89Zr-Imuno-PET/111In-Imuno- SPECT: desenvolvimento radiofarmac??utico de agentes de imagem molecular para receptores EGF

• Autor(a) principal: BENEDETTO, RAQUEL
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Tese
• Título da fonte: Repositório Institucional do IPEN
• Texto Completo: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/28620
• topic: porins; membrane proteins; membrane transport; epidemiology; immunity; inspection; antibody formation; immunoassay; labelling; in vivo; in vitro; indium 111; zirconium 89; radiopharmaceuticals; process control; radiotherapy; diagnosis; neoplasms; neck; head; large intestine; carcinomas; preventive medicine; health hazards; single photon emission computed tomography; positron cameras

A baixa seletividade dos m??todos convencionais para diagn??stico e terapia de neoplasias, bem como o fato de nem sempre alcan??arem o sucesso terap??utico desejado, configuram dificuldades para a pr??tica oncol??gica. Diante disso, os anticorpos monoclonais (AcMs) radiomarcados, aplicados em t??cnicas diagn??sticas, t??m se destacado, visto que permitem a entrega seletiva da radia????o ao alvo de interesse. A metodologia Radioimunodiagn??stico (RID), utilizando AcM anti-EGFR radiomarcado, possibilita triagem pr??via, avaliando a resist??ncia ao tratamento e estratificando pacientes que possam apresentar benef??cios ?? imunoterapia com cetuximabe. Al??m disso, permite monitorar a progress??o da terapia, visando tratamento mais efetivo e direcionado, promulgando a abordagem da medicina personalizada. No Brasil, ainda n??o h?? radioimunoconjugado dispon??vel para diagn??stico e seguimento do c??ncer. Nesse contexto, o objetivo com este trabalho foi o de desenvolver uma formula????o farmac??utica para padronizar uma rotina de produ????o dos radiof??rmacos para radioimunodiagn??stico de c??ncer de cabe??a e pesco??o e de c??ncer colorretal: cetuximabe-DTPA-111In e cetuximabe-DFO-89Zr. Em adi????o, corroborar na elucida????o dos mecanismos de resist??ncia das c??lulas tumorais ?? terapia com o cetuximabe, atrav??s da realiza????o de estudos de liga????o do radioimunoconjugado ?? receptores celulares. Em rela????o aos radiof??rmacos estudados, destaca-se que os processos de conjuga????o do cetuximabe com os quelantes DTPA, na raz??o molar 1:20, e com o DFO, 1:5, foram bem-sucedidos e otimizados, demonstrando boa reprodutibilidade. Os imunoconjugados apresentaram preserva????o da imunorreatividade e alta estabilidade quando armazenados a -20??C por at?? seis meses. Esses imunoconjugados, quando radiomarcado com 111In e 89Zr, exibiram pureza radioqu??mica superior a 95%, sem necessidade de purifica????o p??s-marca????o, e estabilidade por tempo que possibilita seu transporte ??s cl??nicas distantes do centro produtor. As an??lises in vitro do cetuximabe-DTPA-111In em c??lulas FaDu-C10 (linhagem resistente) demonstraram percentual inexpressivo de liga????o e internaliza????o do radioimunoconjugado, congruindo na explana????o do modelo de resist??ncia conferido ?? linhagem. O estudo de corpo inteiro em MicroPET/TC revelou redu????o no perfil de capta????o no grupo de bloqueio, com excesso de cetuximabe n??o marcado, e intensa capta????o do cetuximabe-DFO-89Zr pelo tumor de c??lulas escamosas no grupo sem bloqueador, confirmando a especificidade in vivo do radioimunoconjugado. Os estudos de biodistribui????o dos radiof??rmacos foram compat??veis com os descritos em literatura e validaram os resultados obtidos por imagens em MicroSPECT/TC e MicroPET/TC, al??m de apresentarem apreci??vel capta????o tumoral, considerando os tempos analisados. A estabilidade alta in vivo e a efic??cia da marca????o foram confirmadas pela baixa capta????o ??ssea e em tecidos n??o alvos. O melhor intervalo p??s-inje????o do radiof??rmaco para avalia????o in vivo foi ap??s cinco dias da administra????o. Conclui-se, portanto, que os radioimunoconjugados para imuno-SPECT e imuno-PET, cetuximabe-DTPA-111In e cetuximabe-DFO-89Zr, s??o ferramentas promissoras para diagn??stico e monitoramento de c??ncer receptor espec??fico (EGFR) e para estratifica????o de pacientes ?? terapia anti-EGFR, encorajando a continuidade deste projeto para futuros estudos cl??nicos.