Acao da Bothrospstoxina-1 do veneno total de Bothrops jararacussu irradiados sobre o sistema imune

• Autor(a) principal: CAPRONI, PRISCILA
• Data de Publicação: 2009
• Tipo de documento: Dissertação
• Título da fonte: Repositório Institucional do IPEN
• Texto Completo: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/11518
• topic: ionizing radiations; cobalt 60; biological radiation effects; enzyme immunoassay; immunity; venoms; snakes

A radia????o ionizante tem sido empregada com sucesso na modifica????o das propriedades imunol??gicas das biomol??culas e tem se mostrado uma potente ferramenta para destoxicar venenos de serpentes sem afetar e, muitas vezes, melhorando suas propriedades imunog??nicas. Resultados promissores foram obtidos com o tratamento, tanto de veneno total quanto de fra????es isoladas, com a radia????o gama de 60Co. No presente trabalho, foram avaliados os efeitos da Bothropstoxina-1 (Bthx-1) e do veneno total de Bothrops jararacussu sobre o sistema imune de camundongos B10.PL e BALB/c, visando caracterizar a resposta imune contra prote??nas irradiadas. Modifica????es estruturais foram observadas por meio de t??cnicas eletrofor??ticas - SDS-PAGE. Para os ensaios imunol??gicos, camundongos de diferentes linhagens foram imunizados com ambas as formas da Bthx-1 e os anticorpos circulantes foram isotipados e titulados pelo m??todo de ELISA. Os resultados mostraram que tanto o veneno total como a toxina isolada, mesmo ap??s o processo de irradia????o, se mostraram imunog??nicos e os anticorpos produzidos reconheciam as formas nativas. Para a caracteriza????o antig??nica a t??cnica de Western Blot permitiu demonstrar que a Bthx-1 irradiada induziu ?? produ????o de anticorpos responsivos para ambas as formas da toxina isolada e do veneno total. Os resultados do ensaio de citotoxicidade mostram que a viabilidade dos macr??fagos ensaiados com a Bthx-1 ou com o veneno total irradiados foi maior quando comparada com os resultados obtidos para as formas nativas. Analisando-se o resultado do ensaio de LDH, observou-se que a Bthx-1 irradiada promoveu menor dano muscular que a toxina nativa. Conclui-se que a irradia????o de prote??nas promove modifica????es estruturais significativas, mantendo, contudo, suas propriedades imunol??gicas originais, representando uma potencial ferramenta na melhoria do processo de imuniza????o.