Resposta imune frente a bothropstoxina-1 irradiada com sup(60)Co: edentificacao das principais citocinas envolvidas e a participacao de substancias scavengers

• Autor(a) principal: ALVES, JANAINA B.
• Data de Publicação: 2009
• Tipo de documento: Tese
• Título da fonte: Repositório Institucional do IPEN
• Texto Completo: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/11524
• topic: gamma radiation; cobalt 60; ionizing radiations; toxicity; sodium compounds; snakes; venoms; enzymes; immunology

Considerando os efeitos da radia????o gama sobre prote??nas e a capacidade do sistema imune de reconhecer macromol??culas modificadas, decidimos pesquisar as principais citocinas envolvidas no padr??o de resposta de c??lulas Th1 ou Th2 em camundongos (B10.PL, BALB/c ou Knockout-IFN-/-) imunizados com a Bothropstoxina-1 (BTHX-1), uma miotoxina do veneno de Bothrops jararacussu, na forma nativa ou irradiada, na presen??a ou n??o de subst??ncias scavengers. Para avaliar prov??veis modifica????es estruturais na mol??cula da prote??na ap??s o processo de irradia????o (radia????o de 60Co), foi realizada a eletroforese em gel de poliacrilamida 15% para a BTHX-1, na forma nativa e irradiada, na presen??a ou n??o de subst??ncias scavengers. Os resultados mostraram que a radia????o foi capaz de promover altera????es na mol??cula da BTHX-1. Na presen??a dos scavengers, mesmo ap??s a irradia????o da toxina, houve a preserva????o da banda principal (14 kDa). Com rela????o aos aspectos imunol??gicos, foram realizados ensaios de produ????o e identifica????o de anticorpos, nos quais, os animais foram imunizados com a BTHX-1, na forma nativa ou irradiada, na presen??a ou n??o dos scavengers. Observou-se que a prote??na nativa induziu, preferencialmente, uma resposta do tipo Th2, enquanto que a prote??na irradiada induziu uma resposta do tipo Th1. A toxina irradiada na presen??a do tbutanol induziu menor produ????o de IgG2b, quando comparada a toxina irradiada sem scavengers. Para a quantifica????o da express??o de citocinas em c??lulas espl??nicas obtidas dos camundongos, foi realizado o Real-time PCR para a detec????o das citocinas IFN-, IL-2, IL- 4 e IL-10. As c??lulas dos camundongos B10.PL e dos BALB/c imunizados com a BTHX-1 nativa e estimuladas in vitro com a toxina irradiada, apresentaram maior express??o de IFN- e IL-2 (padr??o de resposta Th1). As c??lulas dos Knockout-IFN-/- imunizados com a BTHX-1 nativa apresentaram maior express??o de IL-4 (padr??o de resposta Th2). As c??lulas dos camundongos B10.PL e dos BALB/c imunizados com a BTHX-1 + t-butanol apresentaram maior express??o de IL-4 e IL-10, respectivamente. Estes fatos refor??am a participa????o do OH na modula????o da resposta imune contra a toxina irradiada.