrite (GN), congest??o capilar (CC) e necrose tubular aguda (NTA). Verificou-se que a GN teve maior ocorr??ncia no grupo CTXN que no grupo CTXI. A NTA foi dominante no grupo CTXN em rela????o ao grupo CTXI. A CC foi predominante no grupo CTXI que no grupo CTXN. Entretanto esta diferen??a n??o ?? estatisticamente significante segundo o teste t Student de amostras independentes. O tratamento imunohistoqu??mico revelou que a concentra????o de ant??geno marcado com o anticorpo ?? decrescente segundo os intervalos de tempo de eutan??sia dos animais do grupo inoculado com CTXI, pois a crotoxina quando irradiada tem a sua excre????o renal facilitada. Conclui-se que as altera????es histopatol??gicas GN e a NTA foram significativamente menos frequentes em rins de animais inoculados com CTXI. Diferentemente da crotoxina nativa, a crotoxina irradiada ?? detectada pelo anticorpo anticrotoxina apenas nos tempos intermedi??rios p??s-inocula????o e em baixa concentra????o, indicando que a radia????o gama promoveu mudan??as na forma de liga????o da toxina ao tecido renal, facilitando sua elimina????o e diminuindo, portanto, as chances de les??o. Esses resultados refor??am as evid??ncias de que o uso de veneno irradiado no processo de imuniza????o garante uma melhor qualidade de vida e bem estar aos animais soroprodutores.