Caracterizacao espectroscopica de complexos hipocrelina B: lantanideos para uso em terapia fotodinamica

• Autor(a) principal: TOFFOLI, DANIEL J.
• Data de Publicação: 2008
• Tipo de documento: Dissertação
• Título da fonte: Repositório Institucional do IPEN
• DOI: 10.11606/D.85.2009.tde-22062009-104816
• Texto Completo: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/9374
• topic: rare earth compounds; optical properties; lanthanum; europium; terbium; oxygen; spectroscopy; photosensitivity; animal tissues; therapy; in vivo

Um estudo das propriedades ??pticas do crom??foro hipocrelina B (HB) e de seus complexos com os ??ons lant??nio (La3+), eur??pio (Eu3+) e t??rbio (Tb3+) em solu????es em etanol foi realizado. Tal pigmento enquadra-se como um promissor fotossensibilizador de segunda gera????o dadas suas ??timas propriedades, tais como r??pido metabolismo in vivo e principalmente elevado rendimento qu??ntico de gera????o de oxig??nio singleto (FD). O presente trabalho foi desenvolvido em duas etapas: a primeira consistiu do estudo espectrosc??pico dos complexos de hipocrelina B (HB) com os ??ons lantan??deos (Ln3+), e a segunda, de testes de PDT in vitro em cultura do fungo Candida albicans. Na primeira etapa do trabalho, a melhor raz??o molar entre HB e Ln3+ foi verificada atrav??s do monitoramento do pico de absor????o em maior comprimento de onda de cada um dos complexos. O maior deslocamento do pico de absor????o da HB (de 589 nm para 614 nm) foi notado para os complexos com raz??o de 1 mol de HB para 2 mols de ??on lantan??deo. Observou-se que a emiss??o da HB e de seus complexos ocorre desde cerca de 600 nm at?? 750 nm. Foi poss??vel, com base nos espectros de absor????o e de emiss??o, calcular os valores de n??veis de energia da mol??cula e de seus complexos. Todos os fotossensibilizadores apresentaram como menor n??vel de energia valor superior a 0,98 eV, o que ?? um ind??cio de sua capacidade de gera????o de oxig??nio singleto. Foram determinadas as constantes de dimeriza????o das amostras, de maneira a identificar sua tend??ncia ?? forma????o de d??meros ou agregados de ordem superior, e os valores obtidos para a HB e seus complexos com lant??nio, eur??pio e t??rbio foram, respectivamente, de 4,7.104, 3,6.105, 2,1.105 e 1,0.105 M-1. Todas as amostras mostraram-se est??veis perante a a????o de luz de 532 nm de at?? 400 mW/cm2 de intensidade pelo per??odo de uma hora de irradia????o. As capacidades de gera????o de oxig??nio singleto das amostras foram determinadas tanto atrav??s do m??todo espectrosc??pico direto (detec????o da emiss??o do oxig??nio singleto em torno de 1270 nm) quanto do m??todo qu??mico indireto (varia????es na absor????o em 440 nm do composto RNO). Notou-se que para a HB o m??todo direto indicou haver gera????o de oxig??nio singleto, e o m??todo qu??mico revelou que esta esp??cie ?? gerada ?? taxa de 2,8.10-4 s-1; para HB:La3+ (1:1) obteve-se aumento de 32% na gera????o de oxig??nio singleto em rela????o ?? HB, e para HB:La3+ (1:2), determinou-se taxa de 3,0.10-4 s-1 pelo m??todo indireto. Com base nos dados experimentais obtidos, verificou-se que o melhor dentre os complexos estudados foi o HB:La3+ (1:2), sendo este e seu precursor HB ent??o aplicados em testes de PDT antimicrobiana in vitro, constituindo a segunda etapa do trabalho. A concentra????o de HB ideal para trabalho obtida foi de 10 M. Notou-se elimina????o total de microorganismos com apenas 30 segundos de irradia????o com LED de 460 nm e intensidade de 333 mW/cm2 tanto para o complexo como para o seu precursor. Por??m, com excita????o em 660 nm com esta mesma intensidade, apenas HB:La3+ (1:2) se mostrou efetivo, chegando ao efeito fotodin??mico total ap??s 6 minutos de irradia????o; a redu????o causada pela HB no mesmo intervalo de tempo foi bem menos pronunciada, o que comprova a efici??ncia do fotossensibilizador produzido.