Avaliação dos efeitos do laser em baixa intensidade e do ultrassom terapêutico sobre a proliferação e diferenciação de células precursoras miogênicas
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Data de Publicação: | 2011 |
Tipo de documento: | Dissertação |
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Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Uninove |
Texto Completo: | http://bibliotecatede.uninove.br/tede/handle/tede/865 |
Resumo: | The aim of this study was to analyze the effect of low intensity laser (LLLT) and therapeutic ultrasound (US) on the proliferation and differentiation of C2C12 myoblasts. The myoblasts were grown in culture medium Dulbecco's modified Eagle medium (DMEM) containing 10% fetal bovine serum (FBS) and induced to differentiate by replacing the culture medium by DMEM containing 2% horse serum (SC). Treatment with LLLT (780nm, 10mW 5J/cm2 for 12 and 20 seconds) and US (3 MHz, pulsed 20%, 0.2 and 0.5 W/cm2 for 5 minutes) occurred in two different moments: (1) After the process of cellular differentiation (96 h) and (2) Concomitant with the induction of cell differentiation. Cell proliferation was evaluated in two situations using the MTT method and cell differentiation was assessed 1 and 3 days in the situation of the concomitant induction of cell differentiation by means of the determination of activity of creatine kinase (CK). The results were statistically analyzed by analysis of variance (ANOVA), Dunnet test to verify differences between the control group and groups treated with LLLT and US adopting significance of p ≤ 0.05. The results showed no significant difference in the number of cells in the evaluation of treatment with LBI and US after differentiation, yet when the treatment was concomitant with differentiation, decreased cell proliferation in the laser group after 96 hours and 5J/cm2 an increase in intracellular CK activity in this same group three days after the induction of cell differentiation. In conclusion, we found that after cell differentiation both features do not alter cell proliferation during differentiation but treatment with LBI in the energy density of 5J/cm2 caused a reduction in proliferation after 96 and CK activity increased after 3 days which suggests a faster differentiation process. |
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The myoblasts were grown in culture medium Dulbecco's modified Eagle medium (DMEM) containing 10% fetal bovine serum (FBS) and induced to differentiate by replacing the culture medium by DMEM containing 2% horse serum (SC). Treatment with LLLT (780nm, 10mW 5J/cm2 for 12 and 20 seconds) and US (3 MHz, pulsed 20%, 0.2 and 0.5 W/cm2 for 5 minutes) occurred in two different moments: (1) After the process of cellular differentiation (96 h) and (2) Concomitant with the induction of cell differentiation. Cell proliferation was evaluated in two situations using the MTT method and cell differentiation was assessed 1 and 3 days in the situation of the concomitant induction of cell differentiation by means of the determination of activity of creatine kinase (CK). The results were statistically analyzed by analysis of variance (ANOVA), Dunnet test to verify differences between the control group and groups treated with LLLT and US adopting significance of p ≤ 0.05. The results showed no significant difference in the number of cells in the evaluation of treatment with LBI and US after differentiation, yet when the treatment was concomitant with differentiation, decreased cell proliferation in the laser group after 96 hours and 5J/cm2 an increase in intracellular CK activity in this same group three days after the induction of cell differentiation. In conclusion, we found that after cell differentiation both features do not alter cell proliferation during differentiation but treatment with LBI in the energy density of 5J/cm2 caused a reduction in proliferation after 96 and CK activity increased after 3 days which suggests a faster differentiation process.O objetivo do estudo foi analisar o efeito do laser em baixa intensidade (LBI) e do ultrassom terapêutico (US) sobre a proliferação e diferenciação de mioblastos C2C12. Os mioblastos foram cultivados em meio de cultura Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) contendo 10% de soro fetal bovino (SFB) e induzidos à diferenciação pela substituição do meio de cultivo por meio DMEM 2% de soro de cavalo (SC). O tratamento com LBI (780nm, 10mW de potência, 3 e 5J/cm2 de densidade de energia durante 12 e 20 segundos respectivamente) e US (3MHz, pulsado 20%, 0,2 e 0,5W/cm2 durante 5 minutos) ocorreu em dois momentos diferentes: (1) Após o processo de diferenciação celular (96h) e (2) Concomitante à indução da diferenciação celular. A proliferação celular foi avaliada nas duas situações descritas utilizando o método de MTT e a diferenciação celular foi avaliada 1 e 3 dias na situação de tratamento concomitante à indução da diferenciação celular por meio da dosagem da atividade de creatinoquinase (CK). Os resultados foram submetidos à análise estatística por Análise de Variância (ANOVA), teste Dunnet, para verificar diferenças entre o grupo controle e os grupos tratados com LBI e US adotando significância de p≤ 0.05. Os resultados mostraram que não houve diferença significante no número de células, na avaliação do tratamento com LBI e US após a diferenciação, contudo quando o tratamento foi realizado concomitante à diferenciação, houve diminuição na proliferação celular no grupo laser 5J/cm2 após 96 horas e um aumento da atividade de CK intracelular neste mesmo grupo 3 dias após a indução da diferenciação celular. Em conclusão, foi possível verificar que após a diferenciação celular ambos os recursos não alteram a proliferação celular contudo durante a diferenciação o tratamento com LBI na densidade de energia de 5J/cm2 provocou uma redução na proliferação após 96h e aumento de atividade de Ck após 3 dias o que pode sugerir uma aceleração no processo diferenciação.Made available in DSpace on 2015-04-22T17:20:35Z (GMT). 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