Estudo da efici??ncia da replica????o in vitro do parasita intracelular Toxoplasma gondii em esferoides formados por nanopart??culas paramagn??ticas produzidas por radia????o ionizante

• Autor(a) principal: NASCIMENTO, ANA C.G.
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Dissertação
• Título da fonte: Repositório Institucional do IPEN
• Texto Completo: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/33129
• topic: nanoparticles; three-dimensional calculations; cell cultures; in vitro; parasites; ionizing radiations

Toxoplasma gondii ?? um protozo??rio capaz de infectar uma ampla gama de seres vivos, dentre eles os felinos que s??o os hospedeiros definitivos da doen??a, toxoplasmose, e animais de pecu??rias e aves. Em humanos o parasita tamb??m pode se apresenta de forma latente ou c??stica, a ??ltima podendo tornar-se cr??nica, fazendo com que o parasita possa se alojar no c??rebro, retina ou m??sculos. A infec????o ocorre pelo consumo de ??gua ou alimentos contaminados com esporozo??tos ou com cistos contendo bradizo??tos encontrados em carne crua. Os taquizoitos da cepa RH possuem r??pida replica????o e relativa dificuldade de manuten????o in vitro, frequentemente requerendo est??gios de cultivo in vivo em animais experimentais. O uso da nanotecnologia pode contribuir para tipos de produ????o in vitro com potenciais ganhos de praticidade e rendimento, por meio do cultivo tridimensional de c??lulas de fibroblastos de camundongo e nanopart??culas sintetizadas com radia????o ionizante. O objetivo deste trabalho foi demonstrar a cultura tridimensional de fibroblastos agregados a nanopart??culas para inocula????o do T. gondii com a inten????o de facilitar o manejo e a replica????o in vitro do parasita. Nanopart??culas de magnetita foram produzidas a partir da redu????o de sulfato ferro heptahidratado em pH altamente alcalino sob a a????o das ioniza????es produzidas por feixe de el??trons entre 15 e 30kGy. As nanopart??culas paramagn??ticas foram adicionadas a cultura de c??lulas, que formaram uma interface ar-l??quido atrav??s do campo magn??tico. Cada esferoide foi infectado por taquizo??tos da cepa RH e mantidos em cultura para avalia????o por microscopia eletr??nica de transmiss??o e por microscopia de fluoresc??ncia com renderiza????o em 3D. A presen??a do parasita foi confirmada por PCR e a quantidade de parasitas livres em cultura foi avaliada por citometria de fluxo. O modelo de cultivo tridimensional utilizado mostrou produ????o sustent??vel de taquizo??tos em at?? 24 horas ap??s ao in??culo, mostrando-se como um potencial substitutivo do uso de animais para manuten????o do parasita.